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为了解不同鸭源鸡杆菌菌株外膜蛋白W基因(ompW)的差异性,对不同地域32株鸭源鸡杆菌ompW基因进行扩增、测序,并应用DNAstar/MegAlign和MEGA.5.05软件对其进行比对及遗传进化分析。结果表明:ompW基因存在于所有检测的鸭源鸡杆菌中。全长在630~711bp,编码209~236个氨基酸。与参考株UMN179的ompW核苷酸同源性为88.7%~100%,氨基酸同源性为86.7%~99.6%。不同来源的鸭源鸡杆菌的核苷酸同源率为84.1%~100%,氨基酸同源性为78.7%~99.6%。进化树分析表明,鸭源鸡杆菌ompW序列差异与分离地理位置,毒力无明显的相关性。 相似文献
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为了了解毒素GtxA对鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis,G.anatis)生物学特性及致病性的影响,利用自然转化和正向筛选法构建了1株G.anatis gtxA缺失突变株,初步探究突变株的生物学特性。与亲本菌株比较,突变株溶血活性消失,菌落形态及生长速率并未出现显著改变,其对小鼠的致病力下降。外毒素GtxA参与G.anatis致病过程并扮演一定角色;G.anatis gtxA基因突变株的构建及其生物学特性探究为更好的了解其致病机理和研发出更为高效安全疫苗建立了理论基础。 相似文献
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为了验证疫苗的有效性和选择较好的疫苗,使用惠中生物圆支二联疫苗,以及其他4种疫苗进行免疫,评估不同圆环疫苗的免疫效果,以选择最佳圆环疫苗种类,提高猪场生产效率和生产水平。对湖南省某种猪场3周龄左右健康哺乳仔猪400头,随机分为5组,每组80头,分别标记为A组(国产亚单位圆环疫苗)、B组(国产全病毒圆环灭活疫苗)、C组(进口圆环疫苗1)、D组(进口圆环疫苗2)、惠中组进行试验,通过统计日增重、料肉比、腹泻率、死淘率等主要生产指标以及血清学变化情况,评估不同圆环疫苗的免疫效果,以选择最佳圆环疫苗种类,提高猪场生产效率和生产水平。惠中组死淘率为2.5%,低于A组(3.75%)、B组(3.75%)、C组(3.75%)、D组(6.25%);以及育肥阶段惠中组的料肉比为2.07,优于A组(2.13)、B组(2.17)、C组(2.13)、D组(2.21),且长势良好;惠中组在105日龄时抗体水平平均值、离散度及阳性率远远高于其他试验组。因此。免疫洛阳惠中圆环支原体二联灭活疫苗的试验组抗体保护期长,抗体水平高,充分保证仔猪健康程度,降低死淘率以及收益方面具有明显的优势。 相似文献
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用PCR方法从鸭源鸡杆菌中国分离株PDS-RZ-1-SLG中扩增flfA基因,并运用生物信息学软件分析鸭源鸡杆菌菌毛蛋白FlfA的二级结构、表面可及性与B细胞优势表位簇;将目的基因插入原核表达载体Pet28a(+),经PCR、酶切及测序鉴定成功构建重组表达质粒pET28a(+)-FlfA,然后转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组质粒表达;SDS-PAGE和Western blot鉴定FlfA的表达及抗原性。结果显示:成功获得与预期大小一致的573bp的flfA基因;FlfA蛋白结构分析显示其二级结构以无规则卷曲为主,表面存在很多抗原表位;PCR及酶切等鉴定表明重组表达质粒pET28a(+)-FlfA构建成功。SDS-PAGE分析显示,经IPTG诱导表达获得相对分子质量约20 000的重组蛋白;Western blot分析结果显示重组菌毛蛋白能被兔抗rFlfA多抗血清和鸡抗鸭源鸡杆菌血清识别,抗原性良好;而且,rFlfA多抗血清与菌毛蛋白具有良好反应性。 相似文献
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为筛选鸭源鸡杆菌(G.anatis)潜在的保护性抗原基因,参考Gen Bank中G.anatis UMN179的外膜蛋白A(OmpA)基因序列设计1对引物,对鸭源鸡杆菌PDS-RZ-1-SLG(RZ)株的OmpA基因进行克隆,并应用相关软件对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析。结果显示,OmpA基因大小为1 083 bp,编码360个氨基酸;鸭源鸡杆菌RZ株的OmpA与UMN179、F149及12656/12的OmpA氨基酸相似性分别为93.2%、95.2%、92.7%;OmpA蛋白分子质量为38.4 ku,等电点为6.77,具有稳定性,N端有1个疏水性的α螺旋信号肽。 相似文献
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