鱼类特有的Ring型E3泛素连接酶MARCH5A基因在刺激隐核虫感染下的表达分析

为探究大黄鱼MARCH5A的免疫作用,实验采用反转录PCR确认了该基因的c DNA序列。该序列全长1045 bp,包含1个长度为867 bp的开放阅读框,编码288个氨基酸;序列分析显示该蛋白含1个RINGv和4个跨膜结构域。进化树分析表明大黄鱼有11个MARCH家族蛋白(与哺乳动物相同),但鱼类存在多个亚型,MARCH5A为鱼类特有蛋白,其蛋白理化性质和三维结构均与MARCH5B存在一定的差异。荧光定量PCR分析显示,MARCH5A在健康大黄鱼的多个组织中均有表达,在血液和心脏中表达量最高,其次为鳃和脑,而在肾脏和皮肤中表达量最少。刺激隐核虫感染大黄鱼后,MARCH5A在皮肤中早期表达量显著上调,第2天为对照组的9.65倍,后期下调。在鳃、脾脏和头肾中的前期表达量也有所增加,后期下降。结果表明大黄鱼MARCH5A在抗刺激隐核虫免疫应答过程中可能发挥重要作用。     

鸡球虫病的防治

1鸡球虫病的病原分析鸡球虫病的病原隶属原生动物门的艾美耳科,艾美耳属。目前世界公认的有9种,分别是柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、早熟艾美耳球、毒害艾美耳球虫、布氏艾美耳球虫、哈氏艾美耳球虫和变位艾美耳球虫。在临床上柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫病较为常见。其中,     

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2~-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM_2抗体的杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG_1,为入链,分子量为162Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6．1×10~(12)M~(-1)。与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。     

国外果树栽培新技术

正当今世界农业科技飞速发展,各种果树种植新技术新方法不断面世,为果树增产增收和提高果品质量效益,提供了更有效的手段。下面介绍10种国外果树栽培新技术供参考。1.金字塔修剪法。为了对老龄苹果树进行复壮,加拿大果树科研人员采用金字塔修剪法,经复壮的苹果树高产期可维持10~20年。方法:剪去旺盛的直立枝条,给老树重新定型,促进树体中的营养集中于下部的非直立枝     

基于语言信息处理的蔬菜示范基地评估研究

针对良好农业规范在蔬菜示范基地实施中,技术专家的评价信息集结时存在很大程度的主观性,语言评价信息易损失和扭曲等问题,以山东省3个备案蔬菜种植基地的评价和选择为例进行了实证研究。提出了一种基于语言信息的多指标群体综合评价方法,根据良好农业规范标准构建了蔬菜基地的评价指标体系,统计了3个基地的评价信息,将语言信息转换为二元语义形式,通过建立优化模型并求解得到各基地的群体综合评价结果,并对结果进行分析,进行基地的评价和选择。研究表明以上方法可以有效地将语言评价信息进行集结,避免信息损失和集结结果的不精确性,该方法具有计算简单和语言信息集结结果准确等特点,将促进良好农业规范标准的推广和应用,实现农产品安全管理的目标。     

良好农业规范(GAP)在蔬菜基地中的应用——基于面板数据和语言信息的农产品安全评价

针对良好农业规范(GAP)在蔬菜种植基地实施中,审核专家的评价信息仅做简单汇总而没有进行充分利用和分析,语言评价信息易损失和扭曲、限于平面数据集结等问题,以山东省6个备案蔬菜种植基地2001-2006年期间的评价为例进行了实证研究.提出了一种基于语言信息和面板数据的综合评价方法,据GAP标准构建了蔬菜基地的农产品安全评价指标体系,统计了GAP审核专家就6个基地的评价信息,对信息分别进行多指标和时序加权集结,得到各基地的综合评价结果,并对结果进行分析,充分利用评价信息,用以指导基地在GAP实施中的改进.研究表明以上方法可以有效地将语言评价信息进行集结,避免信息损失,并能够体现决策者对不同时期的重视程度.该方法将促进良好农业规范GAP标准的推广和应用,实现农产品安全管理的目标.     

