赖氨酸修饰对梯棱羊肚菌黑色素结构和理化特性的影响

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,本试验采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化研究。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、理化性质及稳定性研究。结果表明,在NaOH浓度为1.54 mol/L,纤维素酶添加量为20 mg/g,纤维素酶酶解时间为78.6 min,料液比为1:30,酶解温度为40 ℃,超声时间为80 min条件下提取的梯棱羊肚菌黑色素最优。未修饰的梯棱羊肚菌黑色素不溶于水,色价值为480.24,修饰后的黑色素溶解度为1 016 g/L,色价值为1 771.18,比未修饰的黑色素在溶解性、色价值方面均有所提高。此外,在不同的温度、光照、pH条件下,修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素均比较稳定。以上研究结果为梯棱羊肚菌黑色素的高效提取及其产品的开发利用奠定了理论基础。     

漏缝地板发酵床对育肥羊养殖气体排放的影响及微生物学机理

为明确漏缝地板发酵床对育肥羊养殖过程氨(NH₃)和温室气体排放特征的影响机制,本研究设置地面和漏缝地板发酵床两个试验处理,测定分析了育肥羊养殖过程NH₃、氧化亚氮(N₂O)、二氧化碳(CO₂)和甲烷(CH₄)的排放特征,并采用宏基因组学解析了影响上述气体排放的微生物学机理。试验结果表明,与地面相比,漏缝地板发酵床能够显著降低育肥羊养殖过程的NH₃排放(P<0.05),其NH₃排放速率为21.64～58.92 mg·m^-2·h^-1,NH₃累积排放量为86.36±1.06 g·m^-2,减排率达58.60%。漏缝地板发酵床同样也能显著降低育肥羊养殖过程的CH₄排放速率(P<0.05),其CH₄累积排放量为26.66 g·m^-2,减排率可达64.42%。然而,漏缝地板发酵床会使得...     

基因表型诱导剂对黄瓜生育及产量和品质的影响

在保护地栽培条件下,以清水浸种和嫁接黄瓜为对照,进行了不同浓度的基因表型诱导剂浸种对比试验.结果表明,适宜浓度的基因诱导剂浸种能够在一定程度上控制黄瓜茎的纵向生长,使其茎的横向生长、叶和根的生长明显加快,根系活力明显增强,壮苗指数和G值有所提高,第1雌花节位明显降低,雌花节率和坐果率显著提高,采收期提前1～8d,前期产量和总产量均显著提高;以浸种浓度为1:100的处理最为适宜,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产40.6%和20.6%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产63.8%和18.1%:浸种浓度为1:70的处理次之,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产35.0%和15.8%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产54.2%和10.9%.同时,诱导剂浸种还可明显提高黄瓜干物质、可溶性糖和VC的含量,改善黄瓜品质;但诱导剂浸种的浓度过高或过低均不利于诱导效果的提高.     

日粮不同蛋白质水平对三元肥育猪生产性能和胴体品质的影响

本文旨在研究不同日粮蛋白质水平对三元肥育猪生产性能、血液参数、胴体性状和肉质性状的影响.试验选取36头杜长大三元杂交猪,体重约为(47±4.2)kg,随机分为3个处理,每个处理12个重复,各处理分别饲喂低(12.9%)、中(15.4%)、高(18.7%)3个蛋白质水平日粮.试验第46天后,分别检测血液生化指标、激素水平、胴体品质和肉质性状.结果显示,3个日粮蛋白质水平对日增重、采食量、料重比及胴体品质和肉质性状均无影响(P>0.05);血清碱性磷酸酶、低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清尿素氮以及生长激素均以中蛋白质水平组最高;随着日粮蛋白质水平的增加,肥育猪血清胰高血糖素有降低的趋势(P=0.089).以上结果表明,日粮蛋白质水平降低到12.9%并不影响肥育猪生长性能、胴体品质和肉质性状.     

1985-2020年河南省育成大豆品种亲缘分析及骨干亲本挖掘

为给大豆育种选配亲本提供参考依据,对河南省1985-2020年育成的132个大豆品种进行系谱追溯,系统分析其育种方式、亲本组成、细胞核、细胞质遗传贡献率,并归纳骨干亲本.结果表明:常规杂交是河南省大豆品种选育的主要途径,占参试品种的85.5％.132个品种共有185个细胞核遗传的原始亲本,核遗传率最大的祖先亲本是齐黄1...     

烟草丛顶病毒RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)介导的体外复制体系

通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMALC2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp。0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP-RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17%;经亲和层析纯化的MBPRdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3'末端序列,催化体外复制;对正负链的3'末端的体外复制效率存在差别,识别负链3'末端的体外复制效率明显高于正链3'末端。本研究创建的TBTV RdRp介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础。     

Expression of natural killer cell stimulatory receptor NKG2D and its ligand MICA in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau

