牛源抗氧化芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究

【目的】从奶牛瘤胃中分离具有抗氧化能力且耐受性好的芽孢杆菌,为牛源益生菌作为抗氧化添加剂使用提供理论依据及参考。【方法】采集3头成年荷斯坦奶牛瘤胃内容物,通过细菌分离纯化、形态观察、生化检测及16S rDNA分子检测进行鉴定,同时检测筛选菌株的超氧自由基和羟自由基清除率、耐酸、耐胆盐能力及对抗生素的耐药性。【结果】从奶牛瘤胃液中共获得了12株菌,通过特异性培养基与革兰氏染色共筛选出5株芽孢杆菌(X-1～X-5)。对5株芽孢杆菌进行分子鉴定,确定X-1为热噬淀粉芽孢杆菌,X-2为短小芽孢杆菌,X-3为解蛋白芽孢杆菌,X-4为枯草芽孢杆菌,X-5为沙福芽孢杆菌。抗氧化能力检测结果显示,5株菌均具有一定的抗氧化能力,X-5菌株抗氧化能力最高,超氧自由基和羟自由基清除率分别达到73.81%和73.54%。当pH为2.5时,5株芽孢杆菌存活率均在25%以上;胆盐浓度为0.6%时,5株芽孢杆菌存活率均在60%以上,说明菌株具有良好的耐受性。药敏试验结果显示,试验分离出来的大多数菌株对氧氟沙星、呋喃妥因、红霉素等高度敏感;对头孢呋辛、头孢噻肟、链霉素等耐受;对卡那霉素、环丙沙星、氨苄西林等中度敏感。...     

牛源嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定、毒力、耐药基因及生物学特性分析

旨在明确荷斯坦奶牛瘤胃内嗜麦芽寡养单胞菌的生物学特性、耐药性以及携带的毒力和耐药基因等信息。采集荷斯坦奶牛瘤胃内容物,经富集、分离和纯化等步骤获得菌株,通过16S rDNA测序以及同源性分析确定菌株种属,纸片扩散法检测菌株耐药性,PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测菌株携带的毒力和耐药基因,通过小鼠灌喂试验检测菌株的致病性。最后从荷斯坦奶牛瘤胃内共分离到17株嗜麦芽寡养单胞菌PMIK-2(Stenotrophomonas maltophilia),其中高产奶牛组4株、低产奶牛组13株。生物学特性结果表明,分离菌株的最佳生长温度为38℃,最适生长pH为7.0,对胆盐有较强的耐受性。药敏结果显示,分离菌株对卡那霉素、头孢氨苄、头孢唑啉、克拉霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星高度敏感,对链霉素、氨苄西林、四环素、亚胺培南、庆大霉素具有耐药性。此外,在分离株的基因中检测到了fimH、mrkD和wabG 3种毒力基因和AadA1、BlaSHV1、TetD 3种耐药基因。菌株致病性结果显示,灌喂PMIK-2菌液1.0×10⁷,1.0×10⁹,1.0×1...     

鹅粪便中特基拉芽孢杆菌和类肠膜魏斯氏菌的分离鉴定

【目的】从鹅粪中分离芽孢杆菌属和乳杆菌属细菌,为鹅源功能菌研究和合理用药提供参考。【方法】收集30只50周龄健康北方白鹅的直肠粪便,利用特异性培养基和生化反应试验分离筛选菌株,筛选的菌株通过DNA提取、PCR扩增16S rDNA测序鉴定后,与GenBank中参考菌株进行比对构建进化树,进行相似性比对确定菌株种类。培养48 h后检测细菌的生长特性、最适酸碱度和温度,以pH 7.0、无胆盐环境下细菌生长状态为对照,检测其耐酸耐胆盐能力,并进行药敏试验检测其对抗菌药的耐受性。【结果】经分离筛选共获得9株细菌,通过生化试验最终选出2株菌,根据进化树的进化距离和相似性比对确定其分别是特基拉芽孢杆菌CC2FG2和类肠膜魏斯氏菌JY0R2。生长特性结果显示,特基拉芽孢杆菌CC2FG2在培养基pH为6.5、温度为30℃条件下培养16 h的增殖效果最好,可以耐受1.2%胆盐,活菌数是无胆盐的69.2%,耐酸特性比较强,培养基pH为3.5的强酸环境下活菌数是pH为7.0的81.5%;抗菌药耐受性结果显示,其对氧氟沙星、诺氟沙星、卡那霉素、链霉素、克拉霉素、红霉素、复方新诺明和万古霉素敏感,对头孢呋辛,头孢...     

反刍动物外植体的研究进展

动物外植体是一种能够反映动物机体作用机制的试验模型。本文对反刍动物外植体的试验研究进行了概述,提出了构建外植体模型、评价外植体活性的方法以及目前外植体存在的问题,旨在总结反刍动物外植体的研究进展,以期为与反刍动物营养代谢相关的研究提供帮助。     

荷斯坦奶牛瘤胃部分微生物的分离鉴定及生物学特性分析

试验旨在明确荷斯坦奶牛瘤胃内部分菌群的生化特性，为有关反刍动物微生物制剂开发以及疾病防控研究提供帮助。选取荷斯坦奶牛10头，晨饲前采取瘤胃内容物，完成菌的富集、分离、纯化、菌种鉴定分析以及生化特性检测等内容。最后从奶牛瘤胃内共分离得到32株菌，分别属于12个属，并明确了其接触酶、硝酸还原性、蛋白酶、淀粉酶、产硫化氢等生化特性。