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旨在明确荷斯坦奶牛瘤胃内嗜麦芽寡养单胞菌的生物学特性、耐药性以及携带的毒力和耐药基因等信息。采集荷斯坦奶牛瘤胃内容物,经富集、分离和纯化等步骤获得菌株,通过16S rDNA测序以及同源性分析确定菌株种属,纸片扩散法检测菌株耐药性,PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测菌株携带的毒力和耐药基因,通过小鼠灌喂试验检测菌株的致病性。最后从荷斯坦奶牛瘤胃内共分离到17株嗜麦芽寡养单胞菌PMIK-2(Stenotrophomonas maltophilia),其中高产奶牛组4株、低产奶牛组13株。生物学特性结果表明,分离菌株的最佳生长温度为38℃,最适生长pH为7.0,对胆盐有较强的耐受性。药敏结果显示,分离菌株对卡那霉素、头孢氨苄、头孢唑啉、克拉霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星高度敏感,对链霉素、氨苄西林、四环素、亚胺培南、庆大霉素具有耐药性。此外,在分离株的基因中检测到了fimH、mrkD和wabG 3种毒力基因和AadA1、BlaSHV1、TetD 3种耐药基因。菌株致病性结果显示,灌喂PMIK-2菌液1.0×107,1.0×109,1.0×1... 相似文献
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【目的】通过对瘤胃液中分离所得的菌株进行研究,为益生菌制剂的制备提供基础数据。【方法】采集10头健康荷斯坦奶牛的瘤胃液,通过涂布、特性培养、纯化等步骤获得单一菌株,提取细菌DNA,进行16S rDNA的PCR扩增。通过16S rDNA基因测序鉴定后进行序列比对并构建系统发育树,确定菌株种类。对不同种类的细菌进行0~48 h的培养测定其生长特性,并进行耐酸碱和耐胆盐试验。【结果】通过涂布分离菌株得到20株分离菌,经PCR扩增后测序发现20株菌属于7种不同的菌,大致确定L7为解淀粉芽孢杆菌、K7为枯草芽孢杆菌、S7为嗜麦芽窄食单胞菌、C2为地衣芽孢杆菌、M7为马链球菌、F7为弗氏酸柠檬杆菌、T7为吉氏库特菌。通过生长曲线可以看出,7株菌分别在24~36 h达到最快生长期。M7和K7对酸有较强的耐受性,而S7、C2和F7对酸性较为敏感,C2对碱的耐受性最强,而T7对胆盐的耐受性最强,S7对胆盐最不耐受。【结论】本研究从瘤胃中分离得到的7个菌株对酸碱和胆盐具有不同程度的耐受性,以及最适生长周期。 相似文献
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