诱导子对茶条槭悬浮细胞核酸酶的激活研究

为揭示真菌诱导子诱导茶条槭悬浮细胞发生凋亡的原因,以茶条槭悬浮细胞为材料,采用细胞形态观察、基因组DNA电泳分析以及核酸酶活性检测等手段,研究了真菌诱导子对细胞发生凋亡的影响。结果表明真菌诱导子处理的细胞,其形态结构发生变化,DNA降解成呈梯状的条带,且检测到分子量大约为50、40、41、38、34 kD的核酸酶。通过这些结果说明,茶条槭悬浮细胞在真菌诱导子诱导下发生细胞凋亡,并伴有特异核酸酶被激活。     

水曲柳FmAG基因克隆及生物信息学分析

AGAMOUS(AG)基因是调节植物开花的基因。本研究根据水曲柳转录组数据筛选出与开花相关基因,通过RT-PCR方法扩增,得到水曲柳AG基因序列,命名为Fm AG,并利用生物信息学手段对获得的序列进行结构及功能预测,结果表明,水曲柳AG基因编码区全长726 bp;蛋白质分子量为27 913.51,具有典型的MADS-box结构域和K-结构域,是一个无信号肽、无跨膜区、亲水性、不稳定蛋白,二级结构由148个α-螺旋组成,系统进化树分析显示该蛋白与Fraxinus nigra、Fraxinus pennsylvanica的AG同源蛋白亲缘关系最近,进一步确定所获得的序列为AG基因。本研究为今后通过基因调控分子育种和促进水曲柳优树种源有性繁殖奠定基础。     

改进的一步法提取昆虫总RNA

用修改了的异硫氰酸胍法从两种森林昆虫Clostera an-astomosis和Saperda populnea的不同组织中快速提取总RNA。电泳检测和cDNA合成分析结果表明,RNA未降解。经紫外分光光度计检测,A260/A280在1.8到2.0之间,表明RNA的纯度很高。用RT-PCR合成的双链cDNA的长度大于2kb,表明mRNA的完整性。用PCR的方法克隆了C.anasto-mosisβ肌动蛋白和几丁质酶的基因片段,表明RNA可用于其它分子操作。使用这个方法,在4个小时内可至少从8个样品中提取RNA并进行电泳分析。这些结果表明用这个修改后的一步法提取昆虫总RNA是省时,省钱和有效的。图3参10。     

水曲柳SOC1基因表达载体的构建及生物信息学分析

为研究SOC1开花调控关键节点基因在水曲柳花时调控中的作用,从水曲柳中克隆获得了SOC1的编码区全长,序列分析表明:SOC1基因长654 bp,编码218个氨基酸,与金鱼草MADS-box转录因子DEFH68基因序列相似性最高,核苷酸相似性为78%;水曲柳SOC1具有MADS-box结构域和K-结构域,同时具有DNA结合位点和磷酸化作用位点,属于MADS家族转录因子。同时利用双酶切法成功构建了水曲柳SOC1基因植物表达载体pROKⅡ-35S∶∶SOC1。     

昆虫抑咽侧体神经肽功能及作用机制

回顾了近年来研究较多的昆虫咽侧体神经肽(AS)功能及作用机制方面的新进展。相关研究认为,大多数AS抑制CA对JH的合成。在JH的合成途径中,AS的抑制作用发生在JH生物合成的第一步,cAMP可能是其第二信使。但有些A型的AS对源昆虫的CA没有作用,这可能是在这些昆虫中存在另一个抑制JH合成的机制,包括完全不同类型的AS及第二信使等。一种昆虫中多个A型的AS成员基本上来自一个单一的多肽前体,这些成员可能作用于不同亚类的受体。A型的AS可能通过抑制对卵黄蛋白原的合成或吸收来抑制直翅类昆虫卵巢的发育,这个作用也可能与抑制CA对JH的合成有关。AS能抑制前肠、中肠、后肠肌肉的收缩,导致昆虫厌食、生长延迟、死亡率上升等现象,此外,还能抑制心脏、背血管和输卵管等器官中肌肉的收缩。AS对肌肉收缩的抑制的作用可能由一个Gi蛋白受体介导,且这类受体与AS抑制CA活性时的受体可能完全不同。     

钾肥对白桦生理特性及三萜含量的影响

为了研究钾肥对白桦防御酶及三萜含量的积累,从而建立生产三萜为目的的白桦栽培技术,建立钾肥调控三萜合成体系,以2年生白桦幼树为试材,通过施加高（15 g/盆）、中（10 g/盆）、低（5 g/盆）3种钾肥（KCl）对白桦进行处理,分析白桦叶片总三萜积累变化,同时对相关抗逆酶进行检测。结果表明,施用钾肥能够不同程度地提高白桦叶片中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）以及过氧化物酶（POD）的活性,并使叶片中可溶性糖含量增加,其中以中浓度钾肥效果最好,可使三萜含量达42.16 mg/(g?DW)。在生长旺盛季节7-9月（哈尔滨）,对白桦实施中浓度钾肥,可有效促进白桦叶片中三萜含量的积累。     

农杆菌介导外源基因转化及整合机制的教学探讨

从学生的实际情况出发,针对“农杆菌介导外源基因转化及整合机制”这部分教学内容抽象、枯燥、难于理解的特点,从结合最新研究进展、整合模型讲授、实施研究性教学、开展综合性实验几方面探讨了教学改革,以促进学生的学习积极性,提高教学效果.     

60Coγ诱变对白桦愈伤组织再生的影响及再生植株染色体数量变异分析

以白桦(Betula platyphylla)叶片愈伤组织为材料,对诱变后的愈伤组织分化、不定芽生根情况以及染色体数量变异进行了研究:经γ射线处理后,在10~30 Gy范围内愈伤组织的不定芽分化率随着辐射剂量的增加显著降低;染色体数量变异在10~25 Gy呈上升趋势。试验确定,愈伤组织的适宜剂量为20 Gy,该剂量的愈伤组织分化率为53.2%,染色体数量变异率为80.3%。10~30Gy剂量的γ射线处理后,愈伤组织再生植株染色体数量变异率均在79.5%以上,多数产生亚二倍体变异类型。当辐射剂量超过25Gy时,再生植株基本都变成了亚二倍体,γ射线对照射后的白桦不定芽生根具有推迟和抑制作用。