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将RT-PCR检测为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)阳性的肺组织碾磨、过滤后接种MARC-145细胞,在细胞上连续传代,上清传至第二代后能产生细胞病变。通过RT-PCR方法可以检测到释放在细胞上清中PRRSV RNA。间接免疫荧光试验也能检测细胞内PRRSV N蛋白的表达,表明该PRRSV毒株成功地在MARC-145细胞中分离,命名为PRRSV NN1396株。对NN1396分离株GP5基因进行克隆测序分析,结果表明该毒株与NCBI登录的PRRSV GP5核苷酸同源性为62.9%~98.2%,与PRRSV原型毒株VR-2332的同源性为87.9%,与高致病性毒株PRRSV JXA1同源性为98.0%,通过GP5的遗传进化分析发现所分离的PRRSV为北美型PRRSV,且与高致病性PRRSV分布在同一个小分支上;对部分nsp2基因的测序、比对结果表明,该部分基因与NCBI登录的参考序列VR-2332氨基酸同源性为73.0%,与JXA1的同源性为94.8%。NN1396分离株Nsp2蛋白含有高致病性PRRSV特异的1+29个氨基酸的缺失,此外,在缺失29个氨基酸区域的上游,含有连续19个氨基酸缺失。该PRRSV毒株的分离和Nsp2蛋白部分序列的缺失鉴定,为下一步研究Nsp2部分氨基酸缺失对病毒生物学特性影响奠定基础。 相似文献
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为了提高努比亚山羊繁殖力,研究同期发情技术在努比亚山羊上的处理效果,试验分别采用CIDR+PMSG+PG、CIDR+FSH+PG、孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG 3种方法对努比亚山羊进行同期发情处理。结果显示:CIDR+PMSG+PG、CIDR+FSH+PG方法同期发情率相同,略高于孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG方法,但差异不显著(P≥0.05);CIDR+FSH+PG方法受胎率最好,孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG次之,CIDR+PMSG+PG效果第三,但差异不显著(P≥0.05)。 相似文献
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为了探讨自制秸秆牛粪生物有机肥对桉树林下牧草产量、品质及林下土壤肥力的影响,试验在桉树林下套种桂牧1号杂交象草,在牧草每次刈割后施用不同的追肥处理,结果显示:100%尿素组牧草产量最高,50%尿素+50%自制秸秆牛粪生物有机肥组、100%自制秸秆牛粪生物有机肥组牧草产量次之,不施肥组产量最低(P0.05)。3组的牧草粗蛋白含量差异不显著(P0.05),但均比不施肥组含量高(P0.05),100%自制秸秆牛粪生物有机肥组牧草磷含量最高,不施肥组牧草磷含量最低(P0.05)。在林下土壤肥力方面,100%自制秸秆牛粪生物有机肥组土壤的有机质、速效磷含量、pH值最高(P0.05),尿素组土壤速效氮含量最高(P0.05)。由此可知,自制秸秆牛粪生物有机肥能够一定程度提高桉树林下牧草的产量和品质,改善桉树林下土壤肥力,对其营养元素及生产工艺进一步调整后用于桉树林下农业种植,改善林下土壤肥力生产潜力巨大。 相似文献
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对本实验室所分离的1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株GXYL-1403进行全基因组克隆和序列分析。参考已发表的扩增全长PRRSV序列的13对特异性引物,用RT-PCR方法对病毒基因组进行分段扩增。将扩增得到的PCR片段克隆到pMD18-T载体上,获得的重组质粒经PCR鉴定后进行序列测定。通过软件对所扩增序列进行拼接,获得GXYL-1403的全长序列,并对GXYL-1403进行比较和遗传进化分析。结果表明GXYL1403株基因序列全长为15 018bp,与国内外多株PRRSV毒株进行同源性比较发现,与VR-2332的相似性为89.1%,与TJ、JXA1、HEB1、HUB1、HUB2、TP株同源性达到了97.9%~98.1%。另外,GXYL-1403分离株nsp2蛋白含有高致病性PRRSV特异的1+29个氨基酸的缺失。特别重要的是,在缺失29个氨基酸区域的上游,含有连续20个氨基酸缺失,在下游出现了连续74个氨基酸的缺失。遗传进化分析发现美洲型PRRSV主要分为3个亚群,GXYL-1403跟高致病性PRRSV毒株属于同一分支,证实了GXYL-1403株为美洲型PRRSV毒株。 相似文献
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