合浦珠母贝表皮生长因子样(EGF-like)基因的克隆与表达分析

为探究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在合浦珠母贝幼体发育以及组织生长过程中的作用,实验通过RACE技术克隆了合浦珠母贝EGF-like基因并做了相应的表达分析。实验结果获得cDNA全长序列4 107 bp,命名为Pf-egf1,开放阅读框(ORF)702 bp,编码234个氨基酸,包含一个信号肽序列和一个跨膜结构域,功能结构域分析发现Pf-egf1具有一个EGF-like结构域,有6个半胱氨酸残基,由3个二硫键维持,是表皮生长因子家族及其相关蛋白的特征结构域,但其余序列与现有相关基因序列差异较大,推测可能是一个新的EGF-like基因。表达结果显示,Pf-egf1 mRNA在合浦珠母贝外套膜、闭壳肌、鳃、肝胰腺、珍珠囊、肠和性腺中均有表达,在肠中的表达显著高于其他组织;在合浦珠母贝幼体发育的担轮期、D型期、壳顶期、眼点期和变态期的表达呈现逐渐升高的趋势,并且其在变态期的表达量极显著地高于其他时期。上述结果表明,Pf-egf1基因可能在合浦珠母贝肠道修复和幼虫变态发育阶段起着重要作用,为进一步开展育珠与生长调控奠定了基础。     

花生超高产增产新技术

花生是全国农业支柱产业之一,如何实现花生超高产,必须综合运用多种技术。包括正确使用调节剂、叶面喷肥,还要在农业措施上下功夫,综合防治病虫以及轮作换茬、地膜覆盖、化学除草等技术,只有这样才能实现花生的高产超高产。     

“问题式教学法”在组织胚胎学教学中的应用体会

组织胚胎学是研究机体正常显微结构、功能和个体发育规律的学科,为本校水产养殖学、动物科学所必需的专业基础课,并针对动植物检疫学专业特点,与动物病理学合成一门课程作为专业基础课。由于其内容抽象、名词繁多、难以记忆、教学时数有限等特点,是一门教师难讲、学生难学的课程,因此许多教师一直在探索一种有效的教学方法,笔者在组织胚胎学教学中应用了问题式教学法,颇有收益,现介绍如下。     

大黄鱼UBXN1基因鉴定及其过表达后的转录组分析

为探究UBXN1在大黄鱼抗盾纤毛虫感染中的作用及其可能涉及的免疫信号通路,本实验采用RT-PCR鉴定了大黄鱼UBXN1基因,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析; 采用实时荧光定量 PCR(qPCR)探究UBXN1在多个组织的表达情况,及盾纤毛虫感染下的表达变化;免疫荧光分析UBXN1的亚细胞定位;转录组筛选UBXN1过表达后的差异表达基因。结果显示：UBXN1基因cDNA全长为915 bp,编码304 个氨基酸。蛋白序列同源比对和结构预测表明UBXN1是一个进化保守的蛋白,包含UBA和UBX结构域。qPCR分析表明UBXN1呈组成型分布表达,脑中表达量最高,其次是肝脏、心脏和肾脏,在肌肉中表达量最低;盾纤毛虫感染大黄鱼,UBXN1在脾脏、脑、肝脏和肾脏表达量早期显著升高,后期逐步恢复至正常水平。亚细胞定位分析表明,UBXN1在大黄鱼肾脏细胞质和细胞核均有表达。在293T细胞过表达UBXN1,转录组分析筛选到12个上调基因,4个下调基因,其中RPL41/RPL39/XIST/RNA45SN4表达量显著增加,而ATP8/ND4L表达量显著减少。这些研究结果表明UBXN1在大黄鱼抗寄生虫免疫应答中发挥重要作用, 并为进一步深入研究UBXN1的免疫调控信号通路奠定基础, 这是目前在鱼类首次报道UBXN1。