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伪狂犬病病毒Ea株gM和gN基因的克隆与结构分析 总被引:2,自引:0,他引:2
gM和Ng是最近经经典免疫沉淀法确定的伪狂犬病病毒(PRV)第三对异源糖蛋白二聚体。根据PRV国外Ka株的核苷酸序列,设计两对分别包含gM和Ng完整编码的特异性引物,以PRV国内地方分离株(Ea株)的细胞感染物为模板,PCR扩增出大小约1.2kb和0.3kb的特异性片段。将扩增物克隆到杆状病毒转座载体pEastBacl中,酶切鉴定证实后进行序列测定。结果表明:Ea株gM、Ng基因分别编码394和98个氨基酸,与Ka株的同源性分别为98.4%和97.6%。DNATool和DNASIS软件对gM、Ng进行二级结构预测,发现gM存在8个潜在跨膜区和一个N-糖基化位点,是典型的能反复多次跨膜的Ⅲ型糖蛋白;gN具有N-端信号肽序列、C-端跨膜区和潜在0-糖基化位点,属Ⅰ型糖蛋白。上述结果为下一步深入研究gM、Ng的相互作用位点及二聚体的功能奠定了功能。 相似文献
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表达绿色荧光蛋白为伪狂犬病病毒转移载体的构建及转移特性 总被引:4,自引:1,他引:4
对含伪狂犬病病毒(PRV)鄂A株gG全基因,PK,gD基因部分编码序列的质粒pUSK进行改造,肖除其中的EcoRI位点,将通过PCR扩增的增强绿色 荧光蛋白基因(EGFP)融合到gG启动子下游,构建了由gG启动子控制EGFP表达的PRV转移载体pgG^-1/EGFP^ ,该转移载体单独转染或同PVR基因组DNA共转梁IBRS-2细胞,结果单独转染时EGFP不能表达,共转梁时,6h就可在荧光显微镜下观测到明显的荧光。 相似文献
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