辽宁新品系绒山羊ZFX、ZFY基因片段的进化研究与性别鉴定

根据摩弗伦羊（Mouflon）和人（Human）的ZFX、ZFY基因序列以及相关文献设计引物,以雌雄辽宁新品系绒山羊的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增并克隆其ZFX、ZFY基因第11号外显子的部分片段,进行序列测序.结果用NCBI的BLAST,生物软件ClustalX.exe、Mega、BioEdit.exe、DNAClub等进行分析.对辽宁新品系绒山羊（New-breeding cashmere goat）、藏系绵羊（Tibetan sheep）、摩弗伦羊（Mouflon）、马（Horse）、山狗（Coyote）、猪（Pig）、鲸（Whale）、人（Human）和牛（Cow）的ZFX、ZFY基因的外显子同源性进行序列对比分析.用N-J方法构建分子系统树.分析结果表明：ZFX、ZFY基因两者核苷酸同源性达92%,推导的氨基酸同源性为95%.经分析可知,辽宁新品系绒山羊与摩弗伦羊亲缘关系最近,与其他物种的亲缘关系较远.利用限制性内切酶AvaII对辽宁新品系绒山羊ZFX、ZFY基因的PCR产物进行酶切,确定AvaII为ZFX基因上的特异酶切位点,以此对辽宁新品系绒山羊性别进行鉴定.