苏云金芽胞杆菌毒素蛋白和粘虫颗粒体病毒对甜菜夜蛾中肠围食膜的破坏作用

利用扫描电镜和SDS-PAGE技术研究了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)、粘虫颗粒体病毒(PuGV-Ps)及其增效蛋白(enhancin)对甜菜夜蛾Spodoptera exigua中肠围食膜的影响.电镜观察结果表明,正常的甜菜夜蛾围食膜外壁有韧性,表面较平滑,少皱褶,内壁表面较粗糙,有较厚质感,无孔洞和缝隙;取食PuGV-Ps或增效蛋白后的围食膜外壁皱缩,内壁质薄;Bt单独作用于围食膜同样改变了围食膜结构,但影响程度较小;未发现不同处理对甜菜夜蛾围食膜造成穿孔或裂缝.SDS-PAGE结果表明,取食PuGV-Ps或增效蛋白后,围食膜上150kD蛋白一定程度被降解,27kD蛋白也被部分降解,而29kD蛋白被完全降解;取食Bt后的围食膜上29kD蛋白也被降解.离体降解试验进一步证明PuGV-Ps增效蛋白对甜菜夜蛾围食膜上多种蛋白具有降解作用,甜菜夜蛾围食膜上29kD蛋白是Bt和PuGV-Ps增效蛋白共同作用的靶标蛋白.     

砜嘧磺隆水分散粒剂防除马铃薯田杂草效果研究

25%砜嘧磺隆水分散粒剂对马铃薯田一年生杂草具有较好的防除效果,尤其对阔叶杂草防效优秀。使用量75～175 g/hm2范围内对马铃薯安全。推荐使用剂量为87.5～100 g/hm2,适宜施药时期为马铃薯3～5叶期,杂草2～3叶期。     

苏云金杆菌Bt-8的培养特性及杀虫活性分析

[目的]明确苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Bt-8的菌株生物特征及其杀虫活性,为其工业化生产提供参考.[方法]通过LB培养基培养观察3株苏云金杆菌Bt-8、Bt2671和Bt7-9菌株生长特征,并比较分析其内生质粒和晶体蛋白的种类.发酵培养基培养分离3株菌株的晶体蛋白,通过生物活性测定和国家标准中描述的方法分析毒素蛋白浓度和生物效价及杀虫谱.[结果]Bt-8具有典型的苏云金杆菌培养特征,营养生长后期形成菱形至椭圆形晶体蛋白,但孢子稳定时间较短,容易二次萌发.Bt-8携带24、16、8和7kb4种质粒,大分子晶体蛋白基因主要为cry1Ac和cry1Ab.杀虫活性分析结果表明,Bt-8培养活菌数低于原分离菌株Bt2671,但晶体蛋白代谢量极显著提高(P<0.01),生物效价较Bt2671提高30.4%,对小菜蛾、稻纵卷叶螟和茶尺蠖等多种鳞翅目害虫具有广谱杀虫活性.[结论]Bt-8菌株较原生产菌株Bt2671的生物效价高,产毒素蛋白能力较强,杀虫谱较广,具有开发高含量Bt制剂的潜力.     

稻纵卷叶螟颗粒体病毒亚致死作用对宿主生长、繁殖和生理生化的影响

稻纵卷叶螟颗粒体病毒(CnmeGV)是感染稻纵卷叶螟的专性杆状病毒。明确CnmeGV亚致死作用对稻纵卷叶螟生长发育、繁殖能力和生理生化的影响,为应用CnmeGV防治稻纵卷叶螟提供依据。CnmeGV 1×10⁵ OB/g浓度处理3龄稻纵卷叶螟幼虫10 d后存活幼虫虫体内仍普遍检测到CnmeGV的存在,从而产生亚致死作用。亚致死CnmeGV处理对稻纵卷叶螟的生长发育产生明显影响,主要表现在变态发育的化蛹、羽化和产卵过程,存活个体蛹重减轻了15.95%,羽化率下降了24.81%,产卵量减少41.5%,差异显著。同时雌雄性比从1.11下降到0.82。CnmeGV亚致死处理诱导幼虫能量代谢增强,中肠消化酶中淀粉酶、脂肪酶活性显著提高,而解毒酶中羧酸酯酶活性显著下降,谷胱甘肽转移酶活性显著提高。CnmeGV亚致死作用影响到虫体激素分泌,幼虫体内蜕皮激素、保幼激素水平较对照分别下降了4.59和5.62倍。CnmeGV亚致死处理雌成虫卵黄蛋白含量下降了40.63%,可能是导致产卵量降低的主要因素。     

两个EoNPV毒株对茶尺蠖和灰茶尺蠖的毒力差异

通过确定不同茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus,EoNPV)毒株对茶尺蠖(Ectropis obliqua)和灰茶尺蠖(Ectropis grisescens)毒力水平的差异,为有效提高茶尺蠖病毒的防效提供理论基础.采用浸渍法,测定EoNPV浙江毒株(EoN...     

