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鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养 总被引:5,自引:1,他引:5
旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞(PGCs)体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGCs在以鸡胚成纤维细胞(CEF)为饲养层,添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGCs在添加细胞因子的培养体系中能增殖,并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGCs进行检测。结果表明,采用传至3代的CEF为饲养层,多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGCs不但能有效维持PGCs的未分化状态和正常二倍体核型,也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。 相似文献
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家禽人工授精是代替自然配种的一种科学繁殖技术,具有扩大公母比例,降低饲养成本;解决自然配种困难;便于净化疾病和清洁卫生;为交换优良种源提供便利条件等。因此,人工授精技术已被不少大、中型种鸡场推广使用。 相似文献
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分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异,已成为分子生物学研究领域的热点之一,用于识别差异表达基因的方法有多种,DDRT-PCR是近年来较为广泛应用的一种技术。DDRT-PCR技术有很多优点,但同时也存在不少问题,通过对其进行不断地改进使这项技术在分子生物学中能更好更广地应用。 相似文献
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鸡精原干细胞的体外培养 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在探索不同基础培养基对鸡精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养的影响,以期选出最佳的培养体系,并用其进行传代培养,以观察精原干细胞继代培养的特性。结果表明:在高糖DMEM培养体系和TCM199培养体系中,SSCs均能正常生长和增殖,在以DMEM和TC199为基础培养基的培养体系中,在SSCs的活率、克隆形成率上显著不差异,但SSCs在以DMEM为基础培养基的培养体系中生长情况较好,为最佳培养体系。在RPMI1640培养体系中,SSCs克隆形成率、活率较低,比前2种培养体系的效果差异显著。在添加细胞因子的培养基中精原干细胞在体外传至第3代。 相似文献
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鸡睾丸细胞体外分离培养初探 总被引:5,自引:0,他引:5
取孵化15 d鸡胚及出壳7 d内和7 d后雏鸡的睾丸,分别采用二酶二步消化法(胶原蛋白酶 胰蛋白酶)和三酶二步消化法(胶原蛋白酶 透明质酸酶/胰蛋白酶)分离睾丸细胞。结果表明:同一时期睾丸细胞的分离效果,二酶二步消化法与三酶二步消化法差异显著;不同时期采用二酶二步消化法分离睾丸细胞,孵化15 d的分离效果显著优于出壳7 d内,极显著优于出壳7 d后,出壳7 d内极显著优于出壳7 d后。Percoll离心法提纯结果表明:密度梯度为27%~35%的条带中睾丸细胞纯度较高。在体外无饲养层的条件下分别培养经提纯与未经提纯的睾丸细胞,结果表明未经提纯的细胞具有较高的存活力。 相似文献
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精原干细胞是体内唯一的能在细胞水平进行识别并增殖、分化及调控的成体干细胞,是位于精曲小管基膜上,既能自我更新,维持自身群体数量恒定,又能定向分化产生精母细胞的一类原始精原细胞,其前体是原始生殖细胞(primord ial germ cells,PGCs)。近年来,随着精原干细胞鉴定,体外培养及冻存等技术的发展,精原干细胞的应用成为可能。文章对精原干细胞形态特征、分离纯化、体外培养及影响因素等进行综述。1精原干细胞的形态、特性及其增殖分化精原干细胞相对数量极少,仅占生殖细胞的0.02%~0.03%。睾丸中大部分的精原细胞并非干细胞,而是处于分化… 相似文献
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