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【研究目的】克隆并分析绵羊regakine-1基因;【方法】肠系膜淋巴结组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化JM109感受态细胞,筛选阳性克隆、测序,并进行序列分析;【结果】克隆的绵羊regakine-1基因与牛的同源性为91%,推测的氨基酸序列信号肽为1 ̄21aa,SCY结构域为29 ̄87aa,结构特征与牛的相一致。【结论】克隆了绵羊regakine-1基因的ORF,并注册GenBank(AccessionEF617337)。 相似文献
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基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了鸡Muslin基因。肌肉组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;克隆的Musclin基因与人、大鼠、小鼠同源性分别为74%,73%,70%,推测的氨基酸序列同源性分别为58%,54%,50%,氨基酸序列含有"KKKR"结构和与小鼠ANP,BNP,CNP蛋白的同源性区域。试验成功克隆了鸡Musclin基因并注册GenBank(EF551041)。 相似文献
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猪链球菌病(Swine Streptococcus)是由多种溶血性链球菌引起的一种急性、发热性人兽共患传染病。主要表现为发热和严重的毒血症状。该病一年四季均可发生,但以夏秋季较为多见。发病时传播迅速,病猪体温骤然升高到41℃以上,病死率较高,对养猪业的发展有较大的威胁。现将一猪链球菌病例诊治情况汇报如下。 相似文献
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基于电子延伸序列,本试验克隆并分析了绵羊鸟苷素基因.从绵羊十二指肠黏膜组织中提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR扩增,PCR产物与pMD19-T载体连接后转化到E.coliJM109感受态细胞,检测阳性克隆并测序.结果表明:克隆的绵羊鸟苷素基因长341 bp,编码109个氨基酸,与人、豚鼠、小鼠和牛的同源性分别为77%7、5%、47%和94%,推测的氨基酸序列信号肽为1~16 aa,整个氨基酸构成一个模域,编码鸟苷素前体蛋白. 相似文献
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【研究目的】旨在探讨CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在仔猪胃肠道中的表达规律。【方法】通过常规RT-PCR检测CCL25/CCR9、CCL28/CCR10分别在15日龄和30日龄仔猪胃肠道不同部位的表达。【结果】CCL25mRNA主要在小肠表达,而CCR9mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,且表达量较高;CCL28mRNA和CCR10mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,并以后段肠道的表达量较高。CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在30日龄仔猪胃肠道中的表达高于15日龄仔猪。【结论】初步得出CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在仔猪胃肠道中的表达规律,并为进一步揭示在其它组织中的表达及它们的生物学作用奠定了基础。 相似文献
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采用EDC一步法将His6多肽分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备两种人工结合抗原KLH-His6和BSA-His6。将制备的KLH-His6作为免疫原,皮下分5点注射免疫6只健康6周龄雌性Balb/c小鼠;首次免疫取KLH-His6(50μg/只)与氟氏完全佐剂(FCA)充分乳化,每只免疫200μL,以后每间隔两周,同法进行第2,3次免疫,用氟氏不完全佐剂(FIA)乳化。每次免疫8 d后尾部采血,以BSA-His6为包被抗原检测抗His6抗体。结果表明,成功制备了His6免疫原,并免疫了小鼠;间接ELISA检测不同时期小鼠抗体效价最高达到1∶8 000,免疫小鼠的抗体效价水平整体呈上升趋势,为His6单隆抗体的制备奠定了基础。 相似文献
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克隆并分析兔CCR10基因.基于电子延伸序列,设计1对克隆引物,兔盲肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR,将PCR产物与pMD19-T载体连接后转化E.coli JM109感受态细胞、检测阳性克隆、测序并进行序列分析.克隆的兔CCR10基因长为723bp,编码由241个氨基酸残基组成的CCR10前体蛋白,三级结构预测表明CCR10具有一个多克隆免疫球蛋白区(PIG-X).克隆的兔CCR10基因与绵羊、人的同源性分别为89.6%、89.9%,推导的氨基酸序列与绵羊、人的同源性分别为94.2%、93.8%,结构特征与绵羊、人的相一致.克隆了兔CCR10基因并注册GenBank(登录号:EU348829). 相似文献