垂直板状PAGE分离鸡血清碱性磷酸酶同工酶分离方法的改进

<正> 引言血清碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的活性测定对诊断畜禽肝、胆和骨骼等疾病具有一定的意义,但因其影响因素和个体差异较大,仅仅依靠血清ALP活性来作为疾病的诊断指标,特别是利用其对病变组织进行定位往往具有局限性。 Pernesh(1969)、Beck(1975)和Smith等(1968)曾对组织中ALP的提取和用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离血清ALP同工酶的方法进行了阐述,但操作比较复杂,条件不易掌握。齐顺章(1980)和邹峰等(1987)亦用PAGE法分别对鸡血清ALP同工     

提高母猪泌乳性能的生理生化途径

猪的初乳和乳是新生仔猪成活、健康生长和发育的关键。本文介绍了哺乳仔猪的生长潜能以及制约因素，猪乳的组成特点和分泌规律。探索了调节和促进母猪乳腺分泌功能、改善乳成分和提高母猪泌乳量的可能途径，以利于断奶前仔猪的生长发育和提高养猪效益。     

不同原则中药组方对中后期蛋鸡生产性能的影响及其机理初探

测定了血清中雌二醇（E2）、胰高血糖素（Glu）、甲状腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）等与蛋鸡生产性能有关的激素,并采集抗凝血测定了抗氧化指标全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、血浆超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）等的含量,以及红细胞（RBC）数量、红细胞压积（PCV）和血浆葡萄糖等血液指标,同时分析了血清抗NDV-HI和抗IBDV抗体水平,以初步探讨不同组方原则的中药方剂影响蛋鸡生产性能机理。结果表明：以调整气血为主的中药方剂对血清E2、T4水平、血清NDV-HI、IBDV抗体水平、红细胞数以及全血GSH-Px和血浆SOD活性都有显著提升作用,并降低血浆MDA含量,而对Glu、T3和血浆葡萄糖和红细胞压积等无明显影响。试验表明：调整气血为主要原则的中药组方对于中后期产蛋鸡的免疫．内分泌系统和抗氧化功能有一定的促进作用,并改善血液运氧能力,从而提高了蛋鸡生产性能。     

黄芪多糖对内毒素诱发大鼠实验性乳腺炎的影响

选取40只SD雌性大鼠使之交配受孕。在确定其怀孕后,30只孕鼠随机分成正常对照组、阳性对照组和试验组,每组10只。试验组大鼠每天按100 mg/kg体重灌喂黄芪多糖(APS),直至试验结束,而对照组大鼠灌喂相应体积的生理盐水(PSS)。孕鼠于产后72 h分别用灭菌PSS和50μg大肠杆菌内毒素经乳头管灌注到大鼠第4对乳腺内。灌注后24 h处死大鼠,取乳腺组织和颈静脉血进行指标测定。结果显示,阳性对照组大鼠乳腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活性,与正常对照组相比显著升高(P<0.05);试验组大鼠乳腺组织中TNF-α浓度、NAGase活性与阳性对照组相比,显著降低(P<0.05)。结果表明,灌喂APS可以抑制乳腺组织内炎性细胞因子TNF-α的过度释放,对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的保护作用。     

两种病原菌联合诱导大鼠实验性乳腺炎研究

为深入研究奶牛乳腺炎提供一个更方便、经济的实验平台,试验建立了由金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型。分别用低浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×105mL-1,L组)和高浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×1012mL-1,H组)细菌混合液,经乳头管灌注到大鼠第4对乳腺内,诱导大鼠的乳腺炎试验。结果表明,低浓度组(L组)乳腺的病变主要以腺泡上皮发生轻度脂肪变性,腺泡腔的分泌物中有透明滴状物为主要特征,高浓度组(H组)的乳腺腺泡结构破坏严重,腺泡中有较多的嗜中性粒白细胞浸润。L组乳腺组织IL-6水平较对照组有所升高,H组则有显著(P<0.05)下降,试验组血清IL-6水平均极显著(P<0.01)低于对照组;L组和H组乳腺组织TNF-α水平分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组,血清TNF-α水平均极显著(P<0.01)低于对照组。试验组乳腺NAGase活性均显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组;试验组血清NAGase活性均低于对照组,其中H组极显著(P<0.01)下降。由上述结果可知,高低浓度的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型均已成功建立。     

猪乳中一组高分子量多态性蛋白质的同源性鉴定

 利用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析和阴离子交换层析等方法从猪乳中分离纯化高分子量蛋白质B (HMWP-B)。 制备兔抗HMWP-B的多克隆抗体，免疫印迹结果表明，不同带型的HMWP之间存在免疫交叉反应，说明该组蛋白具有同源性，为其多态性假说提供了证据。     

