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生长激素对动物的生长发育具有重要作用。而肝脏是生长激素发挥生理作用的重要靶器官。生长激素在肝细胞上发挥生理作用的主要信号转导通路是JAK-STATs、ERK等。在饥饿应激条件下,生长激素的作用减弱,动物机体IGF-1的分泌量大大减少,但其减少的原因尚不清楚。本研究通过饥饿大鼠使其处于应激状态,在饥饿应激模型上研究生长激素对肝脏细胞一些主要信号通路的影响。将大鼠分为2组,一组为正常饲喂组(48h),另外一组为饥饿组(48h),通过门静脉注射重组人生长激素,在注射后的0和25min时进行离体肝脏灌流并分析胞内信号分子磷酸化水平的变化。结果显示,正常饲喂条件下,注射生长激素组鼠肝脏细胞的JAK2、STAT1/3/5、ERK1/2等胞内信号分子会发生明显磷酸化,但在饥饿组,只能观察到肝细胞JAK2和STAT1/3/5微弱的磷酸化,ERK1/2磷酸化程度没有变化。此外,饥饿并没有改变细胞内蛋白总量和肝脏细胞表面受体的数量。因此,本研究表明,饥饿应激下大鼠对生长激素不敏感是由于生长激素介导的胞内信号通路改变引起。 相似文献
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【目的】制备生长激素受体的单克隆抗体,探讨其对生长激素受体的激活作用,为研究生长激素模拟物提供新思路。【方法】以生长激素受体胞外域(GHBP)免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤技术制备抗生长激素受体的单克隆抗体,用流式技术筛选抗体,通过流式、激光共聚焦显微镜观察研究该单克隆抗体对生长激素受体的激活作用,然后通过Western-blot等技术手段研究其胞内的信号通路。【结果】通过杂交瘤技术共获得了30个分泌抗生长激素受体的单克隆抗体,经流式分析筛选到具有受体激动剂活性的单克隆抗体(命名为L8)。竞争性结合分析结果表明,L8在受体上的结合表位与生长激素重叠;激光共聚焦观察结果表明,L8不但能结合到细胞表面的生长激素受体,而且还能内化进入胞体。经Western-blot和流式分析表明,L8能与转染GHR基因的CHO-GHR638细胞表面的生长激素受体结合,并启动JAK2-STAT5、ERK1/2信号转导通路,且呈现出剂量依赖性。【结论】生长激素受体抗体可以作为受体的激动剂,其可能是通过诱导受体构象变化的方式激活受体,并启动JAK2-STAT5等信号转导通路。 相似文献
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本研究采用改良的两步胶原酶灌流法分离培养大鼠肝脏细胞,并对其进行了形态学观察、功能检测及表面受体的鉴定,以探索其短期培养的最佳功能状态。结果表明,平均每只大鼠可获取2.12×108个肝脏细胞,平均活率达94.23%;光镜下观察发现肝脏细胞呈多角形并成片生长;对肝脏细胞的LDH、Alb和尿素进行连续检测,结果发现细胞离体培养第3天功能较好;Mab263-PE单抗鉴定结果显示,肝脏细胞生长激素受体功能健全尚未受损,为细胞信号转导等相关试验奠定了基础。 相似文献
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生长激素(growth hormone,GH)对动物的生长发育具有重要的生理作用.GH与生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合后才会发挥一系列的生理作用.近年来,人们对GHR结构和功能的研究取得了巨大的进展,并取得了一些重大的突破.现在已清楚了GH-GHR轴激活一些相关的信号转导通路,但并非所有的通路都依赖酪氨酸激酶.作者从以下几个方面总结了GHR作用下的信号转导机制的研究进展:GHR的结构与功能;依赖JAK2的相关信号通路;不依赖JAK2的相关信号通路;GHR信号负调控因子.阐明这些复杂机制,对进一步了解GH对动物不同的生理和病理作用具有重要意义. 相似文献
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