滇水金凤CHI基因的克隆及表达分析

【目的】查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)是花青素合成途径中的关键酶之一。通过克隆滇水金凤(Impatiens uliginosa) CHI基因并对其进行表达分析,进而探究滇水金凤花色形成及变异机理,为凤仙花花色改良及新品种培育奠定了一定的基础。【方法】利用RT-PCR和RACE技术进行基因克隆,利用DNAMAN和MEGA-X软件对所克隆基因的蛋白序列进行同源性分析和系统进化分析,利用qRT-PCR分析CHI基因的表达模式。【结果】克隆得到滇水金凤CHI基因的2个片段,命名为IuCHI1和IuCHI2,其cDNA全长序列分别为741 bp和636 bp。同源性分析表明,滇水金凤CHI基因的氨基酸序列与茶(ASU87415.1)、橄榄(AEO36936.1)等12个物种的序列同源性达到55.99%。系统进化分析表明,滇水金凤CHI1和CHI2均单独成一枝。表达分析表明,在红色滇水金凤中,2个CHI基因在4个花发育时期的表达量均呈逐渐上升趋势,而在白色滇水金凤中的表达量在第3时期最高,在其它几个时期则相对较少。【结论】推测滇水金凤的2个CHI基因为旁系亲缘关系,其在白色花和红色花的4个花发育时期的表达模式显示出一致性。     

含ACC脱氨酶的植物根际促生菌对重瓣百合生长及采后品质的影响

以亚洲型重瓣百合Tiny Double You为试验材料,栽培过程中分别施入9株含ACC脱氨酶的植物根际促生菌(PGPR),以清水为对照,通过测定株高、茎粗、叶面积、乙烯释放量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量等指标,探讨含ACC脱氨酶的PGPR对Tiny Double You生长及采后品质的影响。结果表明,XG菌株对株高、茎粗、瓶插寿命效果最优,分别比对照高5.65%、2.76%、18.18%;F菌株对叶片数及种球品质促进作用最大,叶片数、种球鲜质量、周径分别比对照高7.03%、12.10%、31.71%;G俏W6菌株对MDA含量、POD活性影响最大,凋谢期MDA含量及POD活性分别比对照低55.56%、64.04%;G卡Wa菌株对花期SOD活性的效果最佳,单朵、整株花期分别比对照高20.00%、14.80%,并且能提高SOD酶活性。综合比较来看,XG菌株的处理效果最佳。     

杜松育苗技术初探

一、杜松种子发芽技术试验杜松属于柏科、刺柏属,是我国的稀有树种。垂直分布在800～1200米,喜光,主根长,侧根发达,耐寒、耐旱、耐瘠薄土壤,有极强的抗逆性和适应能力。树体苍翠挺拔,树姿雄伟,形似宝塔。     

铜胁迫对滇水金凤花部发育及生理生化特性的影响

为了解滇水金凤花器官对铜(Cu)的反应,以其幼苗为材料,采用1/2 Hoagland营养液水培法进行试验,测定不同浓度铜胁迫下花部形态、相对含水量、抗氧化酶活性、膜渗透性和金属含量相关指标参数.结果表明:随铜浓度增加,各花部器官逐渐变小,相对含水量不断下降,与对照差异显著;Na+和Fe3+呈先降低后增加趋势;MDA含量...     

滇水金凤LWD基因的克隆及表达分析

WD40是转录因子大家族,具有调节花青素苷生物合成、植物生长发育及非生物胁迫响应等功能,LWD（LIGHT-REGULATED WD）基因是该家族中已知的生物钟调节因子,但目前有关植物LWD基因的报道较少,其功能还有待深入研究。为探究LWD基因对滇水金凤花色的影响,本研究以滇水金凤花器官为材料,采用RT-PCR等技术克隆得到2个滇水金凤LWD基因,分别命名为IuLWD1和IuLWD2,其cDNA全长分别为1041 bp和1032 bp,分别编码347个和344个氨基酸。基本理化性质分析显示,IuLWD1和IuLWD2的GC含量分别为46%和50%,相对分子量分别为38 838.47 kDa和39 029.65 kDa,理论等电点分别为4.71和4.70。IuLWD1和IuLWD2的不稳定指数分别为53.60和52.58,均属于不稳定蛋白;其总平均亲水指数分别为-0.388和-0.366,均为亲水性蛋白。结构域分析显示,IuLWD1和IuLWD2均含有6个典型的WD40-repeat保守结构域,属于WD40超家族。多序列比对发现,IuLWD1和IuLWD2氨基酸序列与牡丹、葡萄及杨梅等氨基酸序列相似度较高。系统发育分析表明,IuLWD1与葡萄和牡丹聚为一支,同源性达85%;IuLWD2与杨梅聚为一支,同源性达90%,然后共同聚类在一支,推测2个基因为旁系亲缘关系。qRT-PCR分析表明,IuLWD1和IuLWD2基因在4种不同花色滇水金凤及其4个不同发育阶段均有表达,均以深红色表达量最高,白色表达量最低,2个基因的表达量均与花色呈正相关,且IuLWD1基因的表达量高于IuLWD2基因的表达量,表明IuLWD1和IuLWD2基因均在滇水金凤花色素苷的生物合成中发挥了作用,且IuLWD1基因对滇水金凤花色形成的调控作用更强。该研究结果为进一步探究滇水金凤花色形成及变异机理、凤仙花花色改良及新品种培育奠定基础。     

