猫疱疹病毒Ⅰ型荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立

研究旨在建立实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus type Ⅰ,FHV-1)的方法,用于检测临床上猫的上呼吸道传染病样本。据Gen Bank已发表的猫疱疹病毒的gE基因序列的保守区域设计并合成一对特异性引物及探针,建立FHV-1的实时荧光定量PCR检测方法,对此方法进行特异性、灵敏度及重复性的验证,并对广东佛山某流浪猫基地猫疱疹病毒的流行情况进行调查,即对该基地的94份临床样品进行检测。结果表明：研究成功建立了FHV-1实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,此方法特异性强,与大多流行的犬猫病毒均未出现交叉反应;敏感性高,最低检出限为10 copies·μL^-1;重复性好,批内变异系数为0.29%～0.71%,批间变异系数为0.88%～1.38%。应用此方法在94份临床样品中检出28份FHV-1核酸阳性样品。综上所述,研究建立的FHV-1荧光定量聚合酶链式反应方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,为临床上FHV-1...     

一株新分离犬细小病毒灭活疫苗的制备及免疫效果研究

JL0911株犬细小病毒是由军事兽医研究所流行病与病毒病防控技术实验室分离得到的一株新型犬细小病毒,其主要抗原位点上的氨基酸序列较国内先前分离到的其他株有较大差异,不能被归入目前已有的CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c三个类型。本研究旨在利用JL0911株犬细小病毒研制灭活疫苗,并评价其免疫原性。试验采用10^5.5 TCID₅₀/mL的犬细小病毒JL0911,以甲醛灭活后,加入1/4体积的纳米佐剂,制备了犬细小病毒灭活疫苗。取1.5 mL上述疫苗,通过肌肉注射免疫普通家犬,免疫前后不同时间均采集血清,在F81细胞系上测定犬细小病毒的中和抗体。结果显示,免疫后14 d,试验犬血中细小病毒中和抗体效价较免疫前有显著提高,最高可由0提高至2⁹,表明本试验分离的JL0911株犬细小病毒具有生产犬细小病毒灭活疫苗的潜在价值。