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感染性犬2型腺病毒全基因组克隆及鉴定 总被引:13,自引:1,他引:12
以犬 2型腺病毒 (canine adenovirus type- 2 ,CAV- 2 )自然弱毒株 YCA18基因组 DNA为模板 ,经 PCR扩增分别获得其双链两末端 10 13bp(U)和 972 bp(D)的 DNA序列 ,以首尾相接方式克隆入载体 p Poly2 ,获得重组质粒p Poly2 - UD。以 Hind 和 Bst B 双酶切 p Poly2 - UD,回收含载体和部分 U、D的大片段并与 CAV- 2 DNA共转化感受态 E.coli Sure TM,经菌体内同源重组 ,获得含有 CAV- 2全基因组序列的重组质粒 p Poly2 - CAV- 2。后者以 Cla 和 Asc 双酶切 ,释放 CAV- 2全基因组 ,通过脂质体介导转染 MDCK细胞 ,盲传 3代后重复转染 1次 ,4d后 ,出现腺病毒典型病变。细胞上清血凝效价为 1∶ 6 40 ,并可被 CAV- 2抗血清有效抑制。以上结果表明 ,本研究获得了具有感染性的CAV- 2全基因组重组质粒 ,为以 CAV- 2作为重组疫苗载体的系列研究奠定了重要基础。 相似文献
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鸡源霉形体的分离和鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
对乌鲁木齐市2个大型鸡场鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum,MG)、滑液囊霉形体(M.synoviae,MS)感染情况用血清平板凝集试验(SPA)进行了血清抽样调查。结果表明,凝集抗体的阳性率分别为66.92%和35.90%,其中商品鸡场MG和MS的阳性率分别为82.50%和52.50%。从凝似MG、MS感染鸡的气管、肺、气囊、鼻裂和跗关节腔分离到19株分离物。经初步鉴定,分离物均为霉形体属成员。用生化和血清学及其他生物学方法,对这些分离物进行了鉴定。结果6株为MG,3株为MS,其余10株也属于霉形体。 相似文献
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猪伪狂犬病(PR)是危害养猪业重大传染病之一。临床症状随日龄的不同而有很大的差别。初生仔猪可引起中枢神经紊乱、运动失调、麻痹等症状,妊娠母猪可致流产、死胎、木乃伊胎。成年猪多呈阴性感染,可出现呼吸道症状。西方发达国家在20世纪80~90年代相继制定和启动了该病的根除计划,其中基因缺失疫苗及其相应的鉴别诊断方法研制成功并投入使用,使免疫接种成为控制和净化本病最有效措施之一。本研究采用基因缺失疫苗对某伪狂犬病阳性场仔猪零时免疫,观察抗体消长规律及其在控制和净化伪狂犬病中的作用。 相似文献