新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.     

渝东南土壤pH值与烟叶主要元素相关性分析

通过对渝东南烟区植烟土壤及烟叶成分进行分析,明确土壤pH值对渝东南烟区烟叶质量风格的影响.以渝东南典型烟区彭水、武隆两县149份土壤样品及其对应的烤后中部烟叶样品为材料,分别对植烟土壤pH、中部烟叶全钾、全磷、全氯、B 、Mn、Fe 、Cu、Ni、As等元素含量分布特性及相互关系进行研究.结果表明:(1)彭水、武隆两县植烟土壤以酸性土壤(4.5＜pH≤5.0)为主,最适宜烤烟种植的pH所占比例分别为26.2％ 、36.8％,不同乡镇间土壤pH值总体差异性不大;(2)两县烟叶中各元素含量具有差异性,总体变异幅度以Cu、As、全氯、Mn较大,以全磷最小,且不同乡镇之间烟叶各元素含量不尽相同;(3)土壤pH值与中部烟叶各元素含量之间存在相关性,其中全磷含量与土壤pH显著正相关,Mn、Cu含量与土壤pH值显著负相关,Ni含量与土壤pH值极显著负相关.渝东南烟区植烟土壤酸化现象较为严重,通过改良酸化土壤在一定程度上可改善当地烟叶品质.     

鸡免疫球蛋白检测技术的发展

免疫球蛋白(Immunoglobulin,lg)是指一类在抗原物质刺激下机体所产生的具有抗体活性的球蛋白,它能与该抗原发生特异性结合反应.Ig普遍存在于鸡的血液、组织液及外分泌物中,主要有IgG、IgM、IgA、IgD及IgE等五类.其中IgG、IgM、是介导体液免疫的主要效应分子,IgA是粘膜免疫反应产生的主要效应分子,在机体的防御机制中发挥重要作用.     

疫苗研究技术新进展

传染病是引起人类和动物死亡的最重要的疾病，引起的损失十分严重，一直是人们研究和防治的重点。疫苗是在疫病感染之前采用的制剂，特别是由于抗生素具有影响正常微生物区系、容易产生抗药性以及费用昂贵等缺点而使应用受到较大的局限，疫苗接种已经成为防制传染病的主要手段。21世纪，疫苗仍将是预防传染病的最有效手段。所以，疫苗研究一直是传染病研究的一个重要领域。近年来，由于基因组学及其相关技术的产生，极大地推动了疫苗的研制技术和疫苗的开发速度，下面就具体讨论一下相关的进展状况。     

新城疫F48E9株L基因克隆与鉴定

本实验根据已知新城疫病毒L基因序列分别设计了两对引物，引物1（L1）、引物2（L2）、引物2（L2）、引物3（L3）、引物4（L4），以L1/L2为引物可以扩出4050bpF48E9株L基因的A片段（LA），以L3/L4为引物可扩增出3504bpE48E9株L基因的B片段（LB）。LA和LB2个片段经特异性双酶切后用T4DNA连接酶连接成完整的F48E9株L基因并克隆到pMD18-T载体中，对克隆后L基因5’端、3’端和连接点处的核苷酸序列进行了测定，经DNASIS软件分析表明为NDVL基因，证明我们获得了F48E9株L基因。     

新城疫La Sota、V4疫苗免疫鸡和免疫攻毒鸡的特异性IgA抗体动态变化规律比较

应用间接ELISA对新城疫LaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的IgA抗体动态变化进行了测定和比较。试验表明，LaSota和V4免疫鸡泪液中特异性IgA均在免疫后第5天出现，8天开始明显升高，与血清中IgG出现时间相似，免疫后21天达到高峰。LaSota免疫鸡的泪液IgA抗体水平略高于V4免疫鸡；而两免疫组哈德氏腺(HG)中的特异性IgA高峰出现较迟。免疫攻毒鸡泪液中的特异性IgA抗体水平均先呈短暂的升高，之后下降的趋势，而HG中的IgA则首先表现降低，之后很快升高，5天后趋于下降，两攻毒组差异不显著，对IgA回忆应答均不明显。     

卷烟烟丝及烟气中主要生物碱成分的相关性和转移

[目的]探索卷烟烟丝与烟气中主要生物碱成分的相互关系.[方法]选取国内具有代表性的、不同价类的市场畅销品牌卷烟样,测定其烟丝及烟气中烟碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、新烟碱和可替宁6种生物碱成分的含量,通过SPSS软件分析其间的相互关系,计算其间的转移率并进行不同类卷烟的比较.[结果]分析表明,烟气烟碱含量与烟丝中的烟碱、降烟碱、新烟碱较显著正相关,相关系数分别为0.726、0.618和0.698;烟气中麦斯明与烟丝中麦斯明正相关,相关系数为0.522;其他成分之间弱相关.国内主要品牌卷烟烟碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、新烟碱和可替宁转移率范围为0.83％ ～ 53.43％.高价类较低价类卷烟,烟碱转移率偏高,其他成分都偏低;长较短滤嘴和高较低透气度卷烟各生物碱成分转化率都偏低,且加长滤嘴效果好于增加通风率.生物碱成分中的烟碱、麦斯明与卷烟内在质量相关较为密切.[结论]研究可为卷烟产品设计提供参考依据.     

T细胞抗原表位研究方法的进展

表位(epitope)又称抗原决定簇(antigenic determinant),是指存在于抗原分子表面的能够决定抗原特异性的数个氨基酸残基组成的特殊序列及其空间结构。根据与抗原受体结合不同分为B细胞(识别)表位和T细胞(识别)表位。 T细胞表位就是抗原蛋白中经抗原提呈细胞(antigenprocessing cell,APC)处理,由MHC分子提呈给T淋巴细胞受体的多肽片段。确定T细胞表位,对于研究细胞免疫的机理、过程及研制亚单位多肽疫苗和基因疫苗具有重要的意义。目     

兽用生物制品检验工作中的探讨(二)

2006年以后,中国内地再也没有暴发过大规模禽流感疫情,说明中国防治禽流感疫病的政策与方法是全面而有效的,其中国家拨款对农户鸡群实行禽流感疫苗强制免疫。以及禽流感疫苗过硬的质量功不可没。效力检验是评估禽流感疫苗质量的重要检验项目之一,它的检验方法是利用血凝抑制试验检测免疫鸡血清中的HI抗体。血凝抑制试验的原理是特异性抗体与血凝素蛋白相结合,封闭血凝素,使之不能与红细胞结合,从而抑制病毒凝集     

2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析

2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)分别在47.8h～78.4h和1.51～2.00之间;8个分离株在F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQKRF117,1个分离株F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQRRF117,表明了它们全为ND中、强毒株。同源性分析显示,9株NDV分离株之间核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为79.7%～99.7%和79.8%～100%;系统发生树分析表明,6株分离株与台湾株(TW98、TW99和TW2000等)遗传距离较近,可能有共同的起源,为基因Ⅶe型NDV,2株为鸽源NDV基因Ⅵ型,1株与我国特有的F48E9遗传距离最近,为基因Ⅸ型NDV。