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环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体 总被引:4,自引:1,他引:4
利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法建立了猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoinae)的快速检测方法。该方法以猪肺炎支原体保守性基因16SrRNA为靶序列设计了6条特异引物,在63℃等温条件下,30min即可完成反应。结果显示,LAMP技术优于PCR技术。在敏感性实验中,LAMP方法的能检测出10个包含靶基因片段的重组质粒,敏感性高于PCR方法10倍;特异性实验中,LAMP方法和PCR方法均显示出了高度的特异性;在对127个临床鼻拭子样本的检测中,LAMP方法检测结果是所有样本都为阳性,而PCR检测出了116份阳性。证明本研究所建立的方法,对临床样本的检测的敏感度高于常规的PCR法。LAMP方法具有操作简便、快速、高效、敏感、特异、经济的特点,在研究机构以及基层实验室、现场监测的广泛使用具有一定的潜力。 相似文献
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利用环介导等温核酸扩增技术(LAMP),建立了一种灵敏、特异、快速的猪细小病毒(PPV)检测方法.该方法针对猪细小病毒非结构蛋白(NS-1)基因保守区域设计6条特异引物,在63℃的等温条件下45 min即可完成反应.最低检测限量为10拷贝的PPV目的基因,比常规聚合酶链式反应(PCR)方法敏感100倍,并具有良好的特异性.以钙黄绿素和Mn2+作为荧光指示剂,可快速、直观判定反应结果.通过对149份临床样品进行检测比较,LAMP与PCR检出阳性样本数分别为33份和27份,表明LAMP方法阳性检出率高于PCR. 相似文献
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<正>传统的沙枣育苗春季需大量人工耧地破壳,如作业不及时就会造成夹苗、死苗现象;冬季老鼠啃食种子造成断行;夏季人工松土除草工作量大;苗木质量参差不齐。针对这些问题,尝试机播育苗,降低人工费用,提高苗木质量。1播前准备 相似文献
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本文报导了应用颗粒杀菌剂(Plantvax 5G)处理咖啡植株根带周围土壤防治锈病(Hemjleia vastatrix)的一种新方法。这种杀菌剂每株施用二克或更高剂量,能有效地防治幼龄咖啡的锈病。如果经济的话,这种方法能代替传统的叶面喷雾技术或与其交替使用。 相似文献