无公害添加剂组合对肉仔鸡生产性能的影响

选1日龄商品代艾维因混合健雏480只，按单因子随机试验设计分为4组，每组4个重复，每重复30只进行试验。对照组饲喂基础日粮 5mg／kg维基尼亚霉素；试验l，2，3组鸡21日龄前分别饲喂基础日粮 0．1％生命素 0．5％迈克活菌酶；基础日粮 500玎骧／kg糖萜素 0．5％迈克活菌酶；基础日粮 300mg／／kg糖萜素 0．3％迈克活菌酶 0．06％生命素。21日龄后分别饲喂基础日粮 0．1％生命素 0．3％迈克活菌酶；基础日粮 300叫kg糖萜素 0．3％迈克活菌酶；基础日粮 200mg／kg糖萜素 0．2％迈克活菌酶 0．05％生命素。各组基础日粮完全相同。试验结果表明：3个试验组供试鸡的体增重分别比对照组提高10．24、9．61和12．48％．料重比分别降低7．50、7．08和11．67％，每只鸡实际赢利分别增加0．5ll、0．671和1．019元，生物学综合评定值分别为106．12、105．75和108．56。不同无公害添加剂组合对维基尼亚霉素具有显著替代作用。     

绿色荧光蛋白研究进展

来源于海洋多管水母属的绿色荧光蛋白(GFP)基因是目前惟一在细胞内稳定表达,在蓝光或长紫外光的激发下,不需要任何反应底物及其他辅助因子就能发出绿色荧光的新型报告基因,无种属、组织和位置特异性,且能监测基因表达、信号转导、共转染、蛋白运输与定位,以及细胞系谱分类等。GFP对细胞无毒性,且检测方法简单,结果真实可靠,目前在多种原核和真核生物研究中得到广泛的应用。文章就GFP的生化特性、GFP的改进及其在分子生物学研究中的应用潜力进行简要阐述。     

猪圆环病毒2型山东分离株全基因组的克隆与序列分析

根据猪圆环病毒2型(PCV-2)全基因组序列,设计一对特异性引物,从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病料中扩增出PCV-2基因组DNA,将基因片段克隆于pMD18-T载体,筛选获得含有相应片段的阳性重组质粒pMD18-T-PCV-2。对筛选出的阳性质粒进行测序。结果表明,PCV山东株的全基因组为1 767 bp,与国内外毒株核苷酸同源性高达99.6%。     

PRRSV tGP5基因克隆及pcDNA3.1-tGP5真核表达载体的构建

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF5基因的核苷酸序列设计一对特异性引物,用PCR扩增PRRSV GP5蛋白非中和性表位缺失的tGP5基因,将基因定向连接在真核表达载体pcDNA3.1的HindⅢ和EcoRⅠ多克隆位点之间,构建重组质粒pcDNA3.1-tGP5。转化DH5α感受态大肠埃希菌,提取质粒。重组质粒经PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定,成功构建了pcDNA3.1-tGP5基因的重组体。     

专家文库

单虎,博士,教授,现任青岛农业大学动物医学院院长。享受国务院特殊津贴专家,国家生猪产业技术体系智能化养殖岗位科学家,山东省有突出贡献的中青年专家,山东省中青年学科带头人,国家引才引智示范基地、山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心、山东省预防兽医学重点实验室、山东省新兽药创制协同中心负责人,山东省优秀科技工作者,山东省教学名师。兼任山东省兽医协会秘书长,青岛市畜牧兽医学会理事长,国家生猪产业技术创新战略联盟副理事长,中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九届理事会常务理事,中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届理事,山东免疫学会兽医免疫学专业委员会副主任委员,中国农产品流通经纪人协会畜禽产业经纪人分会会长,山东省畜牧经济研究会副会长。     

猪附红细胞体的形态学观察

应用光学显微镜和电子显微镜对猪附红细胞体显微结构和超微结构进行观察。结果显示,附红细胞体属典型的原核生物,多数为大小不等的球形、卵圆形、杆状等多形态生物体,直径为0.2μm~2.5μm,常在红细胞表面或血浆中单个或成团寄生。该病原无细胞壁,由单层界膜包裹着,无明显细胞器和细胞核。附红细胞体通过一些细丝连接到红细胞膜上,使红细胞膜表面出现皱褶、突起、凹陷,导致红细胞结构和功能改变。     

猪附红细胞体病的研究进展

猪附红细胞体病是近几年引起医学和畜牧兽医工作者注意的一种人畜共患病。从附红细胞体的分类、形态结构、抵抗力、流行病学方面进行了综合论述,探讨了猪附红细胞体病的实验室诊断方法及防治措施等。     

牛传染性鼻气管炎病毒gD基因的克隆与表达

构建pET32a重组表达载体,转化到BL21(DE3),诱导表达牛传染性鼻气管炎病毒重组gD蛋白。用已发表的IBRV的gD基因序列设计一对特异性引物,通过PCR方法扩增一条766bp的目的基因gD,将gD基因克隆到原核表达载体pet32a,得到重组表达载体pet32-gD,转化到BL21(DE)中,通过IPTG诱导获得融合蛋白。重组表达蛋白经纯化后,免疫印迹分析。结论证明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。     

单克隆抗体间接免疫荧光(IFA)检测猪附红细胞体

为建立利用单克隆抗体检测猪附红细胞体病的间接免疫荧光(IFA)方法,用抗猪附红细胞体的单克隆抗体,对48份疑似猪附红细胞体感染的病猪猪血进行免疫荧光检测,并与血涂片镜检及PCR检测方法进行比较,结果显示IFA检测的阳性率为68.75%,与PCR检测阳性率为77.08%符合率较高,比血涂片的瑞氏和姬姆萨染色镜检阳性率高出近30个百分点;而用猪肺炎支原体、猪链球菌和猪巴氏杆菌作对照,结果均呈阴性。建立的用抗猪附红细胞体的单克隆抗体检测猪附红细胞体病的IFA特异性强,敏感性高;检测临床样品的结果准确可靠。     

抗猪附红细胞体单克隆抗体的制备

以纯化的猪附红细胞体免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并用间接ELISA方法进行筛选,经过间接ELISA方法、免疫印迹和间接免疫荧光试验进行鉴定,共获得5株分泌抗猪附红细胞体单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1H1、1H2、3A5、5B1和7E11,其单抗亚类鉴定分别属于IgG2b、IgG1、IgG2b、IgG2b和IgG2b。这5株McAb均能与猪附红细胞体全菌蛋白发生特异性反应,而不与猪肺炎支原体、猪链球菌、大肠杆菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒发生反应,并且1H1、3A5和5B1能识别同一抗原位点,1H2和7E11识别另一抗原位点。