鲤细胞因子多克隆抗体的制备及检测

为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。     

饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响

为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0（对照）、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[（75.25±1.45） g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形态、肠道防御屏障相关基因表达以及肠道内容物短链脂肪酸（SCFAs）含量和肠道菌群的变化。结果显示：1）与对照组相比,添加怀山药对鲤生长性能无显著影响（P>0.05）,但可以增加肠微绒毛密度和完整性,增加杯状细胞数量、肠道黏膜褶皱数量和肠绒毛高度,从而改善鲤肠道组织结构,提高吸收表面积。2）与对照组相比,怀山药组肠道组织过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性增强（P>0.05）,白细胞介素-1β(IL-1β)基因相对表达量显著升高（P<0.05）,转化生长因子-β(TGF-β)、闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白-1(ZO-1)和Toll样受体4(TLR4)基因相对表达量也显著上调（P<0.05）。3）肠道菌群高通量测序结果表明,在门水平上,梭杆菌门、变形菌门和拟杆菌门是鲤肠道的优势类群。与对照组相比...     

阿克曼菌对鲤糖代谢的调控作用研究

[目的]本试验旨在探究巴氏灭活的阿克曼菌（Pasteurized Akkermansia muciniphila，P-Akk）调控鲤（Cyprinus carpio L.）糖代谢的分子机制。[方法]本研究通过不同糖水平（20%、30%、40%、50%葡萄糖）试验，探究鲤（10.5±1 g）4周和8周时胰高血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）分泌及阿克曼菌（Akkermansia muciniphila，Akk）定植的时空变化；在不同糖水平试验基础上，设置40%葡萄糖和三个不同浓度P-Akk（108 cfu/g P-Akk、109 cfu/g P-Akk、1010 cfu/g P-Akk）组，探究添加P-Akk 4周后对鲤（16.38±0.39 g）糖代谢及GLP-1的调控；通过P-Akk孵育鲤原代肝、肠细胞试验，共同探究不同糖水平下鲤肠道Akk、GLP-1对糖代谢的调控机制。[结果]结果显示：（1）随着饲料中葡萄糖含量的升高，鲤血清中GLP-1b含量显著降低（P < 0.05），4周时高糖组鲤肠道GLP-1a、GLP-1b以及肠道内容物中Akk丰度均显著降低（P < 0.05），但8周时无显著性差异（P > 0.05）。（2）P-Akk处理后，鲤血清中葡萄糖、GLP-1含量显著减少（P < 0.05）；中肠绒毛高度、肌层厚度显著增加，GLP-1含量减少，短链脂肪酸含量增加，muc2 mRNA表达水平升高（P < 0.05）；此外，P-Akk上调肝脏中ampk、pi3k、akt及糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量，下调糖异生基因pepck mRNA表达量（P < 0.05）。（3）原代肝、肠细胞孵育结果显示，P-Akk处理肠细胞后GLP-1含量显著减少（P < 0.05），而gpr40的mRNA表达量升高；此外肝细胞中糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量显著升高。[结论]综上，外源添加P-Akk可以缓解高糖饲料引起的血糖升高，维持葡萄糖稳态。[意义]该研究结果可为Akk作为益生菌在水产饲料中的应用提供理论基础。     

无子刺梨的体内外抗氧化活性及化学成分分析

采用DPPH和ABTS自由基清除活性和ROS清除活性测试方法,评价无子刺梨果汁及果渣提取物的体内外抗氧化活性,采用紫外分光光度法分别对果汁和果渣中多酚、黄酮和三萜等主要化学成分的含量进行测定分析。结果表明：果汁提取物对DPPH自由基和ABTS自由基的半清除浓度分别为(17.58±0.48)μg/mL和(56.26±3.07) μg/mL,果渣提取物对DPPH和ABTS自由基的半清除浓度分别为(45.38±0.68) μg/mL和(101.67±1.15) μg/mL,果汁提取物的体外抗氧化活性均强于阳性对照Vc和果渣提取物。果汁提取物和果渣提取物的ROS清除率分别为(84.80±3.40)%和(83.80±3.60)%,表明2种提取物的体内抗氧化活性相当,且均强于阳性对照。果汁中总多酚、总黄酮和总三萜的含量分别为(32.81±0.19)、(29.62±0.06)、(61.88±0.62) mg/g,果渣中总多酚、总黄酮和总三萜的含量分别为(21.66±0.29)、(12.11±0.05)、(15.16±0.22) mg/g,果汁中主要化学成分的含量均高于果渣,并与其抗氧化能力呈正相关关系。     

Effects of dietary Bacillus licheniformis on growth performance,intestinal morphology,intestinal microbiome,and disease resistance in common carp (Cyprinus carpio L.)

Aquaculture International - This study was to evaluate the growth, intestinal morphology, intestinal flora, and anti-infection activity against Aeromonas hydrophila in common carp upon adding...     

两种栽培条件下紫椿嫩叶的营养成分比较

对露地和大棚两种不同栽培条件的紫椿嫩叶的营养成分进行了分析比较.结果显示两种栽培条件下的紫椿嫩叶均含有丰富的营养成分,其中露地栽培紫椿嫩叶中的总糖、蛋白质、可溶性固形物、黄酮、氨基酸和矿质元素的含量均略高于大棚栽培嫩叶中的含量.两种紫椿嫩叶均含有16种氨基酸以及9种矿质元素.其中,天门冬氨酸和谷氨酸等鲜味氨基酸以及药效氨基酸含量丰富,常量元素的分布规律为钾＞钙＞磷＞镁＞钠,具有典型的高钾低钠特征.研究结果表明紫椿嫩叶具有较高的营养和保健价值,且露地栽培紫椿嫩叶的总体营养品质略优于天棚栽培紫椿嫩叶.     

