MIC法测定9种抗生素对不同血清型副溶血弧菌的抑菌作用

近年来,由于在水产动物疾病治疗中抗生素的广泛和大剂量应用,致使细菌的耐药株显著增加,给水产动物细菌性疾病的防治带来了极大的困难。抗生素最低抑菌浓度（minimum inhabitory concentration,MIC）的测定对指导水产动物用药和设计最佳给药方案具有重要意义,是正确使用抗菌素药物的基础,拟定合理抗菌方案的主要依据。     

嗜水气单胞菌对盐酸多西环素的耐药性获得与消失速率研究

在离体条件下测定了从人工养殖的斑点叉尾蛔患病鱼体上分离的嗜水气单胞菌（Aerowtonas hydrophila）的4个菌株对盐酸多西环素耐药性获得与消失的速率。结果表明：以25℃条件下培养72h为1代,在含有盐酸多西环素的药物培养基中连续传代9次后,盐酸多西环素对A．hydrophila的最小抑制菌浓度（MIC）上升了31倍,MIC由0．05mg／L上升至1．56mg／L;而将已经获得高耐药性的菌株以穿刺法接种在不合药物的BHI（Difco）琼脂培养基中,以4℃条件下保存20d为1代,连续传代5次,供试菌株的耐药性呈现逐渐消失的趋势,至第5次传代后,其MIC由1．56mg／L下降至0．10mg／L。     

黄鳝肠道益生菌HY-136的鉴定与系统发育分析

对分离自健康黄鳝肠道118株菌进行点种法病原菌拮抗试验,结合产酶能力分析试验结果,得到了对病原菌拮抗作用显著和产酶能力较强的拟选菌株HY-136.通过对该菌株进行形态观察,常规生理生化鉴定和应用API 50 CHB鉴定盒鉴定,结果表明该菌与枯草芽孢杆菌属的形态及生理生化特征相似;进一步利用PCR技术对该菌株16S rRNA序列作测定与分析,序列结果在GenBank中进行Blast同源序列检索,并用Mage4.0软件与芽孢杆菌属的其它菌种进行序列分析比对,结果表明其与已报道的枯草芽孢杆菌序列(登录号为EU346662)具有99.8%的同源性,且二者在所构建的系统发育树上处于同一个分支.确定菌株HY-136为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).     

3种不同血清型副溶血弧菌对异育银鲫的急性毒性研究

在静水条件下,采用1×10^9CFU／ml,1×10^8CFU／ml,1×10^7CFU／ml,1×10^6CFU／ml,1×10^5CFU/ml的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）对异育银鲫幼苗进行人工注射感染,通过96小时急性毒性试验,测定不同浓度副溶血弧菌血清型对异育银鲫LC50值和安全浓度。结果显示,血清型为O1：KⅢ,O1：KⅥ,O5：KⅣ的副溶血弧菌对异育银鲫96小时的LC50值分别为7.9×10^6CFU／ml,2.0×10^6CFU／ml,7.9×10^6CFU／ml。异育银鲫对血清型O1：KⅢ,O1：KⅥ,O5：KⅣ的安全浓度分别为6.3×10^4CFU／ml,1.66×10^5CFU／ml,3.7×10^5CFU／ml。     

合理利用硫酸铜防治大黄鱼海水小瓜虫病

在大黄鱼鱼苗养殖阶段,寄生性原虫的危害最为严重,以海水小瓜虫为例,从发病到鱼苗大规模死广时间极短,笔者曾进行试验,在小瓜虫温度适宜的条件下,从发现一尾鱼感染小瓜虫到全池暴发小瓜虫病仅仅只有24小时的时间,死亡半可以达到80％。存本文中,笔者根据众多防治小瓜虫的参考文献,总结得出利用硫酸铜来防治小水体（试验鱼养殖池,6米^3水体）中大黄鱼海水小瓜虫的有效浓度,并进行了试验。     

