重点区域规模化牧场牛奶源大肠杆菌耐药性研究

本研究旨在调查牛奶源大肠杆菌的分离率和耐药性,以提高药物治疗效率,避免同种药物多次使用导致耐药性,为兽医临床合理有效地使用抗菌药物提供理论依据。在2017—2018年间,本研究从全国11个重点区域52个规模化奶牛养殖场采集2 309份牛奶样本,对奶样进行分离鉴定,并对大肠杆菌分离株进行18种抗菌药物的敏感性试验。分离鉴定结果显示,牛奶源大肠杆菌的总分离率为29.75%,其中贵阳地区分离率最高(52.99%),上海地区最低(9.29%)。药敏试验结果显示,2017年的大肠杆菌分离株对氨苄西林(40.98%)和多西环素(36.63%)的耐药率高,而多黏菌素(0.47%)和美罗培南(0%)的耐药率极低或无耐药性,2018年的大肠杆菌分离株对氨苄西林(25.74%)和链霉素(19.59%)的耐药率高,对亚胺培南和美罗培南未发现耐药;其中18种抗菌药物的耐药率均未超过50%。     

小反刍兽疫病毒芯片式数字PCR检测方法的建立及应用

为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus,PPRV）检测方法,建立了一种芯片式数字PCR（cdPCR）检测方法。根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75 /1疫苗株N基因序列设计1对引物,PCR扩增大小为166 bp片段,构建pMDTM18-N标准质粒并优化反应条件,建立了PPRV N基因cdPCR检测方法,并与实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析。结果显示：当质粒标准品浓度在1.22×（105~102）copies/μL范围时,cdPCR检测方法比普通RT-PCR灵敏度高1 000倍,且稳定性好,特异性强;当标准品浓度在1.22×（105~10-3）copies/μL范围时,cdPCR与RT-qPCR相比具有相同的特异性,但灵敏性比RT-qPCR高100倍;与RT-qPCR 测定结果（13.29±6.74）copies/μL相比,cdPCR的最低检测限更低,约为（0.44±0.14）copies/μL;cdPCR对47份临床样本的PPRV核酸阳性检出率（25.5%）高于RT-qPCR（17.0%）。结果表明,建立的cdPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为预防PPR早期流行提供了一种快速有效的诊断和定量检测方法。