禽源多杀性巴氏杆菌毒力基因多重PCR检测方法的建立

为建立多重PCR方法用于禽源多杀性巴氏杆菌中毒力基因的检测,对禽源多杀性巴氏杆菌分离株MD-1的9个毒力基因进行PCR扩增及敏感性测定,然后通过多个基因的组合得到5种多重PCR体系,并从中筛选合适的多重PCR体系,测定其特异性、敏感性和重复性。结果显示,分离株MD-1中的9个毒力基因均可扩增出目的片段,敏感性测定结果表明,有的基因可检测至1.81×10~4 copies/μL的核酸。筛选出的4种多重PCR体系1、3或4、5均可用于其中6个毒力基因(pfhA、nanB、ompH、oma87、sodA、sodC)的检测,并且特异性较强,均能够扩增禽源多杀性巴氏杆菌分离株HN-1和CZ-6,而大肠埃希菌和沙门菌分离株均无扩增条带。多重PCR体系1、3、4可检测多杀性巴氏杆菌核酸的敏感性为1.81×10~6 copies/μL,多重PCR体系5甚至可检测至1.81×10~5 copies/μL,同时这4种多重PCR体系与单个毒力基因PCR检测的敏感性均一致。说明建立的禽源多杀性巴氏杆菌毒力基因的多重PCR检测方法对多杀性巴氏杆菌毒力基因的快速检测有参考价值。     

不同稻种催芽方式对发芽率的影响

为了解当前生产上常用的两种不同稻种催芽方式对稻种发芽率的影响,通过对两种催芽方式的浸种、催芽时间、温度、发芽率等进行观察记录,探究了其对稻种发芽率的影响,结果表明,采用袋装稻种堆放加盖湿麻袋方式催芽的发芽率比采用袋装稻种散放加盖塑料布方式催芽的发芽率高3.9%。     

欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒辽宁分离株全基因测序与遗传演化分析

为了研究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征,根据欧洲型PRRSV标准毒株LV设计15对引物,对LNEU12毒株全基因分段进行扩增并测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因,然后进行序列的比对分析。结果表明:LNEU12毒株基因全长为15 398 nt(不含3'尾端序列),与LV毒株同源性为90.1%,其中NSP2和ORF3/4重叠区域缺失21 nt,ORF6、ORF7较为保守。根据基因变异特点和遗传进化亲缘关系推测LNEU12辽宁分离株为欧洲型PRRSV变异毒株。     

生态型复混肥（绿先机506）在小麦上应用示范试验

通过生态型复混肥（绿先机506）与当前跃进农场大面积使用的艾美复混肥在小麦上应用的肥效对比试验,结果初步证明,生态型复混肥（绿先机506）不仅能提高小麦的干物质积累,提高穗粒数和千粒重,降低成本,提高植株抗倒伏能力,而且有利于改良土壤,保护环境。     

不同施氮比例对直播水稻产量的影响

为了探讨精量机条播和人工撒播水稻产量形成的规律,明确直播稻最适宜的氮肥运筹比例,特做了不同前后氮肥比例对精量机条播和人工撒播水稻产量的影响。试验结果表明:机条播的最优氮肥运筹比例为7∶3,人工撒播的最优氮肥运筹比例为6∶4;精量机条播比人工撒播产量高的主要优势在于有效穗不减少,而穗型变大;后期氮肥比例增加促进二次枝梗的数量,提高每穗总粒数和每穗实粒数;适宜的氮肥运筹比例能明显促进抽穗期、成熟期的干物质积累量。     

杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒分离及其ORF6、ORF7基因的序列分析

试验旨在研究杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV) 辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征.用Marc-145细胞从辽宁某杂交野猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)病猪血液中分离到1株病毒,该分离毒株经Marc-145细胞6次传代后出现稳定的细胞病变,采用RT-PCR方法对分离病毒进行ORF6和ORF7基因的扩增、克隆和测序,并与已知序列毒株的相应片段进行同源性比对.结果表明,分离毒株的ORF6、ORF7基因与国内外美洲型毒株的核苷酸同源性分别为96.0%～100.0%、94.5%～99.4%;氨基酸同源性分别为89.6%～100.0%、87.3%～98.7%;与欧洲型代表毒株LV的ORF6、ORF7基因差异较大,核苷酸同源性分别为70.4%、70.1%,氨基酸同源性分别为48.8%、49.7%.推测辽宁杂交野猪体内分离毒株在基因型上属于美洲型毒株.     

欧洲型PRRSV N蛋白特异性抗原表位基因串联表达及其产物的纯化

采用SOE-PCR方法将编码欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的aa2~12和aa40~46核苷酸片段进行重复串联,获得编码双表位重复串联基因NE,构建表达载体pGEX-4T-1-NE,将其转入BL21(DE3)pLysS菌中,获得融合蛋白。Western-blot检测结果表明,该融合蛋白可被欧洲型PRRSV阳性血清识别,而不能被美洲型PRRSV阳性血清、猪瘟病毒阳性血清和伪狂犬病病毒阳性血清识别。纯化所得的融合蛋白,为建立检测欧洲型PRRSV提供了抗原基础。     

电子商务环境下构建虚拟物流信息服务平台的研究

随着现代物流与网络信息服务技术的结合应用,虚拟物流信息服务平台将提供物流一体化服务,这成为当前物流发展的新趋势。本文基于我国目前物流发展的市场背景,对虚拟物流信息服务平台进行了需求分析,指出构建虚拟物流信息服务平台的必要性。同时对虚拟物流信息服务平台进行具体的市场定位,分析了平台模块功能,提出了一个构建虚拟物流信息服务平台的构想。