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<正> 一、实验方法 1.试验材料 1983年3月至1985年5月于大分县河鲀餐馆获得的242个红鳍东方鲀(Fugu rubripes)肝脏样品和50个假晴东方鲀(Fugu rubripes chinensis)肝脏样品,经毒性实验比较,取含毒量较高的样品用于烹调除毒实验。 2.烹调除毒实验将各有毒河鲀肝脏样品由专门的河鲀厨师按图所示的烹调法处理,并于此过程中调 相似文献
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己烯雌酚(Diethylstilbestrol,英文缩写为DES)是一种人工合成的二苯乙烯类雌激素药,最初曾作为添加剂被添加在饲料中以促进动物生长。虽然随着其致癌性的发现,我国农业部在1997年以3号文公布禁止使用该药,但当前我国在畜禽产品及水产品中滥用DES现象依然存在,检测工作依然十分必要。目前己烯雌酚的残留检测工作已逐渐简化,而样品的前处理过程越来越成为兽药残留分析过程中的关键[1]。经典的样品前处理方法通常繁琐复杂、操作时间长、选择性差,满足不了兽药残留分析发展的新要求。免疫亲和色谱技术作为一种新的样品前处理技术被逐渐应用到… 相似文献
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己烯雌酚人工抗原的合成研究 总被引:5,自引:1,他引:4
采用三步反应合成了己烯雌酚人工抗原,为己烯雌酚酶免疫检测技术的进一步研究奠定基础。试验结果证实,己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象,酸碱处理是降低交联前衍生物中顺式体比例的有效方法;经三步合成,成功地制备出了人工抗原;人工免疫原及包被原的最适结合比例分别为1:28和1:7。 相似文献
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己烯雌酚单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
以自行合成的己烯雌酚(DES)免疫原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合、显微克隆等单克隆抗体技术,制备了5株抗DES单克隆抗体分泌杂交瘤细胞株(7B6、4B10、1G10、4E4、2C7);选择其中的7B6株抗体,建立了间接竞争ELISA法(indirect competitive inhibition ELISA),通过初步优化,其检测限为10pg/孔,与同类二苯乙烯类雌激素的交叉反应高,而与天然雌激素雌二醇几乎无交叉反应性。这项研究为DES残留检测试剂盒的开发打下了基础。 相似文献
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<正> 河豚鱼是一种肉味鲜美,但含有剧毒的鱼类。有史以来曾夺去了无数人的生命,以至被罩上了可怕的衣冠,使人望而生畏。其实,只要我们认识了它,就会对它产生新的看法和兴趣。我国人民对于河豚鱼的食用及药用,历史悠久。早在公元前二千六百多年前的《神农本草经》、战国时期的《山海经》及李时珍的《本草纲目》等历代有关著作中都有关于河豚鱼的记载。可是到了近代,由于文化科学的落后,对河豚鱼的研究也处于劣势。解放后,特别是 相似文献
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【目的】制备抗己烯雌酚(DES)的高亲和力特异性抗体,建立检测DES的间接竞争ELISA标准曲线,为进一步研究DES快速检测试剂盒打下基础。【方法】应用DES人工免疫抗原免疫新西兰大白兔,采集抗DES的特异性抗血清,用KCjunior软件进行4参数非线性回归,建立检测DES的间接竞争ELISA标准曲线,各药物浓度在同一批次酶标板中做4次重复,共做4个批次对标准曲线进行评价,用己烷雌酚(HEX)、双烯雌酚(DIEN)、雌二醇(E2)、乙炔雌二醇(EE2)和L-酪氨酸(Tyr)来评价抗体的特异性。【结果】5只家兔免疫产生了抗DES的特异性抗血清,其中4号家兔抗血清效价达到了1﹕4 096 000竞争抑制效果最好,工作稀释浓度为1﹕1 024 000时,线性范围在0.01~50 μg•L-1,标准曲线的IC50在0.71~1.0 μg•L-1,R2在0.9952~0.9978。获得各标准浓度下B/B0的批内变异系数在0.52%~22.48%,批间变异系数在2.64%~19.51%。交叉反应试验表明,4号家兔抗血清对与DES结构相似的人工合成二苯乙烯类雌激素药物己烷雌酚(HEX)和双烯雌酚(DIEN)的交叉反应率分别为8.5%和38.5%,与天然雌激素类药物雌二醇(E2)和乙炔雌二醇(EE2)以及L-酪氨酸(Tyr)的交叉反应均小于0.001%。【结论】本文报道的抗体特异性好、亲和力高,可满足目前中国动物性食品安全评价检测的需要,为研究组织中DES残留检测的ELISA方法及其开发DES快速检测试剂盒奠定了基础。 相似文献
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