禽流感病毒鸡胚液离心工艺的摸索

本实验采用高速管式离心机对收获的抗原做离心纯化处理,选用辽阳隆达制药机械有限公司生产的GQ125-LD分离机,在18000r/min转速条件下,病毒液分别以30万mL/h、36万mL/h、42万mL/h通过管式离心机,处理后分别抽样进行HA检测并称量分离出固相量。对比不同处理速度下的结果,初步确定在使用8#喷嘴的时候,病毒液以36万mL/h的速度通过管式离心机是最佳的离心方案。     

壳聚糖酶解液对抗药性大肠杆菌的抑制作用

采用微波法从根霉菌丝体中提取壳聚糖,经纤维素酶非特异性降解得到其寡糖溶液。采用其中初步抑菌效果较好的COS3-2、COS4-2、COS4-3、COS4-4分别对氨苄青霉素抗性大肠杆菌进行抑菌实验,结果表明:壳聚糖纤维素酶解液COS3-2、COS4-2、COS4-3、COS4-4对抗药性大肠杆菌均有较好的抑制作用,其中酶解液COS3-2的抑菌活性最强,当浓度为2.5%时抑菌圈直径达到18.6 mm,最低抑菌浓度(minimal inhibiting concentration,MIC)为0.05%;壳聚糖酶解液的抑菌作用随着酶解液浓度的增加而增强,并且抑菌作用需要一定的环境,在pH值5.5～6.0范围内,对氨苄青霉素抗性大肠杆菌有很好地抑制作用,pH值过高抑菌作用减弱。     

不同消毒方式对禽用胚苗、种胚孵化率及疫苗质量的影响

禽用胚苗,系采用鸡胚、鸭胚等作为主要原材料生产的禽用疫苗.由于鸡胚产量大,供应足,价格低,取材广泛,生产周期短等优点,大多数禽用胚苗采用鸡胚作为主要原料.禽用病毒疫苗的生产,一般是以无特定免疫原性的鸡胚作为病毒繁殖的寄主,经孵化病毒扩增后,收获胚内病毒含量较高的部分用来制造疫苗.可见,在疫苗生产过程中需要用到大量的鸡胚.鸡胚成活率、外源物质对终产品的影响,是决定疫苗生产成本及品质的两个关键因素.其中,影响鸡胚成活率的一个重要原因是鸡胚外表面的细菌污染.为了寻找更适合实际生产的鸡胚外表面灭菌方法,提高鸡胚孵化成功率,降低生产成本,我们设计了如下试验:采用连续80余批次种胚,采用不同的消毒方式对鸡胚外表面进行处理,取得比较明显的效果.现报告如下:     

益生素在家禽养殖中的应用

随着生活水平的提高,人们对肉、蛋、奶的需求量不断增加,畜禽养殖规模也日益扩大,近年来畜禽病害发生越来越频繁,长期使用抗生素不仅会使细菌产生耐药性,动物消化道菌群失衡和免疫力降低,还会破坏养殖环境的微生物种群,同时抗生素在动物体内残留,也严重危害人类健康.益生素能通过改善动物消化道微生态平衡,抑制肠道有害微生物的生长与繁殖,增加动物机体免疫功能来增强畜禽体质,防止细菌感染,减少抗生素的使用,提高饲料利用率和畜禽的生长率,为养殖业的可持续发展提供了新的途径.益生素具有无毒、无抗药性、无残留等优点,是新型饲料添加剂的发展方向,其应用越来越受到人们的关注.     

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫效力研究

为评估重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对商品肉鸡的免疫保护效果,本研究将该疫苗按照现地免疫程序分别接种10日龄白羽肉鸡和14日龄黄羽肉鸡,疫苗接种前和接种后每周采血,分离血清,检测H5亚型Re-8株和H7亚型H7-Re1株禽流感病毒(AIV)HI抗体滴度,并在初次免疫后3周和出栏时以鼻腔感染方式分别进行攻毒试验。结果显示,免疫前,所有肉鸡血清中H7亚型H7-Re1株AIV HI抗体滴度均低于1log2,H5亚型Re-8株AIV平均HI抗体滴度分别为5.3log2(白羽肉鸡)和4.1log2(黄羽肉鸡);一次免疫的白羽肉鸡在免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度在6.0log2~6.7log2;2次免疫的黄羽肉鸡在初次免疫后3周至出栏时,2种亚型AIV平均HI抗体滴度均在6.0log2以上。在一次免疫后3周时和出栏时,采用高致病性H5、H7亚型AIV攻毒后,对照组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均全部死亡,免疫组白羽肉鸡和黄羽肉鸡均不发病、不排毒、不死亡,获得100%的免疫保护。本研究结果表明,重组AIV二价灭活疫苗对商品肉鸡具有良好的免疫效果,为该疫苗的现地应用提供了参考依据。     

禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。     

H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究

本实验对经反向遗传方法构建的重组禽流感H5N1亚型变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫效力进行研究.将Re-4株接种SPF鸡胚后37℃培养72 h,鸡胚存活,无病变,HA滴度达29;以0.1 mL(106.0EID50/0.1 mE)的剂量鼻腔感染4周龄SPF鸡7 d后血清HI抗体转阳,无任何症状,也不排毒;SPF鸡静脉致病指数(IVPI)为0;以Re-4重组株为种毒制备灭活疫苗,免疫SPF鸡后,3周后平均HI抗体效价达8.75 log2:免疫鸡对亲本强毒株CKSX/06,以及变异株CKNX/06和流行株GSGD/96攻击提供完全保护.以上结果表明变异株灭活疫苗种毒Re-4株对SPF鸡胚和SPF鸡无致病性、适合鸡胚增殖、抗原针对性强,并且以该毒株制备的灭活疫苗具有良好的免疫效力,是研制预防H5N1亚型禽流感病毒山西变异株的理想疫苗种毒株.