AIM: To investigate the expression of natural killer cell stimulation receptor D(NKG2D) in peripheral blood and the expression of major histocompatibility complex class I chain-related protein A(MICA) on the gastric carcinoma tissue and the neighboring non-cancerous tissue in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau. METHODS: Samples of 33 patients and 20 healthy persons were collected to detect NKG2D in peripheral blood by Flow cytometry analysis. The expressions of MICA in part of the correspondent tissues were examined by RT-PCR and immunohistochemistry.RESULTS: The expression of NKG2D in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer group (13.47 ±5.26)% was significantly lower than that in healthy groups (32.62±10.08)%. The mRNA level of MICA in gastric cancer was significantly higher than that in neighboring non-cancerous tissue (P<0.05). The expressions of MICA proteins showed a significant difference between the neighboring non-cancerous tissue (21.21%, 7/33) and the gastric carcinoma tissue (78.79%, 26/33), between the high differentiation (60.00%, 3/5) and the moderate (72.73%, 8/11), low differentiation (88.24%, 15/17). The expressions of MICA were not correlated with tumor size, sex, age, lymph node metastasis of the patients (P>0.05). Spearman rank correlation displayed that the expressions of MICA mRNA were positively correlated with the MICA protein level (r=0.903, P<0.01).CONCLUSION: The immune escape in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau probably relates to the down-regulation of NKG2D and the up-regulation of its ligand MICA. The activity of NK cells and the anti-cancer cellular immunity level are descending in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer. The decrease in the receptor NKG2D is a reason for the activity of NK cell descending.     

贵州省辣椒炭疽病病原鉴定及协同增效药剂筛选

以采自贵州省贵阳市和遵义市的辣椒炭疽病病样为试材,采用组织分离法分离病原菌,依照柯赫氏法则确定病原菌的致病性,根据菌株形态特征及rDNA-ITS序列分析鉴定,研究引起贵州省辣椒炭疽病的病原;采用菌丝生长抑制法,研究了致病菌株对甲基硫茼灵等11种原药和10％苯醚甲环唑等6种成品药的敏感性,从而在此基础上选择不同作用机理的药剂组合复配,测定抑制活性.结果 表明:结合形态学及分子生物学确定其为辣椒炭疽病菌,分别为尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)、斯高维尔炭疽菌(Colletotrichum scovillei)和疑似新种(Colletotrichum sp.);经敏感性测定,所选药剂对菌株均有一定程度的抑制作用;咪鲜胺、双苯菌胺、唑胺菌酯、戊唑醇等4种原药对3株辣椒炭疽病菌药效比较稳定,抑制效果较好;辣椒炭疽病菌对22.50％啶氧菌酯和10％苯醚甲环唑2种成品药剂的敏感性较高,EC50值分别为1.60 mg·L-1和2.12 mg·L-1;戊唑醇与吡唑醚菌酯3∶1和1∶1复配时,SR分别为1.7453和2.0611,1∶1时增效效果最好.啶氧菌酯与咪鲜胺1∶3、1∶1和1∶5复配时,SR分别为1.7234,1.6611和1.6585,1∶3增效效果最好.综上所述,引起贵州省辣椒炭疽病的病原菌有GY-1尖孢炭疽菌(C.acutatum);ZY-1斯高维尔炭疽菌(C.scovillei);ZY-2疑似新种(Colletotrichum sp.).     

简单异尖线虫肌钙蛋白类过敏原基因的克隆表达及免疫特性分析

为研究简单异尖线虫肌钙蛋白类过敏原的免疫特性,本研究提取了线虫总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增肌钙蛋白类过敏原(Anis1)基因,克隆入pMD18-T载体,测序正确后将anis1基因亚克隆入带有组氨酸标签的表达载体pET-30a,转入大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导,表达目的蛋白。通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,融合蛋白采用Western blotting分析。将纯化的Anis1重组蛋白免疫小鼠,分离血清,ELISA检测不同时期血清抗体效价。酶切和DNA测序结果显示重组质粒构建成功,并诱导出重组Anis1蛋白,重组蛋白经Western blotting分析证实为目的蛋白,纯化蛋白Anis1免疫小鼠后,与对照组相比,能产生较高的抗体水平。Western blotting分析显示,重组蛋白Anis1能被免疫血清识别,说明简单异尖线虫重组蛋白Anis1具有较好的免疫原性和免疫反应性。     

斑点叉尾鲴嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定及系统发育分析

从发生在四川、重庆等省市的斑点叉尾妇急性流行性传染病病鱼的肝脏、肾脏内分离到1株高致病性菌株（CCF00024），人工感染健康鱼表现出与自然痛鱼相同的症状，并从中分离获得同种细菌，证实其为斑点叉尾鲴急性流行性传染病的病原菌。形态、生理生化检测表明，该菌为非发酵型直杆菌，严格需氧，革兰氏阴性，极生多鞭毛，对除麦芽糖和甘露糖以外的多种糖类不利用产酸，氧化酶阴性，DNA酶、蛋白酶、脲酶、赖氨酸脱羧酶阳性，MR、VP阴性。在以该菌16SrDNA序列（GenBank登录号AY970826）和GenBank及RDP数据库内同源性较高的细菌16SrDNA序列构建的系统发育树中，分离菌CCF00024与嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonasmaltophilia）聚在一簇，特剐是与5．maltophiliaM5—1的同源性最高，序列相似性达99．6％，结合形态和生理生化特点将其鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonasmaltophilia）。药敏试验结果表明，对磺胺甲口恶唑、磺胺异口恶唑、阿齐霉素、洛美沙星高度敏感，而对新霉素、卡那霉素、氨苄青霉素、头孢唑啉、先锋霉素V和链霉素不敏感。