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新城疫病毒Ulster株血凝素—神经氨酸酶基因的克隆与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
析城疫病毒Ulster株经SPF鸡胚增殖和超速离心纯化后,以酚-SOS法提取其基因RNA,作为反转录-聚合酶链反应的模板。根据其已发表的F和HN基因核苷酸序列,合成一个长为30mer的寡核苷酸和一对分别长为28、30mer的寡核苷酸分别作为反转录引物和PCR引物。 相似文献
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通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增了新城疫病毒(NDV)F48E8株核衣壳蛋白(NP)基因,并克隆到pUC18中,得阳性克隆pUCNP.应用分子克隆技术,将NP基因导入鸡痘病毒(FPV)转移载体pFG1175-1中P7.5启动子的下游,得到含NDV NP基因的质粒pFGNP1175-1.利用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV疫苗株282E4感染3~4 h的鸡胚成纤维细胞,采用蓝斑筛选方法纯化多次,得到稳定的重组FPV.用狄高辛标记的探针进行斑点杂交实验,结果表明pFGNP1175-1已与FPV 发生同源重组;用抗NDV的SPF鸡的阳性血清进行间接免疫荧光实验,证实重组FPV在感染细胞中表达了F48E8株NP蛋白.该基因两端部分序列与已发表的D26株NP基因对应区域的核苷酸同源性为89.1%,推断的氨基酸同源性则为93.1%. 相似文献
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新城疫病毒Ulster株经SPF鸡胚增殖和超速离心纯化后,以酚-SDS法提取其基因组RNA,作为反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的模板。根据其已发表的F和HN基因核苷酸序列,合成一个长为30mer的寡核苷酸(位于F基因内)和一对分别长为28、30mer的寡核苷酸(位于HN基因两侧)分别作为反转录引物和PCR引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析,出现一条长为1.93kb的特异性条带,与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体pGEM-3Zf(+)中,并经限制性核酸内切酶分析(REA)。RT-PCR和REA结果证实其为新城疫病毒Ulster株的血凝素-神经氨酸酶基因。 相似文献
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不同栽培措施对出口洋葱产量的影响刘伟忠李国平潘耀平吉沐祥刘照亭赵亚夫(江苏丘陵地区镇江农业科学研究所句容212400)洋葱遍及我国各地,近来年来被作为出口创汇农业的蔬菜之一,远销日本、韩国、欧洲部分国家及香港、台湾地区。为了提高出口洋葱的产量和品质,... 相似文献
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新城疫病毒F48E8株血凝素—神经氨酸酶基因的克隆与鉴定 总被引:16,自引:1,他引:15
应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取新城疫苗病毒F48E8株的血凝素-神经氨酸酶基因。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析,长约1.93kb与预期结果相符,将其克隆入质粒载体pGEM-3Zf(+)中,经限制性内切酶分析和Southern杂交证实为新城疫病毒F48E8株的血凝素-神经氨酸酶基因。 相似文献
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7月22日,粤东南澳岛后宅镇14003呈机船,在岛东南外海渔场底拖网作业时,捕获一条特大龙虾。这条特大龙虾身长76厘米,触须长达65厘米,体重达6.6公斤,胸围46厘米。据老渔民介绍和有关海洋捕捞资料显示,捕获这样大的龙虾,不但是南澳这个盛产龙虾的海岛县所罕见,也是我国沿海各地近10年来较为少见的。 相似文献