滇水金凤黄烷酮3-羟化酶基因(IuF3H)的克隆及表达分析

为探究黄烷酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase, F3H)基因对滇水金凤(Impatiens uliginosa)花色的调控机制。本研究以红色滇水金凤花器官为试验材料,通过RT-PCR及RACE技术分离克隆F3H基因,发现其c DNA序列全长1 104 bp,编码367 aa,故命名为Iu F3H;同时通过氨基酸比对发现其蛋白与其他植物F3H蛋白同源性较高,约为78.91%,说明F3H基因具有较高的保守性;通过进一步克隆其g DNA序列,发现其全长为1 221 bp,其中包含3个外显子和2个内含子。q RT-PCR结果显示,Iu F3H基因在4种不同花色滇水金凤及其不同发育阶段均有不同程度的表达,其中以深红色的始花期表达量最高,粉红色的盛花期表达量最低。本研究结果表明,Iu F3H基因参与了相关色素生物合成,同时可能在滇水金凤花色素合成中具有关键作用,本研究为探讨Iu F3H基因在4种不同颜色滇水金凤中的分子机制提供数据参考。     

黄土高原低效林分改造技术初探

一、区域基本情况神木县黄土丘陵沟壑区占全县总面积的43%,平均海拔1000～1200m,年平均温度8.9℃,极端最高气温38.9℃,极端最低气温-28.1℃,年平均降雨量为440.8毫米。土壤多系黄绵土,土层深厚,土质疏松。二、现有植被状况该区域大多在六七十年代开始营造人工林,首先以小叶杨、刺槐、为主要树种营造用材林和水土保持林。其次还有油松、     

凸尖杜鹃组培快繁体系的构建

通过对凸尖杜鹃(Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.)实生苗的启动与增殖培养,探索适宜凸尖杜鹃的灭菌方法及其启动与增殖培养基配方,以建立凸尖杜鹃的组织培养体系。结果表明,两种杜鹃用0.1%的HgCl2灭菌8 min真菌污染率较低,在此处理下凸尖杜鹃和泡泡叶杜鹃(Rhododendron edgeworthii Hook. f.)的真菌污染率分别为5%和10%;当培养基中的吲哚丁酸(IBA)浓度为0.3 mg/L、玉米素(ZT)浓度为0.01 mg/L时,凸尖杜鹃实生苗的启动率最高,达到80%;当噻苯隆(TDZ)的浓度为6 mg/L时,增殖倍数最高,达到5.32。     

滇水金凤TTG1同源基因的克隆及表达分析

TTG1 (TRANSPARENT TESTA GLABRA1)基因编码具有WD40重复序列的蛋白,是调控植物花青素合成的重要因子.本研究以滇水金凤(Impatiens uliginosa)花器官为材料,采用RT-PCR技术克隆得到滇水金凤TTG1同源基因,其cDNA全长为1038 bp,编码345 aa,命名为IuTTG1.系统发育分析发现,IuTTG1与百脉根聚为一支,同源性达81.84％.通过荧光定量分析发现,IuTTG1在4种不同花色以及4个不同花发育时期的滇水金凤中均有表达,其中以深红色滇水金凤的盛花期表达量最高,白色滇水金凤的始花期表达量最低.本研究结果为进一步探究滇水金凤花色形成及变异机理、花色改良及新品种培育提供科学依据.     

香石竹表型多样性分析及利用

目的研究含ACC脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase)的不同植物生长促生菌对香石竹生长及瓶插特性的影响。方法以香石竹品种Tenie和Master为材料进行盆栽试验,研究接种不同菌株对香石竹生长过程中株高、茎粗、叶绿素相对含量、叶片数、花径和花期以及瓶插过程中鲜质量、叶绿素降解率和叶片凋落的影响。结果(1) 栽培过程中,混合菌株对香石竹生长有一定的促进作用,可显著增加Tenie的叶片数和Master的茎粗,分别较对照高25.0%和6.2%。经SN-2菌株处理后,Master的花期较对照显著延长34.9%。(2) 瓶插过程中,与对照相比,所有菌株都可显著抑制Master的叶绿素降解,且效果最好的为SN-2处理,降解率仅为对照的57.6%。经XG菌株处理后,Tenie和Master的鲜质量减少率显著降低,分别仅为对照的79.0%和43.3%。经XG、F和混合菌株处理后,Tenie的叶片凋落率显著降低;而仅有混合菌株可显著抑制Master的叶片凋落,其凋落率仅为对照的54.4%。结论栽培中施用混合菌株对香石竹促生效果最好,而在瓶插中XG菌株和混合菌株分别对Tenie和Master采后品质的保持效果最好。