基于实时环介导等温扩增技术快速检测玉米晚枯病菌

为了利用实时环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术,特异、灵敏、快速地检测检疫性病原菌玉米晚枯病菌（Cephalosporium maydis）,本研究选择种间遗传距离较高的Tef-1α和H3基因作为特异性基因,进行特异性引物的筛选、检测温度的优化、灵敏度和特异性检测等研究。实验结果表明,最佳引物组合为Tef-2,检测温度为65℃,最小检测限为0.10 pg/μL,且只对玉米晚枯病菌靶基因特异,检测应用结果可靠。环介导等温扩增技术能够用于玉米晚枯病菌的高效特异性检测,可为检验检疫部门对玉米晚枯病菌的检测工作提供有力的保障。     

玉米弯孢叶斑病菌NADPH氧化酶生物信息学分析和ATMT敲除载体的构建

从JGI数据库玉米弯孢叶斑病菌(Curvularia lunata)基因组中获得2个编码NADPH氧化酶基因ClNox1和ClNox2。采用生物信息学方法对2个基因编码的蛋白质进行性质、结构和功能等方面的预测。结果表明,ClNox1和ClNox2的分子量分别为6.35和6.41 KD,等电点PI为8.87和8.93,不稳定指数为44.50和39.45;ClNox1是亲水性膜蛋白,包含6个明显的跨膜结构域;ClNox2也是膜蛋白,包含8个明显的跨膜结构域。在亚细胞水平上,ClNox1定位于线粒体上,而ClNox2定位于细胞质膜上;在氨基酸序列方面,ClNox1和ClNox2都含有多个苏氨酸、丝氨酸和酪氨酸激酶磷酸化位点;在功能方面,ClNox1和ClNox2都包含NADPH氧化酶特征结构域,并且与Cochliobolus heterostrophus的NADPH氧化酶基因具有较高的同源性。根据ClNox1和ClNox2序列设计特异性引物扩增目的片段,与标记基因NPTII和HphGFP分别连入骨架载体pPZP100,构建完成ClNox1和ClNox2基因的敲除载体pPZP100NPTIIClNox1和pPZP100HphGFPClNox2,为根癌农杆菌介导的遗传转化提供基础材料。     

辽宁省辣椒疫霉菌生理小种的生物学特性及生物制剂对辣椒疫病的防效

为了明确辽宁省辣椒疫霉菌Phytophthora capsici优势小种的生物学特性及生物制剂对辣椒疫病的影响,于2013—2014年在辽宁省辣椒种植区采集样品,采用组织分离法获得33个分离物,对分离物进行单孢子囊纯化鉴定,采用单基因鉴别寄主技术鉴定生理小种,研究了不同培养条件对优势小种生长发育的影响,并测定了生物制剂对辣椒疫病的防效。结果表明,菌株Pc-2、Pc-5和Pc-6等23株菌株为3号生理小种,占分离物总数的69.7%;菌株Pc-2在9种供试培养基上均可生长,菌丝生长最适培养基为燕麦片培养基,最适pH为9,温度为28℃;番茄培养基、pH为10和光暗交替有利于其形成孢子囊;pH为7、温度为5℃以及全光照处理是游动孢子释放的最佳条件;游动孢子萌发受酸碱度和光照的影响均不明显,28℃是其萌发的最适温度;在先灌药后接种处理中肃克对辽椒12号疫病的防效为78.2%。研究表明,3号生理小种为辽宁省辣椒疫霉菌的优势小种,低温促进游动孢子的释放,肃克防效优于其它生物制剂。     

信息化技术在植物保护中的应用探究

现阶段,随着信息技术的广泛普及和应用,人们的生活得到了极大地改变,同时也便利了人们的工作,尤其是在植物保护中,起到了十分关键的作用。在植物保护中,应用信息化技术,对有效提升工作效率、保护植物具有非常重要的现实意义,同时还可以进行动态记录、监督植物生长状态,有利于植物生长。为此,文章对信息化技术在植物保护中的应用进行了深入的研究。