嗜水气单胞菌3种疫苗对斑点叉尾免疫原性比较研究

将经福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、菌体脂多糖(LPS)和菌体外膜蛋白(OMP)作为免疫原,分别接种斑点叉尾(Ictalurus punctatus Rafinsque)后,通过测定受免鱼的凝集抗体效价,头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性和用A.hydrophila活菌攻毒的方法,探讨了斑点叉尾对A.hydrophila的3种疫苗的免疫应答状况和对活菌攻毒的免疫保护效果。试验结果显示:对斑点叉尾经腹腔注射接种3种疫苗均能刺激受免鱼产生较强的免疫应答,3种疫苗的受免鱼均产生了特异性凝集抗体,接种F-Ah灭活菌苗的试验鱼最高,接种OMP疫苗的试验鱼其次,而接种LPS疫苗的试验鱼血清中凝集抗体效价最低;与未接种疫苗的对照鱼相比,受免鱼头肾和血液中吞噬细胞的吞噬活性明显上升,头肾和血液中吞噬细胞活性由高到低依次是LPS、OMP和F-Ah免疫接种的斑点叉尾;活菌攻毒的结果证明接种3种疫苗的受免斑点叉尾A.hydrophila的感染产生了不同程度的相对免疫保护力(RPS),以OMP免疫接种后的斑点叉尾RPS最高,达到72.5%,接种LPS的斑点叉尾稍差,RPS为62.5%,而RPS最低的是接种F-Ah的免疫组,RPS只有24.2%。     

1株黄颡鱼肠道益生菌的筛选与鉴定

从正常养殖的黄颡鱼肠道中分离得到218株细菌,通过产酶能力测试,对常见病原菌体外拮抗作用以及对抗生素敏感性试验筛选出1株益生菌HS140菌株。通过测定HS140菌株对黄颡鱼的致病性,并结合形态观察、生理生化试验和16SrRNA部分序列分析,对HS140菌株进行了分类鉴定。结果显示:HS140菌株具有很强的分泌蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的能力,能够抑制温和气单胞菌、迟缓爱德华菌和鳗弧菌的生长。HS140菌株对氨苄青霉素、磺胺异恶唑、先锋霉素VI等3种抗生素产生耐药性,对另外13种抗生素均敏感或中度敏感。急性毒性试验表明,浓度为1.0×108cfu/mL的HS140菌悬液对黄颡鱼没有致病性。HS140菌株为革兰氏阳性可动杆菌,16SrRNA的部分序列分析显示HS140菌株与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)具有99.3%的相似性,系统发育树上HS140菌株与地衣芽孢杆菌(FJ435674)聚为同一分支,结合形态观察和生理生化试验结果最终鉴定HS140菌株为B.licheni formis。     

湖北省克氏原螯虾养殖现状与产业发展中的技术问题

针对湖北省人工养殖克氏原螯虾热潮中出现的各种问题,在分析所发生问题原因的基础上,提出了解决这些问题的一些思路。借鉴国内外在人工养殖克氏原螯虾等淡水螯虾中已经获得的相关研究成果,提出了克氏原螯虾的养殖业者要从改变养殖方式人手,根据克氏原螯虾生理、生态习性,采用适宜的养殖方式,才有可能将克氏原螯虾养好,获得更好的经济效益。     

盐酸土霉素对人工致病克氏原螯虾的治疗效果研究

用口服患病克氏原螯虾(Procamgbarus clarkii)组织、注射拟态弧菌(Vibrio mimicus)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemoloyticus)的方法,人工感染健康克氏原螯虾致病后,定时投喂盐酸土霉素药物饵料,观察了药物饵料对人工致病克氏原螯虾的治疗效果.结果表明,投喂含有盐酸土霉素的药物饵料对人工注射V.mimicus和V.parahaemoloyticus致病的克氏原螯虾有比较好的治疗效果,而对口服患病克氏原螯虾组织致病的克氏原螯虾的治疗效果比较差.但是,与口服患病克氏原螯虾组织致病后未用药物饵料治疗的对照组相比,投喂药物饵料对克氏原螯虾疾病发展有一定的控制作用.推测克氏原螫虾暴发性疾病的致病原因主要是由于致病病毒引起,而致病菌在克氏原螯虾体内的存在,可能导致混合感染而死亡率上升.