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为验证蔗糖密度梯度法检测口蹄疫完整病毒粒子(146S)的特异性,选择pH值6.0、5.0、4.0PBS酸解处理3批提纯后的146S灭活抗原液,并将酸解后样品进行146S检测,发现8至11级份OD259峰值消失,146S含量由酸解前的1.77、6.60、3.67μg/mL至酸解后完全不能检测到。同时对3批不含病毒的细胞液按抗原纯化灭活工艺处理后进行146S检测,结果显示3批细胞液在8至11级份均没有明显吸收峰,而且其OD259值与PBS空白对照OD259值基本平行一致,说明不含病毒的细胞液对检测结果没有明显干扰。试验证明,蔗糖密度梯度法定量FMD病毒液中146S含量具有很好的特异性。 相似文献
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应用ELISA方法判定口蹄疫疫苗毒株血清学相关关系 总被引:1,自引:0,他引:1
在液相阻断ELISA(LPB-E)体系中,用JMS毒株及OZK毒株滴定JMS阳性血清,计算OZK株对JMS株的r值分别为0.71,0.5,0.5,均介于0.4至1.0之间,说明对JMS株来讲,其阳性血清能够很好地中和OZK毒株抗原,能够对OZK毒株提供有效的免疫保护;用JMS毒株及OR毒株滴定JMS阳性血清,计算OR株对JMS株的r值分别为1和0.5,0.5,均介于0.4至1.0之间,说明对JMS株来讲,其阳性血清能够很好地中和OR毒株抗原,能够对OR毒株提供有效的免疫保护;用OZK毒株及JMS毒株滴定OZK阳性血清,计算JMS株对OZK株的r值分别为0.0625,0.0625,0.125,均小于0.2,说明对于OZK株来讲,其阳性血清不能很好地中和JMS毒株抗原,不能够对JMS毒株提供有效的免疫保护;用OZK毒株及OR毒株滴定OZK阳性血清,计算OR株对OZK株的r值均为0.5,介于0.4至1.0之间,说明对OZK株来讲,其阳性血清能够很好地中和OR毒株抗原,能够对OR毒株提供有效的免疫保护。 相似文献
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在国家综合国力提升过程中,国家在水库方面投入的资金越来越多,对水库的运行管护工作也更加的重视。在对小型水库的运行管护工作进行分析中可以看出,管护过程中还存在较多的问题,管护的效果并不是很理想。因此,本文以浅淡小型水库的运行管护对策为题,对管护过程中的问题进行了分析,并提出了自己的看法,阐述了几点对策,以供参考。 相似文献
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口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达 总被引:6,自引:0,他引:6
设计、合成FMDV非结构蛋白3B基因的PCR引物,并在引物5’端和3’端分别加入含BamH I和HindⅢ限制性酶切位点序列。以FMDV基因组PNA为模板,利用RT—PCR技术扩增3B基因,得到的基因片段经BamH I/HindⅢ双酶切后与转座载体pFASTBAC HTa连接,转化宿主菌DH10BAC,在含庆大霉索、卡那霉索、X-gal、IPTC的LB平板上37℃培养24h,提取白色菌落,从中提取重组Bacmid 3B,与脂质体共同转染昆虫细胞8f9,得到重组杆状病毒,病毒经传代扩增后感染High5细胞,表达目的蛋白——FMDV非结构蛋白3B。SBS-PAGE及Westem Blot结果显示,本研究成功构建了Bacmid-3B重组表达载体,并在昆虫细胞中表达了NSP—3B蛋白,该表达产物可与MDV感染的猪、牛血清产生免疫反应。 相似文献
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NSP—ELISA鉴别FMDV感染与免疫 总被引:13,自引:2,他引:13
利用大肠埃希氏菌表达的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC多肽作为抗原,建立了一种可区分FMDV感染与接种灭活疫苗免疫牛的间接酶联免疫吸附试验(I—ELISA)。通过对336份正常牛血清、508份注射疫苗牛血清、60份人工感染牛血清和58份豚鼠免疫血清的检测,确定了血清抗体阴性与阳性效价的临界值。试验证明,该方法简易、快速,灵敏度比VIAA—AGID高。 相似文献