鲤细胞因子多克隆抗体的制备及检测

为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。     

饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响

为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0（对照）、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[（75.25±1.45） g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形态、肠道防御屏障相关基因表达以及肠道内容物短链脂肪酸（SCFAs）含量和肠道菌群的变化。结果显示：1）与对照组相比,添加怀山药对鲤生长性能无显著影响（P>0.05）,但可以增加肠微绒毛密度和完整性,增加杯状细胞数量、肠道黏膜褶皱数量和肠绒毛高度,从而改善鲤肠道组织结构,提高吸收表面积。2）与对照组相比,怀山药组肠道组织过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性增强（P>0.05）,白细胞介素-1β(IL-1β)基因相对表达量显著升高（P<0.05）,转化生长因子-β(TGF-β)、闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白-1(ZO-1)和Toll样受体4(TLR4)基因相对表达量也显著上调（P<0.05）。3）肠道菌群高通量测序结果表明,在门水平上,梭杆菌门、变形菌门和拟杆菌门是鲤肠道的优势类群。与对照组相比...     

丁酸梭菌的生物学功能及在水产养殖中的应用

丁酸梭菌(C.butyricum)又名酪酸菌,梭菌属(Clostridium),是一类广泛存在于土壤、人和各类动物肠道中的正常菌群之一.最早于1933年由日本的宮入进治发现并命名,因此又称"宫入菌",是一种具有调节肠道微生态平衡、促进生长发育、提高免疫力、抗氧化等多种生物学功能的微生态制剂,具有较高的开发应用价值.19...     

复合益生菌在高蛋白日粮水产养殖动物中的应用

全价配合饲料是水产养殖动物所需要维持机体生长的最常见的日粮,尤其是水产养殖动物在生长期更是需要持续大量的投喂高蛋白全价配合饲料才能维持稳定的生长速度.但高蛋白日粮在养殖水产动物过程中由于蛋白含量高,脂肪含量高会加重水产养殖动物的肝脏负担,导致脂肪肝炎的发生.同时由于鱼粉价格的上涨,为了提高蛋白含量,饲料配方中加入的植物...     

苏里娜的特征特性及其开发前景

1986年以来,我省引种了特种油料—油王苏里娜。苏里娜属唇形科,为苏子的一个新品种。苏子有野生、半野生,也有栽培的,分布在中亚细亚、东南亚、印度半岛和加拿大等地。我国陕西、甘肃一带局部地区为荒坡固土半野生植物。我省盐城、淮阴、南通及宁镇丘陵等地为野生零星分布,也有作为药用资源。