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在农村经济发展中,土地流转是比较常见的现象,通过必要的土地流转,土地随着承包关系的转变,得到了充分的利用,对解决农民生活问题和提高土地综合利用率具有重要意义.但是从目前农村土地流转过程来看,农村土地流转中还存在一定的问题,例如土地流转权认识不足、土地流转操作不规范、土地流转政策不明确并缺乏监管以及农村可流转土地较少难以成规模等问题.这些问题都制约了农村土地流转的发展.因此,立足农村经济发展实际,制定具体的对策有效解决农村土地流转问题是十分必要的. 相似文献
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新城疫病毒B95株HN蛋白基因的克隆及序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
根据NDVHN蛋白已知基因序列设计一对引物,以提取的澳大利亚布里斯班NDV分离株B95基因组RNA为模板,利用RT—PCR技术扩增得到一条约1.9kb的条带。将扩增产物克隆到PGEM—T—easy载体中,并对重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,结果证明我们得到了HN基因的阳性重组子,随后采用Sanger’s双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定,获得该基因全长序列,并进行同源性分析。B95株与其他毒株核苷酸同源性为95.1%~87%,氨基酸同源性为96.1%~92.1%。 相似文献
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近年来我国安全生产形势总体稳定,但是重特大事故依然频发.分析研究生产安全事故的概念和特征,并与其相近的、易混淆的概念进行比较,对于确定事故是否属于生产安全事故,适用何种调查处理程序有重要的现实意义. 相似文献
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生理条件下,血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)可与凝血酶结合成复合物,该复合物既可通过激活蛋白C达到抗凝和促纤溶作用;又可经内皮细胞胞吞,通过细胞内溶酶体降解、清除体内凝血酶。另外,TM可与凝血因子Xa特异性结合,抑制凝血酶原的活化,进而使凝血酶的生成速率明显降低。移植后,猪(Sus scrofa)的血管暴露在人(Homo sapiens)血液中,猪TM无法与人的凝血酶发生结合从而使凝血功能紊乱,因此,在猪体内表达人TM是目前解决凝血功能异常的一个新的思路。本研究制备了血管内皮特异性表达人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)的转基因克隆猪,研究了hTM在五指山小型猪血管内皮细胞表达情况。利用Red重组系统从细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)上抓捕获得猪的内源TM启动子。PCR扩增获得hTM的c DNA及牛生长素Poly A(b GHp A)序列,依次酶切连入p Blue ScriptⅨSK(-),构建血管内皮特异性表达hTM的载体。获得的载体p BS-hTM-puro经XhoⅨ线性化,电转染五指山小型猪胎儿成纤维细胞,经1.0μg/m L嘌呤霉素筛选10~15 d得到339个转hTM基因的阳性克隆,取两个生长较好的克隆用于核移植,随后获得重构胚972枚。胚胎移植后产仔猪5头;其中4头经基因组DNA、组织RT-PCR检验为阳性,Western blot结果显示hTM为血管内皮细胞特异性表达。成功获得可特异性表达hTM转基因细胞系及转基因克隆猪,为解决异种器官移植后出现的凝血紊乱问题提供了资料基础。 相似文献
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根据 NDV HN蛋白已知基因序列设计一对引物 ,以提取的澳大利亚布里斯班 NDV分离株 B95基因组 RNA为模板 ,利用 RT- PCR技术扩增得到一条约 1.9kb的条带。将扩增产物克隆到 PGEM- T- easy载体中 ,并对重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了 HN基因的阳性重组子 ,随后采用 Sanger's双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定 ,获得该基因全长序列 ,并进行同源性分析。 B95株与其他毒株核苷酸同源性为 95 .1%~ 87% ,氨基酸同源性为96 .1%~ 92 .1%。 相似文献