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1.
2.
猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和乙型脑炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp、430 bp和1 015 bp目的片段.以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR.CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性.以β-actin为对照,利用本方法检测了174份临床样品(血清、肺脏和胎儿),其结果为:PRRSV、CSFV和JEV的阳性率分别为30.4%、4.6%和1.7%;CSFV和PRRSV混合感染阳性率为1.7%.同时对临床样品中CSFV、JEV和PRRSV阳性PCR产物进行测序分析,发现CSFV、PRRSV和JEV的PCR产物序列和NCBI数据库中目标基因的同源性分别为92%、90%和89%,这证实了多重PCR的阳性结果为上述3种病毒.结果证明,所建立的多重RT-PCR可用于临床检测. 相似文献
3.
猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 总被引:6,自引:0,他引:6
【目的】探讨2003~2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌。经生化鉴定,药敏试验、血凝试验及动物试验等方法进行检测和分析。【结果】在中国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%~14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%~11.8%之间;2003~2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系。Bb最常见的共感染菌依次是链球菌(55.9%)、副猪嗜血杆菌(50.0%)、大肠杆菌(43.1%)、巴氏杆菌(25.5%)、绿脓杆菌(17.6%)和沙门氏菌(11.8%)。在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌。对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验。结果表明:各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死。【结论】在中国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高。 相似文献
4.
5.
以晋北盐碱地为对象,采用"改土材料+垫层+覆盖"的技术措施组合,进行了控盐控碱试验.结果表明,浓度为0.25 kg/m3,0.5 kg/m3的黑矾作为改土材料时,对土壤pH值及电导率的降低效果明显;对晋北重度盐碱地改良效果较好的技术组合为黑矾0.25 kg/m3+石块垫层+砂子覆盖. 相似文献
6.
8.
[目的]研究酸黄瓜中酸浓度对亚硝酸盐生成量的影响。[方法]以华北基因型和欧关基因型黄瓜为试验材料,采用醋酸浸泡法腌制成酸黄瓜,研究酸浓度对酸黄瓜中亚硝酸盐生成量的影响。[结果]酸浓度的增加有利于亚硝酸盐生成量的降低,在腌制的第1d,亚硝酸盐的生成量较低,在第2~3d出现亚硝酸盐含量的峰值,腌制5d后,亚硝酸盐的生成量降低到一个平稳且较低的水平。欧美基因型酸黄瓜中亚硝酸盐的量要低于华北基因型,低温下亚硝酸盐的量要低于常温下。[结论]适当提高酸浓度,在腌制5d后,酸黄瓜中亚硝酸盐的舍量很低,具有食用安全性。 相似文献
9.
试验选用体况和日龄相近的杜长大三元杂种生长猪300头以研究益生菌结合抗生素对猪饲料干物质消化率以及后肠微生物的影响。试验分为5组,每组3个重复,每个重复20头猪,试验周期9 d。5组分别为空白对照组、基础饲粮添加林可霉素(10%)1 kg/t组;基础饲粮添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、粪肠球菌(7∶2∶1,共50亿CFU/kg载体)1 kg/t饲料组;每吨基础饲粮添加林可霉素(10%)100 g+枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、粪肠球菌(7∶2∶1,共50亿CFU/kg载体)900 g组;每吨基础饲粮添加林可霉素(10%)100 g+枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、粪肠球菌(7∶2∶1,共100亿CFU/kg载体)900 g组。结果表明:单独添加抗生素、微生态制剂以及同时添加抗生素与微生态制剂都能提高饲料干物质消化率且与对照组相比差异显著(P〈0.05);林可霉素组大肠杆菌数量显著低于林可霉素+2倍复合菌组(P〈0.05);乳酸杆菌数量在各组间均无显著差异(P〉0.05);总好氧菌和总厌氧菌数量试验组显著高于对照组(P〈0.05),各试验组间无显著差异(P〉0.05)。表明抗生素结合益生菌使用能改善生长猪后肠微生物菌群结构,对饲料干物质消化率也有明显改善。 相似文献
10.
新型基因工程亚单位菌苗对猪传染性胸膜肺炎的保护效力研究 总被引:12,自引:0,他引:12
利用分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的重组表达产物和胸膜肺炎放线杆菌7型菌,研制了一种新型的基因工程亚单位菌苗并对此疫苗的免疫效力进行了研究。利用该疫苗免疫断奶仔猪,间隔3周加强1次,同时设空白对照组和一种商品化的三价细菌灭活苗组。首免后每周采血检测ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的ELISA抗体和7型菌的血凝抗体,第2次免疫两周后用猪胸膜肺炎放线杆菌1型菌株进行气管攻毒。从攻毒后症状、细菌分离、抗体检测、死后剖检对免疫效果进行评价。结果显示亚单位菌苗对于猪传染性胸膜肺炎有显著的保护力,能明显减轻临床症状和降低肺部损伤,效果优于商品化的细菌灭活苗。 相似文献