过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

探讨企业税务风险原因分析与制度设计

企业税务风险对企业的后续发展有重要的影响,基于企业税务风险机制的特殊性和复杂性,在实践过程中需要从实际情况入手,及时对税务风险类型进行有效的分析。在本次研究中将以企业税务风险原因为基础,结合具体情况,对制度设计形式进行有效的分析。     

省林草局与省交通厅建立会商机制 落实林草保障政策确保重点交通项目顺利开工

本刊讯战疫不误发展。2月21日,省林草局党组书记、局长刘宏葆及相关局领导和部门负责人,与省交通厅党组书记、厅长罗佳明一行就交通项目林草地占用审批问题进行会商。双方就拟开工3个和在建10个高速公路项目林草地手续办理、重点交通项目“十四五”期林草地使用政策、自然保护地准入审批等问题进行了沟通,初步达成五项共识:一是全面保障交通项目建设使用林草地定额;二是落实疫情防控期林草地使用政策加快推进交通项目占用林草地审批;三是交通项目原则上避开自然保护地,确实无法避让的,采取桥梁、隧道等“无害”化方式穿越;四是大力推进公路绿化景观建设,提升公路整体形象风貌;五是建立厅局会商机制,落实专门处室和人员负责对接具体交通项目,不定期磋商相关工作,解决疑难问题,重点确保国家、省重大交通项目顺利开工。     

昭苏牧区放牧绵羊血清6种常量元素分析

为了解昭苏牧区放牧绵羊常量元素的盈缺情况,分别于春季、夏季、秋季和冬季选取成年母羊和育成母羊各10只,测定其血清及其四季所采食牧草中钙、磷、钾、钠、镁和硫含量。结果表明:该牧区不同季节牧草中所含钙、磷、钾、钠、镁和硫含量范围分别为0.64%～1.17%、0.12%～0.23%、0.54%～1.81%、0.04%～0.05%、0.17%～0.28%和0.23%～0.28%;牧草中钙、钾、镁和硫均可满足放牧绵羊的营养需要;磷存在季节性缺乏,冬季不能满足需要;钠全年缺乏;不同季节放牧成年母羊血清中钙、磷、钾、钠和镁含量范围为117.42～144.26 mg/L、81.07～123.17 mg/L、184.33～215.05 mg/L、3385.60～3590.00 mg/L和21.13～28.88 mg/L;放牧育成母羊血清中钙、磷、钾、钠和镁含量范围为61.13～68.86 mg/L、63.14～128.58 mg/L、204.00～277.33 mg/L、3390.50～3587.50 mg/L和20.58～28.19 mg/L,均处于正常范围。因此,昭苏地区四季放牧绵羊冬季应注意磷的补充,全年需补充食盐。     

寨卡病毒SYBR GreenⅠreal-time PCR方法的建立及应用

为建立一种针对寨卡病毒的快速诊断方法,本研究根据寨卡病毒的3’端保守基因序列,设计合成1对引物,建立了检测寨卡病毒的荧光定量PCR方法。结果显示:所建立的检测方法的Ct值与标准品在1.41×10^1~1.41×10^10^ copies/μL具有良好的线性关系,相关性为1,斜率为-3.502;灵敏性结果显示,该方法的检测限度为1.41×10^1 copies/μL,是普通PCR的10000倍;特异性结果显示,对CHIKV、DENV和JEV无特异性扩增,特异性强;重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于1%,重复性好。本研究建立的SYBR Green I real-time PCR检测方法,可用于寨卡病毒感染的快速诊断。     

全面封控隔离野生动物驯养繁殖场所

为贯彻落实中、省、市关于加强新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控工作精神,遂宁市林业局切实开展联防联控工作,对全市野生动物驯养繁殖场所进行拉网式排查,并全面实施封控隔离。同时,暂停在外开放风景名胜区、森林公园等自然保护地7处。高度重视,落实责任。在中、省、市疫情防控工作会召开会,市林业局立即启动疫情防控工作,成立了遂宁市林业局应对新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控工作领导小组,实施疫情防控值班制度。     

“中国人工林培育”国家级精品视频公开课的建设

视频公开课是本科教学工程的重要建设内容,为大众提供了一个崭新的学习平台。"中国人工林培育"作为入选课程,依靠学校的政策支持和团队的共同努力,顺利完成了该课程教学内容的建设。从"中国人工林培育"课程的建设过程和引发的思考2个方面分析、介绍了该课程建设背景、课程特色和预期目标、教学内容设计、课程视频拍摄和后期制作等,并分享了该课程建设的体会,希望对其他精品视频公开课的建设提供借鉴和参考。     

兔皮肤霉菌病防治措施

正毛兔、肉兔、獭兔易感家兔皮肤霉菌病,四季均可发病。幼兔、哺乳母兔比成年兔易感。一般情况下该病不引起兔直接死亡,但会导致兔生长速度减慢、抗病力下降,可继发其他疾病,引起兔死亡率大幅上升。家兔皮肤霉菌病临床上多表现为毛囊损害、脱毛等一系列症状。一、传播途径当兔场内有病原存在时,非繁殖期母兔一般不表现病症,只是在繁殖期间,母兔乳腺发育,利于真菌繁殖,从而在母兔乳房周围形