新疆紫草药皂的制作及抑菌作用的研究

为了探讨新疆紫草药皂的制作工艺及新疆紫草药皂的体外抑菌作用,以新疆软紫草为原料,通过橄榄油浸泡提取其中的活性成分紫草素,制备成紫草浸泡油浓度为0%、40%、50%和60%的4种新疆紫草药皂,采取常规的细菌培养技术,比较了4种新疆紫草药皂、舒肤佳香皂及六神艾叶除菌皂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒杆菌的抑制效果。结果表明:紫草浸泡油浓度为50%的新疆紫草药皂对乙型副伤寒杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果均优于六神艾叶除菌皂;对大肠埃希菌的抑菌效果也比舒肤佳香皂更显著。     

基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用

为建立牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhintracheitis, IBR)的血清学诊断方法,本试验对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhintracheitis virus, IBRV)gL蛋白进行原核表达和纯化,作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。结果显示,iELISA方法的最优反应条件：抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜;3%BSA、37℃封闭1 h;血清1∶20稀释,室温孵育30 min;二抗稀释度为1∶5 000,37℃孵育30 min;底物反应条件为37℃5 min。特异性试验结果显示,该方法仅与IBR阳性血清反应呈阳性,而与牛口蹄疫(FMD)、牛病毒性腹泻(BVD)、布鲁菌病的阳性血清无交叉反应。敏感性试验结果显示,阳性血清1∶640稀释时检测结果仍呈阳性,表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示,批内变异系数为1.9%～7.7%,批间变异系数为2.6%～4.6%。对171份牛血清进行IBRV抗体检测,本试验建立的iELISA方法检出阳性样品67份,阳性率为39%;商品化试剂盒检出阳性样品60份,阳性...     

半滑舌鳎源海藻希瓦氏菌的分离鉴定及药敏试验

河北省昌黎县某半滑舌鳎鱼养殖场于2022年6月中旬出现发病,为了从死亡半滑舌鳎腹水中分离优势感染菌,试验采用了细菌分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA序列分析进行病原鉴定,并采用纸片扩散法检测分离菌对22种抗生素的敏感性,琼脂扩散法检测分离菌对22种中药的抑菌效果。结果表明：分离菌在血琼脂培养基上培养可见光滑圆润、灰色凸起状,呈β溶血的菌落,革兰氏染色镜检为阴性小杆菌,生化特性与海藻希瓦氏菌生化特性符合率为96%,分离菌16S rRNA基因序列与GenBank中海藻希瓦氏菌同源性达98.94%;分离菌对头孢曲松、头孢噻呋、大观霉素敏感,对氨苄西林、阿莫西林、卡那霉素等13种抗生素耐药;中药五味子、乌梅、诃子对分离菌的抑菌作用较强,秦皮、黄柏、紫花地丁等11味中药无抑菌效果。说明分离菌为海藻希瓦氏菌,对抗生素头孢曲松、头孢噻呋、大观霉素和中药五味子、乌梅、诃子6种药物敏感。     

Pal影响肠炎沙门菌的生物被膜形成和耐药性

为了研究肽聚糖相关脂蛋白(peptidoglycan-associated lipoprotein, Pal)在肠炎沙门菌生物被膜形成和耐药中的作用,本研究构建了肠炎沙门菌的pal缺失株,对其生物被膜形成能力进行检测,同时检测Curli菌毛和纤维素形成,以及检测生物被膜形成相关基因表达水平。结果显示,与野生型菌株相比,pal基因缺失株生物被膜形成能力显著降低,Curli菌毛分泌量降低,但纤维素形成无显著降低,生物被膜相关基因表达水平显著降低。为进一步分析pal基因在肠炎沙门菌耐药性中的作用,本研究测试了多黏菌素B对该菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,pal基因缺失株对多黏菌素B的MIC降低了75%。综上所述,本研究表明pal基因影响肠炎沙门菌生物被膜形成和耐药性,研究结果为肠炎沙门菌Pal的功能研究奠定了基础。     

肠炎沙门菌ArgG基因缺失株的构建及生物学特性分析

为研究ArgG基因对肠炎沙门菌的致病作用和生物学特性的影响，本试验利用λ-Red重组法构建肠炎沙门菌ArgG基因缺失株，并从生化特性、生长特性、生物被膜形成能力、运动能力、体外应激、巨噬细胞存活能力等方面进行研究。结果显示，与野生型菌株相比，ArgG基因缺失株生化特性、运动能力无明显变化，在LB培养基中生长速度变化不明显，但在M9培养基中缺失株不生长；ArgG基因缺失株生物被膜形成能力下降约60%,抗酸、碱应激能力分别下降约12%和10%左右，巨噬细胞内的存活能力和其对小鼠的毒力降低。本研究成功构建了肠炎沙门菌ArgG基因缺失株，并证明ArgG基因与营养代谢、抗应激能力和毒力密切相关，为肠炎沙门菌的基因缺失苗的研究提供理论依据。