甘露寡糖对罗非鱼肠道菌群的影响

为探究巴氏灭活的阿克曼菌(Akk)调控鲤糖代谢的分子机制,实验通过不同糖水平 (20%、30%、40%、50%葡萄糖)探究体重 (10.5±1.0) g 的鲤4周和8周时胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)分泌及阿克曼菌定植的时空变化;在不同糖水平实验基础上,设置含有40%葡萄糖的3个不同Akk浓度 (10⁸、10⁹和10¹⁰ CFU/g) P-Akk组,探究添加P-Akk 4周后对鲤 (16.38±0.39 g)糖代谢及GLP-1的调控;通过P-Akk孵育鲤原代肝脏、肠细胞实验,共同探究不同糖水平下鲤肠道Akk、GLP-1对糖代谢的调控机制。结果显示, (1)随着饲料中葡萄糖含量的升高,鲤血清中GLP-1b含量显著降低,4周时高糖组鲤肠道GLP-1a、GLP-1b以及肠道内容物中Akk丰度均显著降低,但8周时无显著性差异。 (2) P-Akk处理后,鲤血清中葡萄糖、GLP-1含量显著减少;中肠绒毛高度、肌层厚度显著增加,GLP-1含量减少,短链脂肪酸含量增加,muc2 mRNA表达水平升高;此外,P-Akk上调肝脏中ampk、pi3k、akt及糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量,下调糖异生基因pepck mRNA表达量。 (3)原代肝脏、肠细胞孵育结果显示,P-Akk处理肠细胞后GLP-1含量显著减少,而gpr40的mRNA表达量升高;此外肝脏细胞中糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量显著升高。综上,外源添加P-Akk可以缓解高糖饲料引起的血糖升高,维持葡萄糖稳态。该研究结果可为Akk作为益生菌在水产饲料中的应用提供理论基础。

     

Remote sensing of forest health and vitality: a South African perspective

Commercial forestry plantations are an important and valuable segment of the South African economy and forest managers are required to maximise and sustain forest productivity. However, various factors such as the outbreak of damaging agents are constantly hampering forest health and thus decrease productivity. It is therefore important to detect the presence and spread of these agents within plantation forests, a task efficiently achieved using remote sensing technology. A wide assortment of sensors with varying resolutions are available and have been extensively used for this purpose. This paper reviews the current status of remote sensing of forest health in South Africa by providing insight on the latest developments on the use of the technology in forest plantations. A systematic search was executed on Google Scholar, ScienceDirect^® and EBSCOhost^® databases that identified 627 articles of which 29 made reference to remote sensing of forest health in South Africa. Four key results were found: (1) the latest technology is capable of detecting and monitoring forest health with great accuracy, especially with the adoption of machine learning methods; (2) studies employing remote sensing to characterise forest health have burgeoned since 2006 with even more applying hyperspectral data; (3) most studies were spatially concentrated in the KwaZulu-Natal Midlands region around Pietermaritzburg with only a few over the Western Cape; and (4) the remote detection of pest outbreaks and pathogens have received much attention followed by alien invasive plants and a few studies directed to fragmentation. Present and future partnerships may open up opportunities for exploit- ing remote sensing further; this should address growing expectations from government and industry for more detailed and accurate information concerning the health and condition of South Africa's plantation forests.     

樟叶越桔根优势内生菌对宿主组培苗干旱胁迫生理的影响

为了挖掘樟叶越桔根优势内生真菌二型伞霉的生物学功能,将其回接到宿主组培苗中进行干旱胁迫试验,测定其对宿主组培苗干旱胁迫生理的影响。结果表明：在水分正常的情况下,二型伞霉在植物正常的生长过程中有助于增强过氧化物酶的活性;在干旱胁迫下,接种二型伞霉能够快速且显著地增强植物中过氧化物酶的活性,有利于组培苗迅速调节自身的过氧化氢酶活性;同时,二型伞霉能够快速且明显地增强植物中脯氨酸的含量和可溶性糖的累积。因此,樟叶越桔根中的优势内生真菌二型伞霉能够增强樟叶越桔抵御干旱的能力。     

樟叶越桔嫩枝扦插技术研究

采用L₉（3）⁴正交试验设计方法,对消毒方式、施肥种类、植物生长调节剂的种类和浓度进行樟叶越桔嫩枝扦插试验。结果表明：生根率最高的是No.7（0.5% KMnO₄消毒、50 mg/L NAA处理和0.1%尿素施肥）,其次是No.1（不消毒、50 mg/L NAA处理和0.1%奥西母液施肥）;No.1的根数最多,其次是No.2（不消毒、100 mg/L ABT1处理和0.1%尿素施肥）;No.5（3%乙醇消毒、200 mg/L ABT1处理和0.1%奥西母液施肥）的根长度最长,其次是No.1;新稍高度最高的是No.3（不消毒、200 mg/L ABT3处理和不施肥）,其次是No.1。综合分析可得,No.1（不消毒、50 mg/L NAA处理和0.1%奥西母液施肥）为樟叶越桔扦插的最适条件。