普洱熟茶提取物对实验性非酒精性脂肪肝鼠脂代谢指标及肠道菌群的调节作用

非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是与肥胖密切相关,并且以肝脏的炎症和脂肪浸润为特征的一种营养代谢性疾病。近年来,由于高营养的饲养方式,导致在宠物临床上出现了越来越多的犬猫患有NAFLD,因此找到一种切实有效的预防及治疗方法是非常必要的。普洱熟茶作为一种微生物发酵茶,具有明显的抗炎、抗氧化以及降脂减肥功效。为了探讨普洱熟茶提取物(Pu-er tea extract;PTE)对NAFLD的调控作用是否与机体肠道菌群改变有关,试验以C57BL/6N小鼠作为犬猫的实验动物模型,通过高脂饲料诱导NAFLD,然后通过饮水给予PTE。结果显示,经过为期12周的PTE作用,实验动物体质量显著下降,皮下脂肪及附睾脂肪的质量也显著降低。病理切片显示,肝脏的脂肪浸润明显降低;经酶联免疫吸附试验检测血清中脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)及游离脂肪酸的浓度显著下降;荧光定量测定显示,肝脏中与脂代谢相关基因的表达升高。最后对粪便中的微生物通过荧光定量进行检测,结果显示厚壁菌门、拟杆菌门以及减肥细菌Akkermansia都发生了差异性变化。结果表明,PTE对NAFLD的调节作用可能与宿主肠道菌群的改变密切相关,为进一步研究PTE治疗及预防临床宠物的NAFLD奠定基础。     

引起驴驹腹泻的致病性大肠杆菌的分离鉴定

为了探究导致黑龙江省齐齐哈尔市某驴场驴驹暴发腹泻的原因,试验通过流行病学调查、临床检查、病理剖检及H.E.染色、病原菌分离培养及鉴定、16S rRNA PCR检测、小鼠致病力试验及抗生素敏感性测定等方法进行研究。结果表明：该驴场有100多头4月龄以下的驴驹表现严重腹泻,排黄色、水样粪便,其中有45头驴驹死亡,死亡率为32.14%,流行病学调查了解到该驴场更换了价格低廉、质量低劣的饲料且饮用水温度较低,仅为10℃;患病驴驹体温39.5℃,心律失常,心率加快,45次/min;腹腔内充满红色液体,各脏器组织均可见出血点、肿胀、易碎;脏器组织结构明显紊乱,可见大量炎性细胞浸润;在脑心浸液琼脂培养基上可观察到大量白色、潮湿菌落;病原菌16S rRNA PCR扩增得到大小约为160 bp的目的条带,分离菌与大肠杆菌序列的同源性为99.98%,将其命名为CEG-GZL20。CEG-GZL20可导致小鼠发生与腹泻病驴驹相似的临床症状和病理变化;CEG-GZL20具有较高耐药性,仅对青霉素和氨苄西林敏感。说明该驴场暴发的驴驹腹泻主要是由大肠杆菌CEG-GZL20感染所致,且该菌对多种抗生素耐药,可选择青...     

基于肠-乳腺轴浅谈奶牛“内源性乳腺炎”的病理机制及防控措施

乳腺炎是奶牛尤其是高产奶牛最常见的多发病,是危害奶业生产的头号疾病。通常认为,乳腺炎是由细菌等病原微生物通过乳头进入乳腺引起的局部炎症反应,由于该病病因复杂,致病途径及发病机制尚未完全阐明,这也导致临床上对乳腺炎的防制除了抗生素外,尚没有其他较好的对策。因此,弄清乳腺炎的致病途径、丰富发病机理、寻找防制新途径,已成为破解奶牛养殖业健康发展瓶颈的重大需求。基于乳腺炎常伴发或继发于前胃疾病、靶向乳腺局部防制效果有限的临床现象,依据肠道菌群紊乱可损伤肠黏膜屏障、肠内细菌及其代谢物可迁移至肠外远端器官的病理机制,结合本课题组前期研究发现,在没有外界病原微生物感染的情况下,瘤胃菌群紊乱可导致致病菌及代谢物易位至乳腺,引起乳腺炎。本课题组提出“内源性乳腺炎”病理概念,认为“内源性乳腺炎”的病理机制是以肠-乳腺轴这一介导途径为基础的。并提出基于致病途径将乳腺炎分为外源性乳腺炎和内源性乳腺炎的新的病因学分类方式。乳腺炎这一新的病理学概念的阐明和分类方式的建立,或许将是更深入认识和破解乳腺炎发病机制与防制难点的关键所在。     

胆酸对LPS诱导小鼠乳腺炎的保护作用及其机制

乳腺炎是危害奶牛养殖业最为主要的疾病之一,严重制约着奶业的健康发展。抗生素作为乳腺炎的主要治疗药物,易造成细菌耐药性等问题。因此,寻找安全有效的方法或制剂替代抗生素对于乳腺炎的防治具有重要意义。胆酸(cholic acid, CA)作为机体的天然代谢产物,报道具有抑菌抗炎功能。本研究旨在探讨CA对脂多糖(LPS)诱导小鼠乳腺炎的保护作用及机制。将40只分娩后的BALB/c母鼠随机分为5组,包括空白对照组、LPS造模组、LPS+CA(10 mg/kg)组、LPS+CA(20 mg/kg)组和LPS+CA(30 mg/kg)组。通过对小鼠乳腺组织进行病理学观察、炎性细胞因子及相关信号通路检测等方法探究CA对LPS诱导小鼠乳腺炎的保护作用及机制。结果显示,CA呈剂量依赖性地改善LPS诱导小鼠乳腺组织病理损伤,显著降低髓过氧化物酶(MPO)活性和炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的表达。进一步研究表明,CA显著抑制了LPS诱导的NF-κB信号通路激活,增加了法尼醇X受体(FXR)的表达。结果表明,CA通过上调FXR受体表达,进而抑制LPS诱导的NF-κB信号通路及炎性细胞因子产生,发挥对乳腺炎...     

马垂体中间部机能障碍研究进展

正垂体中间部机能障碍(pituitary pars intermedia dysfunction,PPID)也称为马库兴病,是老龄马属动物常见的内分泌紊乱性疾病之一。澳大利亚昆士兰大学的一项研究表明该疾病在15岁以上马的发病率高达21.2%[1]。该病是由于支配垂体中间部的神经递质多巴胺减少或丧失,引起中间垂体肥大或增生,直到最后形成腺肿或肿瘤。马匹也可因PPID处于免     

奶牛黏附分子MadCam-1基因的克隆及原核表达

原核表达MadCam-1基因、纯化MadCam-1黏附蛋白,并制备其多克隆抗体,为进一步功能研究奠定基础。根据MadCam-1的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术扩增MadCam-1基因片段插入到原核表达载体 pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒 pGEX-4T-1-MadCam-1,转化入E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,以纯化后的融合蛋白为抗原,免疫家兔,获得抗血清。结果表明,重组表达质粒pGEX-4T-1-MadCam-1经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%。表达产物经Western blotting鉴定,结果证实成功表达了分子质量约为50 ku 的蛋白质。纯化的蛋白质免疫家兔后,经ELISA检测多克隆抗体效价为1∶32000。因此,成功获得了奶牛 MadCam-1多克隆抗体,为进一步研究奶牛黏附分子 MadCam-1的功能奠定了基础。