口蹄疫病毒对树突状细胞感染能力的研究

树突状细胞（dendritic cell,DC）是重要的抗原递呈细胞,本研究发现通过口蹄疫病毒（foot and mouth diseasevir US,FMDV）感染DC细胞后可以有效感染小鼠骨髓来源DC,而且在感染后48h,FMDV对未成熟DC（imDC）的感染能力稍高于成熟DC（mDC）.     

水族箱市场现状调查初探

本文通过对水族箱市场现状调查及对调查的数据进行的分析和研究．指出了销售对象的齐场现状．得出水族箱的未来发展趋势。它将对生产厂家及消费者有一个很好的导向作用。     

口蹄疫病毒2B基因的生物信息学分析及其siRNA真核表达系统的建立

应用RT-PCR方法扩增口蹄疫WLF株2B基因,将其克隆到pMD18-T载体中,测序后进行序列保守性分析和RNA二级结构分析,筛选适合作为siRNA的靶序列。根据siRNA表达载体要求,合成shRNA表达模板,连接到含有U6启动子的真核表达载体中,建立了靶向口蹄疫2B基因的真核表达系统,为进一步研究靶向2B基因的RNA干扰对口蹄疫病毒的抑制作用奠定了基础。     

稳定表达RKIP对新城疫病毒复制的影响

为了研究Raf激酶抑制蛋白（RKIP）对新城疫病毒（NDV）复制的影响,从鸡胚成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增RKIP基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,经PCR、双酶切和测序鉴定,采用Fu-GENEHD法将阳性质粒转染Vero细胞,经G418筛选,有限稀释法获取单克隆细胞株,Western-blotting检测RKIP的表达。利用Real-time PCR测定病毒感染细胞后培养上清的病毒量。结果表明：成功构建鸡RKIP真核表达质粒;转染Vero细胞后经克隆化培养获得稳定表达鸡RKIP的细胞株Vero-RKIP;感染初期,NDV在Vero-RKIP上表现出了更强的复制能力。     

2型猪链球菌强毒株与非致病株胞外蛋白的比较蛋白质组初步研究

为建立2型猪链球菌(S.suis 2)胞外蛋白组双向电泳样品的制备方法,本研究利用双向电泳(2-DE):分离S.suis 2强毒株与无致病株的胞外蛋白,分别得到它们的胞外蛋白图谱.在pH4～pH7范围内采用考马斯亮蓝R350染色法在2菌株的胞外蛋白质图谱中都分别检测出180±10个蛋白点.并且它们的蛋白质分子质量分布基本相似;在所检测到差异蛋白点中,其中有50个蛋白点只存在于无致病菌株中而强毒株中不存在,有52个蛋白点只存在于强毒株中而无致病菌株中不存在,有7个蛋白点在2菌株中的表达量相差5倍以上.我们在强毒株凝胶中挑取了10个差异蛋白点进行质谱分析,通过数据库检索,鉴定了其中的9个蛋白,另外1种与鞭毛蛋白有同源序列.这些结果为研究S.suis2的致病机理提供了蛋白质组学方面的信息.     

单克隆抗体牛型布鲁氏菌乳胶凝集试验的研究

布病是一种严重的人兽共患传染病,其致病因子为布鲁氏菌(Brucella).根据致病性的不同和宿主特异性,将其分为6个生物种:羊型布鲁氏菌(B.melitensis)、流产型布鲁氏菌(B.abortus)、猪型布鲁氏菌(B.suis)、绵羊型布鲁氏菌(B.ovis)、犬型布鲁氏菌(B.canis)、沙林鼠型布鲁氏菌(B.neotomae)[1].     

2型猪链球菌分泌组双向电泳样品制备方法的建立

为改进适用于2型猪链球菌分泌组双向电泳样品的制备方法,本研究将无蛋白细菌培养液培养2型猪链球菌,分别以超滤-冻干法、超滤-冻干-丙酮沉淀法和改良超滤-冻干-三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法富集培养物上清中的细菌分泌蛋白质,通过比较双向电泳的结果优选最佳的样品制备方法.结果证明改良浓缩-冻干-TCA/丙酮沉淀法较为理想,蛋白丢失少、溶解性佳,所得双向电泳图谱清晰,分辨率高.因此,改良浓缩-冻干-TCA/丙酮沉淀法更适用于制备体外培养的2型猪链球菌分泌组双向电泳样品,并可以满足进一步研究的需要.     

NDPKB真核表达载体的构建及其对细胞生长活性的影响

将目的基因NDPKB连接到pEGFP—N1真核表达载体，转染Vero细胞，通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和Westernblotting分析，鉴定构建的pEGFP—NDPKB真核表达载体的正确性；利用生物信息学工具分析预测NDPKB蛋白的三维结构和可能存在的活性位点；MTT试验检测NDPKB对细胞生长活性的影响。结果显示，pEGFP-NDPKB真核表达载体构建成功，在Vero细胞中NDPKB和GFP蛋白能有效地融合表达。在线预测了NDPKB蛋白的三维结构和可能存在的活性位点。MTT试验结果表明，NDPKB对Vero细胞生长活性的抑制率为25．8％，对A549细胞生长活性的抑制率为22．7％。结果表明，NDPKB能够抑制细胞的生长，对细胞的凋亡具有正调节作用。     

IL-10对感染口蹄疫病毒的树突状细胞的影响

树突状细胞(dendritic cells,DC)是机体中重要的抗原递呈细胞,在病毒感染机体后的免疫调节过程中具有重要作用。为研究调节IL-10的分泌是否会影响DC感染病毒后的免疫反应,本研究用FMDV感染DC后发现,IL-10的分泌量可以影响DC在免疫过程中各种细胞因子的表达,故认为IL-10在口蹄疫病毒感染过程中对机体的免疫调节具有重要的影响。