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在诸多农机事故中,由驾驶(操作)人员造成的农机责任事故占绝大多数。如表1所示。从1992年-1996年在黑龙江省绥化地区发生的65起农机事故中,由驾驶(操作)人员造成的责任事故42起,占64.6%。对上述事故综合分析发现,驾驶(操作)人员造成责任事故的潜在因素主要有生理因素、心理因素、素质因素和法纪因素等。1生理因素生理条件差,将直接影响正常驾驶和操作,促成违章肇事。此项主要有二种:一是永久性生理条件差,如年龄老化、视力不佳、残疾等引发的农机事故占事故总数6.2%。二是暂时性生理条件差,如酗酒、… 相似文献
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【目的】在毕赤酵母中构建禽腺病毒(FAdV)血清4型和8b型串联截短Fiber2-Fiber蛋白表达系统,并探索适宜的表达条件。【方法】以前期构建的重组质粒pCold-Fiber2-Fiber为模板,用PCR法扩增Fiber2-Fiber片段,连接pPICZαA载体。经双酶切和测序鉴定后的阳性重组质粒pPICZαA-Fiber2-Fiber电转化毕赤酵母GS115。经MD平板和不同浓度Zeocin抗性筛选后进行PCR扩增和测序鉴定得到阳性菌株;用甲醇诱导表达阳性菌株,72 h后收集蛋白上清进行SDS-PAGE和液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定。采用单因素变量法对不同pH(5.0、6.0、7.0和8.0)、甲醇浓度(0.5%、1.0%、1.5%和2.0%)、时间(24、48、72和96 h)进行表达条件优化,用SDS-PAGE鉴定,并用间接ELISA和Western blotting验证重组蛋白的反应原性。【结果】成功构建了重组质粒pPICZαA-Fiber2-Fiber,对表达72 h后的上清进行SDS-PAGE发现1条约70 ku的特异条带,经LC-MS/MS鉴定为目的蛋白。... 相似文献
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