四种二肽对奶牛乳腺上皮细胞增殖及β-酪蛋白分泌的影响

通过添加不同浓度的二肽:蛋氨酸-蛋氨酸、赖氨酸-赖氨酸、蛋氨酸-赖氨酸、赖氨酸-蛋氨酸二肽,用CASY细胞活力分析仪检测奶牛乳腺上皮细胞的增殖和活力,用荧光定量PCR、HPLC检测β-酪蛋白的基因表达情况,确定培养24 h时四种二肽的最佳添加浓度分别为80、100、50、80μg.mL-1。以最佳二肽浓度添加时细胞的增殖分别为1.28×105、1.66×105、1.79×105、.85×105cells.mL-1,活力分别为93.72%、95.59%、94.35%、95.65%,培养液中β-酪蛋白含量分别为1.34、1.38、1.44、1.63 mg.10-5cells。为进一步利用小肽提高乳蛋白产量、调控乳蛋白合成提供理论依据。     

高赖氨酸蛋白基因Cflr在枯草芽孢杆菌中表达

赖氨酸作为家畜限制性必需氨基酸,其饲料含量直接影响到家畜蛋白质合成。试验利用基因工程方法,从辣椒花药中克隆出高Lys蛋白基因(Cflr),与载体pHT43构建成重组表达质粒,将其转入枯草芽孢杆菌中,IPTG诱导表达,基因在mRNA水平有表达,SDS-PAGE中出现一条明显的蛋白条带,大小为24 ku;经HPLC检测赖氨酸含量,重组菌赖氨酸含量比野生型菌株提高16.05%。该重组菌为以后其作为饲料添加剂进一步应用提供技术基础。     

营养素调控奶牛乳蛋白合成的研究进展

乳蛋白含有机体几乎所有的必需氨基酸,有较高的营养价值。随着蛋白质营养研究的深入,如何提高乳蛋白的产量,改善乳品质已成为当今研究的热点。本文从营养素角度,对碳水化合物、氨基酸及小肽三方面对奶牛乳蛋白合成调控的影响做综述。     

催乳复合物、胰岛素样生长因子-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞中AKT-1和mTOR表达的作用

信号转导分子AKT-1、mTOR对于乳腺上皮细胞中乳蛋白的转录和翻译至关重要,胰岛素、地塞米松和催乳素组成的催乳复合物(DIP)是包括AKT-1/mTOR在内的多种泌乳信号途径激活的必要条件。采用qRT-RCR和Western blotting分别检测不同培养时间点奶牛乳腺上皮细胞AKT-1、mTOR的mRNA和蛋白质水平表达情况,结果显示,在DIP培养条件下,AKT-1和mTOR表达量均上升。添加胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)后进一步促进了AKT-1 mRNA和蛋白质的表达;同时,mTOR mRNA和蛋白质水平的表达也增加,且均有显著差异(P<0.05),结果表明DIP存在时,IGF-Ⅰ上调AKT-1和mTOR的表达,增强了AKT/mTOR途径。