面筋蛋白的胃蛋白酶酶解物对大鼠免疫功能的影响

选用 5 0只SD大鼠 ,分为试验组和对照组 ,每组 2 5只 ,试验组用经氯化钠缓冲液洗涤法制备的面筋蛋白的胃蛋白酶酶解物灌喂 ,对照组灌喂未经酶解的面筋蛋白 ,连续灌喂 2 1d。实验结果显示 :与对照组相比较 ,大鼠胸腺和脾脏相对重量分别上升了 2 0 % (P <0 0 1)和 2 9% (P <0 0 1) ;腹腔巨噬细胞吞噬活性上升了 12 % (P >0 0 5 ) ;淋巴细胞转化实验中刺激指数 (SI)提高了 33 0 % (P <0 0 5 ) ;血清NDV (新城疫病毒 )抗体血凝抑制效价 (HI)上升了 38 5 % (P<0 0 1) ;肠腔sIgA水平提高了 2 8 6 % (P <0 0 5 ) ;血清IL 2水平上升了 38 4 % (P <0 0 1) ;血清瘦素、胰岛素、T3 和T4水平均无显著变化。实验结果提示 :灌喂面筋蛋白胃蛋白酶酶解物能够增强机体免疫功能 ,并且这种免疫增强作用与细胞因子的调理有较为密切的联系。     

肌注重组猪生长激素在血液和组织中的残留

16头体重为50 kg左右的去势公猪长大(长白×大约克),随机分为对照组和试验组各8头.试验组连续4周肌肉注射重组猪生长激素,剂量为每天4mg/头,对照组肌肉注射等量生理盐水.连续注射四周后,分别在停止注射12h、第2天、第3天、第5天、第7天按15min间隔,连续4h采集血液样品;第5周屠宰取肝脏、背最长肌、半腱肌样品冷冻保存.结果表明猪肌肉注射重组猪生长激素21d后与对照组相比平均体重增加3.6kg;停止肌肉注射重组猪生长激素12h时,猪血清中生长激素(GH)与对照组相比无明显差异,停止注射2d时试验组血清中GH水平显著增加,停止注射重组猪生长激素3,5,7d后血清中GH与对照组相比无明显差异.猪停止注射重组猪生长激素7d时,试验组肝脏中GH水平和对照组相比无明显差异,同时试验组和对照组背最长肌和半腱肌中GH水平也无明显差异.由此可知猪连续肌肉注射重组生长激素28d,停止注射7d时,肝脏和肌肉组织中生长激素水平未见明显增加,可以推断肝脏和肌肉组织中重组生长激素无残留.     

猪乳中一组高分子量蛋白的多态性及其与繁殖性能关系的研究

采用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶不连续垂直板电泳 (SDS PAGE)对 16 2头二花脸母猪乳中一组高分子量蛋白质 (HMWP)进行了检测 ,计算了该位点的基因型频率、等位基因频率和遗传多样性指数等 ,并运用线性模型统计方法分析了该位点的不同基因型与母猪繁殖性能的关系。结果表明 ,在二花脸猪种群 ,乳中HMWP存在B(M :11480 0± 40 0 )和D(M :10 140 0± 6 0 0 )两种带 ,分别受二个等位基因HB 和HD 控制。BB、BD和DD三种基因型频率分别为 0 6 6 6 7、0 2 716和 0 0 6 17,两个等位基因HB 和HD 频率分别为 0 80 2 5和 0 1975 ,遗传多样性指数为0 3170。在三种HMWP基因型中 ,不同基因型母猪的繁殖性能在活仔数和窝重上存在着显著差异 (P <0 0 5 ) ,但在初生仔猪个体重和 2 0日龄窝重上未达到显著水平 (P >0 0 5 )。     

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎的作用

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),对照组于产后0h左后腿胫骨前肌内注射0.01mol/L、pH7.2 PBS100μL/只;试验组肌注CpG-DNA 200μg/只。产后72h经乳头管灌注2×1012CFU/mL金黄色葡萄球菌各100μL/侧到第4对乳腺(两侧)内。分别于灌注前0h,灌注后8、16、24、48和72h(n=6)颈静脉放血处死。结果显示,乳腺组织细菌数在灌注后24h上升至最高,CpG-DNA能显著降低8、16和72h的细菌数。IL-2在不同时间点有显著下降,对照和试验组乳腺组织IL-2分别在16和24h下降至最低。TNF-α在24h达最高,CpG-DNA能显著提高0、24和72h乳腺组织TNF-α水平。CpG-DNA能显著提高血清感染后各时间点及乳腺组织0和16h MPO水平。乳腺组织NAGase和白蛋白在24h上升至最高,血清中24h下降至最低。CpG-DNA能显著降低48和72h乳腺组织NAGase活力,并极显著降低8和72h乳腺白蛋白浓度。上述结果显示,CpG-DNA可促进细胞因子的产生,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞和血-乳屏障完整性的损伤,提示CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有一定的保护作用。