绵羊肺炎支原体恒温热隔绝式PCR方法的建立

为建立绵羊肺炎支原体(Mo)感染疾病的现场便捷化诊断方法,本研究选择Mo高度保守区域tuf基因设计合成一对特异性引物和探针,建立了恒温热隔绝式PCR(iiPCR)方法并对其特异性、灵敏性进行评价。结果显示,建立的iiPCR方法仅对Mo的典型菌株和其临床分离菌株的DNA呈阳性结果,具有较强的特异性;对Mo基因组DNA的检出下限为24fg/μL,具有较高的敏感性。利用该方法检测临床样品,结果显示该方法可以从临床采集的羊鼻拭子及支气管拭子中检测出MoDNA,对扩增产物的测序表明检测结果具有较高的准确性。本研究建立的iiPCR方法为Mo的检测及其感染疾病的诊断提供了快速、便捷的技术手段。     

牛源马巴氏杆菌的分离鉴定

为了解引起牛肺炎的主要病原,试验从患有肺炎的牛支气管中分离获得一株巴氏杆菌,并对其进行生化鉴定、16S rRNA测序、特异性PCR鉴定及药敏试验。结果表明:分离菌株与马巴氏杆菌(Pasteurella caballi)的生化特性一致;16S rRNA序列与Pasteurella caballi参考菌株ATCC49197的同源性为100%;特异性PCR鉴定为Pasteurella caballi;分离菌株对诺氟沙星、头孢噻吩、四环素等多种抗生素敏感。说明分离菌株为Pasteurella caballi,该细菌同样可以感染牛。     

绵羊肺炎支原体P109'蛋白的分子特征及抗原性分析

为了研究绵羊肺炎支原体P109'蛋白分子结构特征与抗原性,本研究对p109'基因经生物信息学分析,通过PCR对其部分基因片段进行扩增,将其克隆至p ET-32a(+)以构建原核表达载体,诱导后经大肠杆菌表达体系进行原核表达,并通过Western-blot分析该蛋白的反应原性。结果表明p109'基因与殊异支原体编码假定蛋白基因MDIS-01350、猪肺炎支原体黏附相关基因p102及编码P102样蛋白基因mhp217之间具有较高的同源性。重组P109'蛋白以包涵体形式在大肠杆菌BL21(DE3)中成功得到表达;经纯化后的重组蛋白与山羊抗绵羊肺炎支原体全菌血清发生结合反应,表明P109'蛋白具有良好的反应原性,为后期建立绵羊肺炎支原体特异快速诊断技术奠定基础。     

山羊皮下脓肿的病原分离与鉴定

为了解引起山羊皮下脓肿的主要病原,本研究从四川乐至县、金堂县和蓬溪县3个山羊养殖场无菌采集患皮下脓肿病羊脓液样本19份,通过细菌分离培养、生化试验及特异性PCR方法对其病原进行检测和鉴定,并通过药敏试验测定分离病原的药物敏感性。结果显示,PCR扩增法共检测出病原菌19株,其中伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌及化脓隐秘杆菌分离率分别为57.9%(11/19)、26.3%(5/19)及15.8%(3/19);采用细菌分离培养法分离到3种形态不同的病原菌共计17株,其中革兰氏阳性短杆菌经鉴定为伪结核棒状杆菌,分离率57.9%(11/19),革兰氏阳性球菌经鉴定为金黄色葡萄球菌,分离率为21.1%(4/19),革兰氏阳性杆菌经鉴定为化脓隐秘杆菌,分离率为10.5%(2/19),PCR鉴定较细菌分离培养法灵敏度更高。3种病原菌对丁胺卡那、氟苯尼考等多种药物敏感。结果表明,伪结核棒状杆菌是引起该地区山羊皮下脓肿的主要病原,金黄色葡萄球菌和化脓隐秘杆菌同样可引起山羊皮下脓肿,特异性PCR方法较细菌分离培养更为高效、准确。本研究结果可为后续进一步分析其生物学特性,以及四川地区山羊皮下脓肿的综合性防制提供依据。     

成都市宠物犬弓形体血清抗体调查

本研究对成都市宠物犬中弓形体的血清抗体进行了调查。结果表明,成都市宠物犬中抗体总体阳性率达18.1%,说明成都市宠物犬中弓形体的感染普遍,应引起足够的重视。     

乳房炎3种病原菌DNA提取方法比较研究

旨在比较3种DNA提取方法对山羊乳中致乳房炎主要病原菌DNA的提取效果及对PCR检测的影响.将不同浓度的金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠埃希氏菌加入羊乳中,并分别用硅胶膜试剂盒、酚/氯仿法和CTAB/NaCl法等3种方法提取总DNA,比较所获得DNA的浓度、纯度、所需时间和经济成本及对各病原特异性PCR检测的影响.结果...     

动物亲权鉴定的几种方法

本文阐述了DNA指纹、STR、线粒体DNA技术在动物亲权鉴定中的应用原理。分析了这三种方法在动物亲权鉴定中的优点及不足。     

民族院校食品微生物学课程教学模式创新与探索

为了进一步加快专业课程建设,对食品微生物学课程开展教学模式创新改革与实践,遵循以学生为中心和持续性改进的理念,设计完整课程体系,增设课程思政元素;创新课堂教学方法,注重教学实效性;重视实验教学质量,加强能力培养;搭建科研创新平台,注重实践实训;增加考核考查方式,注重效果评价过程化等。通过这些改革取得了较好的教学效果,达到了课程人才培养要求。     

豚鼠染色体核型及带型的研究

用骨髓细胞染色体制备法研究了豚鼠染色体核型及带型。结果表明：豚鼠染色体核型为2n=64,雄豚鼠为XY,雌豚鼠为XX;在常染色体中,亚中着丝粒或近端着丝粒的染色体有14对、端着丝粒的有17对;X染色体为中着丝粒,Y染色体为端着丝粒。所有染色体均能出现明显的C带带型,其中常染色体和X染色体的着丝粒部位被深染,两个臂均为浅染;Y染色体几乎全部深染,极易识别。染色体标本经G显带技术处理后,豚鼠常染色体和性染色体的着丝粒区均浅染,两臂上显示出清晰的G-带带型。Ag-NOR s位于1、19、20号染色体上,Ag-NOR s的众数为3个,分布范围1~6之间,Ag-NOR s具有多态性,在不同的染色体上银染的颗粒大小、深浅度不同。     

结膜支原体研究进展

结膜支原体(Mco)引起的羊传染性角膜结膜炎(IKC)是高度传染性的眼部疾病,在世界多个国家广泛存在,给养羊业造成巨大的经济损失.论文依据国内外的研究进展,从结膜支原体与IKC发生的相关性、分子生物学特征、感染和致病机制、检测方法及疫苗等方面做一综述,从而为结膜支原体的相关研究及该病的防控提供参考.