油菜根际内生真菌PI-020的分离鉴定和定殖促生作用

为挖掘农业微生物资源,分离筛选具有促进植物生长作用的内生菌,采用选择性培养基,通过组织分离法自油菜根系皮层组织分离共生真菌,再以无菌油菜苗根际定殖筛选、纯化,获得油菜根际内生真菌PI-020。通过培养形态学观察和转录延伸因子Tef-1α基因序列分析,明确PI-020为梨形孢属(Piriformospora)真菌,与已鉴定种印度梨形孢(P.indica)同源性达98.87%。分离菌株PI-020能在油菜、辣椒、西瓜、水稻等不同植物幼苗皮层细胞定殖,根际皮层附有典型的梨形厚垣孢子,用特异引物进行PCR扩增,获得梨形孢属特有的84 bp基因片段。PI-020在油菜苗根际定殖可显著促进油菜苗生长,表现出油菜株高增加,根系增长,叶面积增大,叶绿素含量显著提高。800、400倍不同浓度PI-020培养液处理15 d后,油菜苗生长量较对照分别提高70.1%和92.7%。这一研究表明分离的梨形孢PI-020是一株对油菜具有定殖促生功能的内生真菌。     

内生放线菌SR-1102对蔬菜立枯病的防效及其促生作用

试验分析内生放线菌SR-1102对番茄、辣椒立枯病的防治效果及其促生增产作用。结果表明,内生放线菌SR-1102能有效防治蔬菜立枯病,包衣、蘸根、灌根处理蔬菜种子或幼苗,对立枯病的防效在66.81%～83.65%之间,其中包衣处理防效最高。内生放线菌SR-1102对辣椒、处理后番茄发芽无抑制作用,同时能促进蔬菜生长、增加产量,处理后番茄、辣椒增产率分别为10.10%～14.61%、7.67%～13.53%。多地田间试验表明,SR-1102种子包衣对番茄、辣椒立枯病的防治效果分别为76.67%～80.08%、77.81%～81.36%,因此可以应用内生放线菌SR-1102防治蔬菜立枯病的危害。     

不同生育期蓖麻叶片乙醇抽提物对小菜蛾幼虫影响

分别用浸有初果期、盛果期、成熟前期的蓖麻叶片乙醇抽提物的滤纸,测定抽提物对小菜蛾幼虫的嗅觉反应;以上述3种抽提物浸泡过的包荣叶片为试验材料,测定抽提物对小菜蛾幼虫的取食行为及存活率的影响.结果表明:小菜蛾对不同生育期蓖麻叶片抽提物有明显的嗅觉反应,其中,对2龄幼虫的驱避率存80%以上,对4龄幼虫的驱避率在65%以上.不同生育期蓖麻叶片抽提物对小菜蛾的驱避作用不同,初果期的驱避作用较弱,成熟前期的作用相对较强.3种抽提物对小菜蛾低龄幼虫的取食屠有明显的影响,但对高龄幼虫取食量的影响不明显.蓖麻叶片抽提物对小菜蛾取食行为有明显的影响,与对照相比,在处理过的包菜叶片上,小菜蛾取食活动次数和每次取食活动用于取食的时间减少,平均取食间的间隔时间延长.成熟前期蓖麻叶片的乙醇抽提物对小菜蛾幼虫取食行为的影响明显较初果期强.抽提物对小菜蛾幼虫的存活率无明显的影响.     

蓖麻和苘麻叶片粗提物对大棚番茄烟粉虱的作用

在大棚番茄上喷施蓖麻叶片粗提物,每8行喷6行留2行不喷作避难所,或在避难所上再喷苘麻叶片粗提物,观察番茄上烟粉虱成虫和卵的数量变化。结果表明:喷施蓖麻叶片粗提物后,番茄上烟粉虱成虫和卵的种群数量显著下降,成虫和卵的虫口减退率于处理后第2天达最大值,第3天开始下降;在避难所上增施苘麻叶片粗提物,经蓖麻叶片粗提物处理的番茄上烟粉虱成虫和卵的虫口减退率明显提高,且证实每6行处理设置2行避难所,可获得较好的驱避效果。根据上述分析,蓖麻叶片粗提物对大棚番茄烟粉虱具有一定的驱避作用,其有效作用时间为2～3 d。     

黄瓜内生放线菌SR-1102分离及对枯萎病菌拮抗活性

为防治土传病害黄瓜枯萎病提供新的资源,以黄瓜枯萎病病原地健康植株根际分离筛选的内生拮抗菌为研究对象,研究拮抗菌对黄瓜枯萎病的抑菌作用。结果表明:内生放线菌普遍存在于黄瓜幼苗的根、茎、叶等不同组织部位中,不同部位中放线菌数量、种类以根组织中分离量最多,放线菌类群以链霉菌的淡紫灰类群、灰褐类群为主。黄瓜根际分离获得的放线菌株SR-1102,结合形态学观察和16SrDNA测序分析鉴定该分离菌株为娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)。菌株抑菌活性研究结果表明:SR-1102抑菌谱较广,对试验的7种靶标真菌都有较高的抑菌活性,但对不同细菌的抑制作用具有选择性。SR-1102对黄瓜枯萎病菌具有较好的抑制效果,病原菌抑制生长中浓度EC50为0.210 7mg·L-1,是一株对黄瓜枯萎病防治具有应用价值的生防菌株。