蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对血小板聚集、肌动蛋白聚合的影响

本实验分别以阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Apyrase去除ADP,研究蛋白激酶C在血小板聚集、肌动蛋白聚合过程中的作用。研究结果表明:蛋白激酶C在血小板激活过程中起着重要的调节作用,蛋白激酶C     

原发性肾病综合征患者血、尿γ-干扰素的检测及其临床意义

目的：为进一步阐明γ—干扰素(IFN—γ)在原发性肾病综合征(PNS)发生发展中的作用及检测IFN—γ的临床诊断价值。方法：对32例PNS患者及10例正常人血清、尿液IFN—γ的水平进行检测，并结合PNS病理类型及其他临床指标进行分析。结果：系膜增生性肾炎(MesPGN)患者尿IFN—γ水平显著高于正常对照组，而非增生性肾炎组却与对照组差异无显著性；其次，尿IFN—γ水平与尿纤维蛋白(原)降解产物(FDP)浓度呈正相关；但与血肌酐(Ser)、血清肌酐清除率(Ccr)、24h尿蛋白定量(24hUPQ)无相关性。血清IFN—γ水平各组问差别无统计学意义。结论：IFN—γ参与增生型PNS免疫性肾损伤过程，并可能通过局部方式起作用，尿IFN—γ检测有可能作为区分增生性肾炎和非增生性肾炎的指标。     

PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）,蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）,酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下,利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板,然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物;ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ,血小板发生聚集;（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化,ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中,ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活,４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。     

中草药提取物MACC5对大鼠抗Thy1.1系膜增生性肾炎模型的疗效观察

目的观察中草药提取物MACC5(为广东医学院肾脏病研究所提取物代号)对SD大鼠抗Thy1.1系膜增生性肾炎实验模型的疗效。方法制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清(ATS),再将ATS经尾静脉注射给SD大鼠,诱导其发生系膜增生性肾炎(MsPGN)后,随机分为3组,每组5只;试验组分别经腹腔注射MACC51.0mL和3.0mL,对照组注射生理盐水(NS)1.0mL;每日观察其尿量、尿蛋白定量,并于第11天处死各大鼠,取肾组织切片观察系膜增殖程度,并用免疫组化法检测肾小球系膜区细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果两试验组24h尿量均多于对照组(P<0.05);两试验组尿蛋白定量均少于对照组(P<0.01);两试验组单位肾小球系膜细胞(GMC)数均少于对照组(P<0.001); MACC53.0mL试验组肾小球系膜区PCNA的表达低于对照组(P<0.05)。结论MACC5对大鼠MsPGN实验模型具有利尿、降低尿蛋白和促进肾小球系膜损伤修复的作用。     

肌醇脂质和cAMP在血小板活化因子诱导血小板聚集中的作用

目的：探讨肌醇脂质和cAMP两个细胞内第二信使系统在血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集过程中所起到的作用和相互关系。方法：采用PKC激动剂PMA和Ca^2 通道A23187,以及PKA激动剂Sp-cAMPS和抑制剂Rp-cAMPS干预的方法,分析观察这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的作用;采用^3H—Inositol和^14C-Adenine双标记液体闪烁技术测定PAF诱导血小板可逆聚集过程中肌醇-1,4,5-三磷酸酯(IP3)和cAMP的水平变化的方法,分析研究这两个信使系统在PAF诱导血小板聚集过程中的相互关系。结果：(1)PMA和A23187能分别增强PAF的血小板聚集效应,而且两者具有协同作用;(2)Rp-cAMP和Sp-cAMPS两者本身都不能引起血小板聚集,但能分别增强和抑制PAF的聚集效应;(3)IP3和cAMP的水平变化分别与血小板的聚集和解聚过程一致。结论：(1)肌醇脂质信使系统是细胞内转导PAF诱导血小板聚集的主要胞内信使系统。(2)降低血小板内cAMP浓度不能诱导聚集,但能增强肌醇脂质信使系统的聚集效应;升高cAMP水平能拮抗肌醇脂质信使系统的作用,这可能是使可逆相聚集的血小板解聚的一个重要机制。     

尼卡地平诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡的作用及其分子机理的探讨

目的：探讨尼卡地平对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响及其分子发机理。方法：常规分离培养大鼠肾小球系膜细胞，ＤＮＡ电泳，Ｈｏ３３３４２染色，流式细胞仪等方法观察尼 平对细胞凋亡及其调控蛋白Ｂｃｌ－２，Ｂａｘ，Ｆａｓ，ＦａｓＬ表达的影响。结果：尼卡地平在体外可诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡并伴Ｂｃｌ－２蛋白表达下降。     

蛋白激酶C激动剂PMA和凝血酶对血小板骨架蛋白的作用

本文研究PMA和凝血酶对血小板骨架蛋白形成的影响。结果表明,(1)在凝血酶诱导的血小板骨架蛋白不溶微丝中,肌动蛋白,肌球蛋白重链(MHC)、肌动蛋白结合蛋白。56K、80K、84K蛋白明显增加。PMA诱导     

人红细胞胞浆液中腺苷脱氨酶的分离

腺苷脱氨酶是机体重要腺苷代谢酶之一,能催化腺苷嘌呤环上6-位氨基脱氨,从而生成肌苷的氨解反应,与腺苷激酶、5′-核苷酸酶及 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶共同使机体腺苷水平保持相对稳定。文献报道人体组织中的腺苷脱氨酶分子有多种形式,其表观分子量分别为36000、114000、200000和298000。本文报告一种用亲和层析法,从人红细胞胞浆液中分离腺苷脱氨酶的新的简便快速方法。所采用的亲和层析胶,为 N~6-(6-氨己基)腺苷-Sepharose4 B 凝胶,是由N~6-(6-氨己基)腺苷与经溴化氰活化的 Sepharose4 B 胶偶联而成。人红细胞胞浆液中的腺苷脱氨酶,经两次亲和层析分离后,比活性提高了197倍,酶活性回收率为49%。高效液相凝胶排阻层析分析的结果表明,分离出的酶蛋白制剂含有表观分子量分别为36000、72000、114000和64000的四种蛋白质组分。其中前三种组分的表观分子量与文献报道基本相符。     

贝那普利对抗Thy1．1大鼠系膜基质积聚及尿蛋白的影响

目的 :观察血管紧张素转换酶抑制剂贝那普利 (Benazepril)对系膜增殖性肾炎 (Ms PGN)大鼠系膜基质积聚及尿蛋白的影响。方法 :用抗胸腺细胞血清诱导 SD大鼠产生 Ms PGN后 ,用 Benazepril治疗 2 4d,处死大鼠并留取肾脏 ,用 EL ISA法测定大鼠肾小球系膜中胶原 ,胶原 ,层粘连蛋白 (L N) ,纤维结合蛋白 (FN)的含量 ,并用双缩脲法测各大鼠的 2 4h尿蛋白量。结果 :治疗组与对照组大鼠 2 4h尿蛋白量分别为 (30 .91± 2 2 .88) mg和 (38.5 3± 2 5 .2 0 ) mg(P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;治疗组与对照组大鼠系膜中胶原 ,胶原 ,L N,FN的含量之比分别为 1∶ 1.93,1∶ 3.87,1∶ 2 .47和 1∶ 2 .0 8,各对应成分之间两两比较均有显著性差别 (P<0 .0 1)。结论 :Benazepril对 Ms PGN大鼠系膜基质的积聚和尿蛋白排泄都具有明显的抑制作用。