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为了研究猪囊尾蚴乳酸脱氢酶(LDH)的表达,试验选择四川省雅江县呷拉乡猪带绦虫病患者,给其口服槟榔-南瓜子驱虫,收集、制备虫卵悬液(8万个/mL),再给3头20日龄三元杂交乳猪猪灌胃虫卵悬液,每头1 mL,40 d后收集、制备猪囊尾蚴蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析,将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用自制的大鼠抗猪带绦虫LDH血清作为一抗、健康大鼠血清作为阴性对照进行蛋白质印迹(Western-blotting)分析。结果表明:双向电泳凝胶共检测到(207±9)个蛋白质斑点,相对分子质量(Mr)为14 400~94 000,等电点(pI)为3.0~10.0;试验组特异性抗原抗体阳性杂交斑点为1个,阴性对照未见阳性杂交斑点;将Western-blotting检测的抗原抗体阳性杂交斑点与原双向电泳凝胶斑点进行比对,找到对应蛋白斑点,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析后初步确定该蛋白斑点的pI/Mr为7.03/35 368,与猪带绦虫LDH的pI/Mr理论推导值接近,说明猪囊尾蚴表达LDH。 相似文献
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目的建立枳实薤白桂枝汤基准样品多指标成分含量测定方法,采用单因素方法优选煎煮工艺,在“尊古”前提下,实现标准化的生产工艺,保证物质基准的质量稳定。方法在参考古籍的基础上,结合现代的研究手段,以柚皮苷、新橙皮苷、厚朴酚、和厚朴酚为指标,建立基准样品HPLC含量测定方法,以加不加盖、浸泡时间、煎煮火候、煎煮时间、干燥方式5个因素为参数,以出膏率和指标性成分含量为评价指标进行综合评分,优选合理的工艺参数,并对最佳工艺进行工艺验证。结果枳实薤白桂枝汤基准样品最佳工艺参数为:取枳实、厚朴,加水1000mL,加盖煎煮,武火煮沸,文火煎至煎液体积为400mL,100目筛网过滤,煎液加入薤白、瓜蒌、桂枝,武火煮至3沸(1h),100目筛网过滤,得汤液约200mL,减压浓缩至100mL,冷冻干燥,即得。结论优选的制备工艺参数稳定可行,为枳实薤白桂枝汤颗粒剂的制备工艺研究提供参考。 相似文献
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