排序方式: 共有1条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1
1.
结核分枝杆菌三种分泌蛋白在原核表达载体中的克隆、表达与鉴定 总被引:5,自引:1,他引:5
对结核分枝杆菌的三种分泌蛋白Ag85B,ESAT-6和MPT-64基因进行克隆、鉴定与表达,为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测打下基础。以结核杆菌H37RV株基因组DNA为模板,用PCR法对基因Ag85B、ESAT-6、MPT-64进行扩增,产物与载体质粒pET22b和pGEX-4T-1构建表达Ag85B、ESAT-6、MPT-64的重组质粒,将此重组质粒先转化到大肠杆菌DH5a内抽提质粒,酶切检验,再转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)PLysS菌株内,对转化菌株以IPTG进行诱导后,破菌,离心,上清进行SDS-PAGE电泳,电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,所表达的蛋白质相对分子质量为30000、6000、50000。结果表明:目的基因克隆到菌株内,重组结核杆菌分泌蛋白Ag85B、ESAT-6、MPT-64的成功表达为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测以及上述三种抗原、抗体的大规模制备打下基础。 相似文献
1