猪圆环4型病毒Cap蛋白的原核表达

以本实验室扩增的内蒙猪圆环4型病毒(PCV4)毒株的ORF2基因序列为参考,对其密码子进行优化并送往公司进行质粒合成,通过设计特异性引物,扩增出Cap蛋白基因.将目的基因克隆至pET-28a载体,构建出pET28a-PCV4-Cap重组表达质粒.将重组质粒转化至表达宿主菌BL21(DE3)pLysS中进行诱导表达,制备...     

动物福利在水产养殖中的应用

国际上对动物福利的定义,即为动物享有生理、心理、环境、卫生和行为方面的福利与自由。世界动物卫生组织《水生动物卫生法典》在水生动物运输、宰杀方面制定了福利指导标准。而我国仅有《中华人民共和国渔业法》和《中华人民共和国水生野生动物保护实施条例》2部水生动物福利相关法律法规,因此面临国际动物福利壁垒限制我国水产品出口问题。建议我国加强水生动物福利立法与宣传,推动水生动物福利措施在养殖、运输、屠宰等环节中的应用,走出一条适合国情的动物福利法治之路。     

传染性皮下及造血组织坏死病毒NJ株ORF3基因的原核表达及生物信息学分析

为探究本实验室分离的传染性皮下及造血组织坏死病毒NJ株(IHHNV-NJ)ORF3基因编码蛋白的结构特征,本实验根据ORF3基因序列设计引物,利用PCR方法克隆ORF3基因序列,并构建至原核表达载体p ET-32a(+)中。对成功构建的p ET32a-ORF3重组表达载体进行原核表达,获得49 ku的融合蛋白,符合预期大小。通过生物信息学软件对ORF3基因编码蛋白序列进行分析,结果显示,ORF3基因序列长度为990 bp,编码329个氨基酸;ORF3基因编码蛋白理论分子质量为37 385.2 u,等电点为7.22,为亲水性蛋白;该编码蛋白序列不存在跨膜区、信号肽切割位点;二级结构含有55.9%的α-螺旋、52.0%的β-折叠以及13.4%的β-转角;抗原表位分布较广泛,抗原性强;该编码蛋白序列不存在潜在的N-糖基化位点,存在13个潜在的O-糖基化位点和17个潜在的磷酸化位点。进化树结果表明,NJ株的ORF3基因编码蛋白序列与6株IHHNV序列同源性均高于96%,与厄瓜多尔株同源性最高,为99.7%。研究表明,ORF3基因编码IHHNV衣壳蛋白;O-糖基化位点可参与衣壳蛋白的组装过程及细胞侵染过程,磷酸化位点可参与病毒在对虾细胞内的增殖过程;ORF3编码蛋白序列保守性强,不影响病毒毒力和个体间感染能力。