缫丝废水发酵产果胶酶的条件优化研究

果胶酶制剂能够有效地提高饲养动物对营养物质的消化吸收率,是一种绿色饲料添加剂。缫丝废水是缫丝厂的主要排放物,是一种无毒、含氮和磷较高的有机废水。本研究以前期选育所得高产果胶酶菌株沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)G7-7作为试验菌株,利用缫丝废水为主要发酵原料,对产果胶酶条件进行优化。通过单因素试验和正交试验得出该菌株的最佳产酶条件为:以5%蚕沙为产酶诱导物,发酵液蔗糖添加量1.1%,接种量16%,发酵液初始pH 9.5,36℃发酵84 h。在此条件下菌株的产果胶酶能力可达到21.84 U/mL,是优化前12.39 U/mL的1.76倍,其中发酵液蔗糖添加量对产果胶酶影响达到显著水平。     

生物法生产25-羟基维生素D3条件优化

[目的]优化25-羟基维生素D3[25(OH)VD_3]的转化条件,提高25(OH)VD3产量。[方法]通过单因素试验和正交试验对菌株UV-FY-141转化生产25(OH)VD_3的条件进行优化。[结果]确定其最佳发酵培养基:葡萄糖15.00g,蛋白胨20.00g,NaCl5.00g,CaCO_32.00g,FeSO_4·7H-2O0.01g,去离子水1000mL。优化后转化条件:发酵初始pH6.5,发酵温度为28℃,发酵时摇床转速为200r/min,发酵时间为72h。在优化条件下,25(OH)VD3产量由原来的9.460mg/L提高到13.130mg/L,提高了38.79%。[结论]采用优化后的转化条件,可显著提高25(OH)VD_3的产量。     

缫丝废水发酵产蛋白酶的菌种筛选及发酵工艺优化

试验旨在研究筛选菌株发酵缫丝废水生产蛋白酶。试验从自然环境取样,筛选得到能利用缫丝废水发酵产蛋白酶的菌株Z416,形态学观察和分子生物学鉴定该菌株为硝基愈创木胶类节杆菌(Paenarthrobacter nitroguajacolicus),并通过单因素和正交设计试验优化了该菌株的产酶条件组合。结果显示,发酵液乳糖添加量4%、发酵培养基初始pH值7.5、接种量16%、摇床转速180 r/min、发酵温度33 ℃、发酵时间84 h为最优发酵方案。在此条件下,菌株Z416酶活力达到17.89 U/mL,是优化前酶活(3.21 U/mL)的5.57倍。研究表明,该蛋白酶具有应用到禽和猪饲料中的潜力,可以改善畜禽的生长性能。     

三叶青细胞悬浮培养体系的条件优化和总黄酮含量的测定研究

试验旨在探讨使用三叶青细胞悬浮培养生产三叶青黄酮的可行性。试验以野生三叶青叶片和茎段为外植体诱导愈伤组织，测定增殖、单细胞培养及其总黄酮含量，悬浮培养细胞经不同液体培养基配方、光照方式、摇床转速、接种量、p H值、培养天数培养，以乙醇为溶剂，回流提取总黄酮，使用NaNO₂-Al(NO₃)₃显色，在500 nm处用紫外分光光度计测定总黄酮含量。结果显示，三叶青最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2-4D+3 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-KT,8 h/d光照，摇床转速110 r/min，接种量25 m L/L,pH值5.8，培养时间为13 d。研究表明，三叶青细胞培养可生产黄酮，最优培养条件下三叶青细胞悬浮培养体系黄酮积累量可达20.524 mg/g。     

蔗渣纤维素预处理及纤维素酶混合发酵研究

试验旨在研究蔗渣纤维素预处理方法,优化纤维素酶系组成,提高产酶量。试验使用甘蔗渣为原料,经过微波、磷酸和蒸汽爆破预处理蔗渣纤维素。结果显示：厚垣镰孢霉HML278产纤维素酶及半纤维素酶酶活均有提高,滤纸酶酶活比未处理材料提高了1.02倍,处理后酶解葡萄糖比未处理蔗渣提高100%。米曲霉HML366可以产高转苷活性的β-葡萄糖苷酶,合成龙胆二糖,龙胆二糖可以诱导厚垣镰孢霉HML278产纤维素酶。厚垣镰孢霉HML278和米曲霉HML366菌种兼容性较好,混合发酵优化纤维素酶系组成,比厚垣镰孢霉HML278单独发酵滤纸酶活酶活提高了83.62%,β-葡萄糖苷酶比米曲霉HML366单一培养酶活提高93.09%。研究表明,米曲霉HML366和厚垣镰孢霉HML278混合培养产酶效果优于单一菌种培养产酶。     

基于高通量测序的坡豪湖湿地土壤细菌群落结构分析

在四季选取坡豪湖湿地湖泊周边的8个土壤样地,采用Illumina MiSeq高通量测序技术对细菌的16 S rRNA V3～V4区进行测序,并结合土壤理化性质,研究了土壤细菌多样性变化的特征和驱动因素.结果表明:从所有样本中共检测到细菌类群38门、92纲、198目、367科、625属,主要的优势菌门为变形菌门(Pro-teobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、硝化螺菌门(Nitrospir-ae)和厚壁菌门(Firmicutes).在对四季样本的检测中,水分因素对土壤理化指标影响显著(P<0.05),其中土壤含水量(SMC)与绿弯菌门呈极显著负相关,与放线菌门、厚壁菌门呈显著正相关;pH与硝化刺菌门(Nitrospi-nae)呈极显著正相关,与厚壁菌门呈显著负相关;总氮(TN)与拟杆菌门(Bacteroidetes)呈极显著正相关,与绿弯菌门呈显著负相关.因此,下游电站的季节性蓄放水对坡豪湖湿地的土壤细菌多样性和群落组成产生了显著的影响,同时人类活动对土壤细菌群落结构起着不可忽视的作用.