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为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。 相似文献
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为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0(对照)、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[(75.25±1.45) g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形态、肠道防御屏障相关基因表达以及肠道内容物短链脂肪酸(SCFAs)含量和肠道菌群的变化。结果显示:1)与对照组相比,添加怀山药对鲤生长性能无显著影响(P>0.05),但可以增加肠微绒毛密度和完整性,增加杯状细胞数量、肠道黏膜褶皱数量和肠绒毛高度,从而改善鲤肠道组织结构,提高吸收表面积。2)与对照组相比,怀山药组肠道组织过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增强(P>0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)基因相对表达量显著升高(P<0.05),转化生长因子-β(TGF-β)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)和Toll样受体4(TLR4)基因相对表达量也显著上调(P<0.05)。3)肠道菌群高通量测序结果表明,在门水平上,梭杆菌门、变形菌门和拟杆菌门是鲤肠道的优势类群。与对照组相比... 相似文献
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苏里娜的特征特性及其开发前景 总被引:2,自引:0,他引:2
1986年以来,我省引种了特种油料—油王苏里娜。苏里娜属唇形科,为苏子的一个新品种。苏子有野生、半野生,也有栽培的,分布在中亚细亚、东南亚、印度半岛和加拿大等地。我国陕西、甘肃一带局部地区为荒坡固土半野生植物。我省盐城、淮阴、南通及宁镇丘陵等地为野生零星分布,也有作为药用资源。 相似文献
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