生物素标记大肠杆菌STII基因探针的研制及应用

采用平板改良法提取了含 STⅡ基因的 pUC9-STⅡ重组质粒,以 Ps酶切,琼脂糖凝胶电泳后,垂直电泳洗脱,从凝胶中回收 STⅡ基因。用生物素-11-dUTP 通过缺口平移法制得生物素标记的STⅡ基因探针。点斑法杂交结果表明:该探针只与含 STⅡ基因的标准对照菌株质粒杂交阳性,与 STⅡ基因没有交叉,探针特异性好。通过对118株待检菌质粒杂交鉴定,发现其中45%的菌株带有 STⅡ基因。由于生物素标记探针易于制备,便于操作,可长期保存,因而适于一般实验室应用。