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旨在获得产气荚膜梭菌ε毒素的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ε毒素编码基因进行了优化设计和人工合成,同时引入3个氨基酸点突变:第30和196位酪氨酸突变为丙氨酸,第106位组氨酸突变为脯氨酸。将该基因片段克隆至原核表达载体pET30a-(+)中进行表达,并纯化。利用Western blot方法检测纯化蛋白质与D型产气荚膜梭菌ε毒素抗血清的反应性,并检测其对小鼠的毒力。随后,以纯化的重组蛋白质免疫兔,根据《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价。结果表明,ε毒素的重组突变体为可溶性表达,通过灰度扫描,其表达量比例可达40%;该蛋白质能与D型产气荚膜梭菌ε毒素抗血清反应,小鼠安全试验显示,6.25×106 ng·kg-1的蛋白质仍无毒力;免疫兔血清对D型产气荚膜梭菌ε毒素的中和效价在一免后可达50~60最小致死量(MLD),二免后可达400~450 MLD;用1个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组4/4死亡,免疫组得到保护。由此表明,产气荚膜梭菌重组ε毒素突变体无毒力且保留了良好的免疫原性,为D型产气荚膜梭菌病新型疫苗的研制提供了重要的实验数据。 相似文献
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大、小兴安岭落叶松球果花蝇种类及生物学特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
1988年和1989年,我们分别对大、小兴安岭危害落叶松的球果花蝇(Strob-ilomyia spp.)种群进行了定点观察研究。在大兴安岭,种群由S.laricicola(Ka-rl)、S.baicalensis(Elberg)、S.infrequens(Ackland)和S.melaniola(Fan)组成,其中S.melaniola为优势种。在小兴安岭,种群由S.luteoforceps(Fan & Fang)S.batcalensis(Elberg)、S.infrequens(Ackland)和S.melaniola(Fan)组成,其中S.infrequens为优势种。利用黄色胶纸诱捕成蝇,发现各种类羽化期不同,进而幼虫的发育期也不同,并与落叶松球果的物候同步。各种球果花蝇在球果上产卵位置不同,因而其为害状也不相同。 相似文献
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BSL-3实验室须经国家生物安全认可和严格的实验活动审批才能开展相应活动,是国家(地区)开展高致病性病原微生物实验活动的重要技术支撑平台。实验室生物安全风险点易发生在样本及菌毒种的接收、传递和保存,动物实验,污水以及固体废弃物处理等环节,而实验室的意外事件(电力故障、火灾、积水等)与生物安保漏洞也会造成重大的生物安全事故。提示应准确地识别风险并通过人员日常监管、标准操作规程、两级屏障设施和个人防护装备等系列措施对生物安全风险点予以严格控制。 相似文献
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结合工作经验,简要介绍了虫情数据库结构的建立,如何将数据资料输入到数据库内以及如何查看数据库和对数据库进行维护技术。 相似文献
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利用免疫措施防制传染病是集约化种猪场搞好防疫的重要手段之一。笔者于深圳某种猪场从事兽医工作十几年 ,对该场种猪实施下列免疫程序 ,取得满意的效果 ,现介绍如下 ,供同行参考。猪瘟 :用广东省生物药厂生产的猪瘟冻干苗 ,种猪每 3个月免疫一次 ,每只注 3头份 ;商品猪在 2 0~ 2 1天龄免疫一次 ,每只注 1 5头份 ,6 5~ 6 7天龄加强免疫一次 ,每次注 3头份。各群猪每年按要求抽血送有关单位用ELISA法作猪瘟抗体监测 ,结果注苗 1 50天的抗体水平合格率达 95%以上。链球菌病 :用广东省生物药厂生产的链球菌活苗 ,种猪每4个月注苗一次 ,… 相似文献
10.
【目的】了解中国不同地区鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的流行和耐药情况,为禽支原体病的监测与防控提供科学依据。【方法】在广东、福建和安徽3个省份疑似MG感染的养殖场采集的43份气囊样品中分离培养和纯化MG流行菌株,并对其进行培养特性观察、生化及染色鉴定、血清学特异性鉴定、PCR测序分析、致病性试验和对常见抗菌药物敏感性试验。【结果】分离到3株疑似MG,均可使培养基颜色变黄,在固体培养基上呈典型"煎蛋"样菌落,可发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不能利用尿素,符合MG培养特性。姬姆萨染色观察菌体形态、血清学特异性鉴定结果进一步证实分离株为MG。mgc2基因测序结果显示,3株分离株与强毒代表株亲缘关系更近。致病性试验结果显示,3株分离株与MG感染临床症状一致,发病率为70%~90%,致病力较强。药物敏感性试验结果显示,3株分离株均对恩诺沙星、替米考星、土霉素、氟苯尼考耐药,对泰万菌素和沃尼妙林均敏感,对大观霉素、金霉素、泰乐菌素和泰妙菌素的敏感性具有地域差异:福建株对大观霉素表现明显耐药,安徽株对泰妙菌素表现耐药,而广东株对大观霉素、金霉素和泰妙菌素均较敏感。【结论】本试验成功分离到3株MG,致病力较强,且均存在一定程度耐药,对药物的敏感程度有地区性差异,今后仍需加强各地区MG的药物敏感性监测,减少耐药性的产生与扩散。 相似文献