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猪瘟病毒猪细小病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病病毒多重PCR方法的建立以及初步应用 总被引:9,自引:0,他引:9
猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪伪狂犬病病毒均能导致猪繁殖障碍,对养猪生产影响很大。本研究通过设计4对针对这4种病毒的特异引物建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:其敏感性可达到CSFV 10 TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50 CSFV 10TCID50,PPV 10TCID50,PRRSV 1 TCID50,PRV 100 TCID50。同时具有较好的特异性,对猪瘟病毒石门株、猪瘟病毒兔化弱毒株、PRV闽南A株、PPV弱毒疫苗株、PRRSV KY 35株及PRRSV B13株6个毒株均能扩增出相应的片段,而BVDV、BDV均未扩增出相应的片段。本方法的建立对于这4种病毒病的早期快速检测具有十分重要的意义。 相似文献
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猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清制备 总被引:1,自引:0,他引:1
为制备猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清,本实验将4头非免疫健康猪进行猪瘟活疫苗基础免疫和猪瘟石门强毒株反复强化免疫后,采血分离血清,过滤、分装、冻干、熔封,获得4批产品,并进行了检验和验证。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、均一性检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验表明,口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒抗体均为阴性;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;兔体中和效价分别为1∶800、1∶800、1∶800和1∶1 600;对猪瘟兔化弱毒种毒和5种猪瘟活疫苗的验证结果均良好。该4批血清可以用于猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验。 相似文献
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综述了模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)及其相关分子佐剂的研究进展。PRRs是一类表达于固有免疫细胞并可识别病原体相关分子模式的识别分子。PRRs主要包括Toll样受体、NOD样受体、RIG—I样受体、清道夫受体、甘露糖受体和髓系细胞触发受体等。与PRRs直接相关的分子佐剂主要包括TLR激动剂、NLR激动剂、RIG—I和MDA5激动剂及CD40和肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRSF)激动剂等。 相似文献
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为探讨高效液相色谱法测定牛型提纯结核菌素(PPD)效价的可行性,本研究根据PPD中蛋白成分的紫外光吸收波长,采用专用聚苯乙烯/二乙烯苯树脂色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm,300 nm),流动相为乙腈-水-三氟乙酸(25∶75∶0.1),检测波长为271 nm,建立了灵敏、快速的PPD效价的高效液相色谱测定法。在0.4×104 IU/mL~1.1×104 IU/mL的浓度范围内,效价与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=2×106x-6783.6,相关系数R=1.000。将PPD样品用灭菌水稀释后,注入液相色谱仪,测得效价为2.59×104 IU/mg,与传统豚鼠标定法的测定结果(2.91×104 IU/mg)基本一致。该方法简便,灵敏度高,检测速度快,可以较好地控制PPD的质量。 相似文献
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为了研制猪瘟阴、阳性血清国家参考品,对猪瘟病毒阴、阳性血清国家参考品候选物的均匀性进行检验。每亚批随机抽取16支样品,其中1支样品取样10次,其余样品取样1次,用猪瘟ELISA抗体检测试剂盒测定其OD450值,用t检验和F检验进行统计分析。结果显示,各组测定数据的均值与方差无显著差异。该批候选物是均匀的。 相似文献
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猪瘟病毒阳性血清的热加速稳定性试验 总被引:1,自引:1,他引:0
采用热加速稳定性试验,以ELISA抗体效价为考察指标,确定猪瘟病毒阳性血清的贮存有效期,并拟合抗体效价随时间失活的线性回归方程及不同温度下失活速率常数k值的线性回归方程.从较高温度下的k值估算较低温度下的k值,由k值计算该血清在-20℃下的贮存有效期.结果表明,该血清在-20 ℃下的有效期约为16.8年.1年的持续稳定性监测结果也与热加速稳定性试验预期一致.该阳性血清可以用于制备猪瘟病毒阴性、阳性血清国家参考品. 相似文献
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为达到延长兽用弱毒冻干疫苗保存期的目的,进行了用安瓿分装冻干疫苗并充氮气后熔封的试验.将鸡新城疫低毒力活疫苗和猪瘟活疫苗用安瓿分装冻干,安瓿拉丝灌封机充盈氮气后熔封.同等条件冻干的疫苗,分别对充氮气安瓿和抽真空安瓿进行了病毒含量测定,结果显示:鸡新城疫低毒力活疫苗(La Sota株)25℃放置14 d,检测病毒含量(EID50),抽真空的安瓿病毒含量为106.545,充氮气的安瓿病毒含量为106.625;2℃~8℃放置17 d,抽真空的安瓿病毒含量107.68,充氮气的安瓿病毒含量107.5.猪瘟活疫苗(Ⅰ)在25℃和37℃最长放置7 d,抽真空和充氮气安瓿均能达到合格的判定标准.说明在较高温度条件下,抽真空与充氮气保存的样品病毒含量基本一致,充氮气对兽用活疫苗冻干保存效果与真空保存的效果基本相同.使用充氮气方法保存疫苗,不仅避开了兽用疫苗管制玻璃瓶由于保存几年后部分胶塞变形造成失真空的问题,而且使用机械对安瓿充氮气和熔封,免去人工熔封安瓿的麻烦. 相似文献
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猪瘟病毒FJFQ-39株的毒力鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为探索一种相对客观、稳定的方法鉴定猪瘟病毒(CSFV)FJFQ-39株的毒力.本研究采用2×103TCID50的FJFQ-39株分别肌肉接种6头敏感猪,通过RT-nPCR 检测扁桃体和血液监测动物感染情况,对动物临床症状和病理变化进行系统评分,结合体温分析,判定病毒毒力.同时用相同剂量的石门株接种4头敏感猪作对照.FJFQ-39和石门接种猪的扁桃体和血液均检测到CSFV核酸;FJFQ-39接种猪的最大临床症状评分(CS)平均值为3.53.5±1.0、病理评分(PS)平均值为3.3±0.9(低于5),平均最高体温为39.3±0.2℃(低于40℃);石门接种猪的最大CS平均值为25.5±2.1、PS平均值为29.5±2.4(大于15),平均最高体温为41.8±0.2℃(高于41.0℃).实验结果表明:猪瘟病毒FJFQ-39株和石门株均成功感染了动物;评分系统结合体温测定评价CSFV毒力是可行的;FJFQ-39 属于低毒力株,而石门属于强毒株. 相似文献