序贯培养法对猪孤雌激活胚胎发育能力的影响

经体外成熟、孤雌激活和培养获得猪胚胎,研究了不同培养体系、共培养体细胞和序贯培养对猪孤雌激活胚胎发育的影响。试验表明:孤雌激活卵母细胞在SOF 10?S培养体系中分裂效果最好,添加胎牛血清的NCSU-23和颗粒细胞对胚胎发育有促进作用,培养6d后发育到桑囊胚的比率增加(P<0.05)。在序贯培养的前3d,SOF培养基(不含葡萄糖)和颗粒细胞对胚胎的发育有促进作用,分裂率(P<0.05)和突破4细胞阻滞的数目显著增加,在培养的后3d,添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞能支持较多胚胎发育到桑囊胚,桑囊胚的发育率为(59.5±3.2)%(P<0.05)。结果表明,SOF培养基和颗粒细胞 添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞的序贯培养系统能较好的促进胚胎的发育。     

犬卵母细胞体外成熟的影响因素

采集发情期和间情期犬卵巢,回收大腔（直径大于１ｍｍ）卵泡和不可见卵泡的卵母细胞,在４种成熟液（ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ和ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ）中成熟后进行了受精试验。结果：（１）发情期大于２ｍｍ和１～２ｍｍ的大腔卵泡卵母细胞的体外成熟率（４２．５％,３２．５％）显著高于间情期卵母细胞（２０．４％）,但发情犬不可见卵泡卵母细胞的体外成熟率（２８．９％）与间情期卵母细胞差异不显著;（２）在成熟液中添加促性腺激素,能有效地提高卵母细胞成熟率,不可见卵泡的卵母细胞对促性腺激素的依赖性（３０．０％比７．８％）大于大腔卵泡的卵母细胞（４２．５％比２９．０％）;（３）卵丘扩散与卵母细胞成熟存在相关性;（４）ＥＤＳ可诱导卵丘扩散,但不能有效提高卵母细胞的成熟率;（５）发情期卵巢上的大腔卵泡和不可见卵泡的卵母细胞以及间情期卵巢不可见卵泡的卵母细胞体外培养后,与体外获能的精子进行体外受精,其卵裂率分别为１６．０％（４／２５）,０％（０／４０）和２．５％（１／４０）。     

猴B病毒囊膜蛋白gC基因密码子优化及其在大肠埃希菌中的表达

根据猴B病毒E2490标准株gC基因,选择大肠埃希菌偏好的密码子,设计合成了1 200个碱基,共编码400个氨基酸,测序证实后,克隆入pET-28b(+)载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),在IPTG诱导下获得50 ku以包涵体形式表达的gC重组蛋白.Western blot分析表明表达产物能够被猴B病毒标准阳性...     

不同诱导剂对山羊精子体外获能和受精能力的影响

比较不同获能诱导剂对山羊精子体外获能及受精能力的影响,优化山羊早期胚胎体外生产技术体系。山羊精子分别以不同浓度肝素、IA和EGS处理后,检查精子获能率、活力和体外存活时间,同时与体外成熟的卵母细胞受精,观察不同获能处理对精子受精能力的影响。在培养液中添加5,10,20μg／mL肝素,都能促进精子获能,其中10μg／mL组的获能率达到55．6％,存活时间为18～19h;低于此浓度,获能率显著降低,高于此浓度,获能率升高不显著,但精子存活时间和活力明显下降。0．1,0．4,0．7μmol／LIA都能提高精子获能率,其中0．4和0．7μmol／L处理组精子获能率最高,分别为56．2％和53．6％,但两组中的精子活力和存活时间有明显差异。5％,10％和20％EGS都能提高精子活力,延长体外存活时间,但实验组的获能率最高不到20％。10％EGS获能组的受精率和卵裂率分别为27．9％和18．6％,显著低于10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA组,后两者的受精率相似,但IA组的卵裂率明显高于肝素组（52．0％VS40．2％,P〈0．05）。10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA都可诱导山羊精子高水平获能,并获得较好的受精能力,但IA表现出更强的促卵裂发生效应。     

丙硫咪唑对鸭自然感染环肠科吸虫的驱除试验

环肠科(Cyclocoelidae Kossack,1991)吸虫常寄生于家鸭呼吸系统,危害严重。嗜气管吸虫(Tracheophilus spp)寄生于鸭的气管、支气管,平体属吸虫(Hyptiasmus spp)和噬眼属吸虫(Ophthalmaphagus spp)则多寄生在鸭的鼻腔、鼻泪管和眶下窦(Sinus infraorbitalis)等处,由于虫体的机械刺激和分泌的毒素的影响,导致鸭营养不良、消瘦、羽毛失去光泽、呼吸困难、摇头、鸣叫痛苦、眼、鼻分泌物增多或出现脓性分泌物,以及眼失明相行走困难,甚至因虫体阻塞呼吸道发生窒息死亡。国内贵州、浙江等地报道嗜气管吸虫病流行导致鸭群出现“软脚瘟”以及呼吸困难和皮下气肿。 我省鸭感染环肠科吸虫比较严重,据省畜牧兽医研究所的省家鸭寄生虫的调查资料,环肠科吸虫的感染率为2～66%,感染强度1～61。种类有舟形嗜气管吸虫、谢氏平体吸虫、四川平体吸虫和成都平体吸虫两新种,马氏噬眼吸虫和鼻居噬眼吸虫。本次试验是我们进行隐孢子虫病流行病调查时发现一群麻鸭患严重的环肠吸虫感染,故进行本次试验。现报告于下: