酵母硒对分娩应激状态下围产期奶牛代谢的影响

【目的】研究酵母硒对围产期奶牛代谢的影响,从代谢物变化的角度阐述其在分娩应激状态下的生物学作用。【方法】选择24头体况、胎次、年龄、体质量和预产期相近的健康围产前期奶牛随机分为对照组和试验组,每组各12头,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.15g/kg干物质的酵母硒,于产前21d开始饲喂,分娩后当天停止饲喂。在产前21d及分娩后6h内尾静脉采血,使用EDTA抗凝并离心收集血浆。应用UPLC-TOF/MS分析技术,在正负离子模式下对所有血浆样品进行代谢组学分析,数据经预处理后利用多维统计(包括主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discriminantanalysis,OPLS-DA))和单变量(t检验和差异倍数)分析方法,分析在产前21d和分娩当天试验组和对照组奶牛血浆中代谢物差异性,以OPLS-DA获得的VIP值1和t检验中P0.1为条件筛选差异代谢物。【结果】2组奶牛血浆代谢物在饲喂硒前差异不明显,饲喂硒后有19种差异代谢物。与对照组相比,试验组奶牛在分娩后血浆中L-苯丙氨酸、L-亮氨酸、异亮氨酸、L-谷氨酰胺、L-缬氨酸、酪胺、酮亮氨酸和硫酸吲哚酚显著降低(P0.05),甜菜碱、7-甲基黄嘌呤、马尿酸、尿囊素和柠檬酸显著升高(P0.05),L-正亮氨酸、DL-苯丙氨酸、乙二醇单乙醚和氧代己二酸呈降低趋势(0.05P0.1),L-肌肽和苯乙酰甘氨酸呈升高趋势(0.05P0.1)。【结论】在分娩应激状态下,硒可能通过影响氨基酸、脂类和尿嘌呤衍生物的代谢,发挥着抗应激反应的作用。     

硒增强二十二碳六烯酸在脂多糖诱导巨噬细胞炎性反应中的抗炎作用

为了探究硒是否影响二十二碳六烯酸(DHA)在脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎性反应中发挥的抗炎作用。小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分别经10μg/m L DHA、10μg/m L DHA+0.05μmol/L亚硒酸钠、1μg/m L LPS、10μg/m L DHA+1μg/m L LPS、10μg/m L DHA+1μg/m L LPS+0.05μmol/L亚硒酸钠诱导24 h,同时设置无添加的正常组。采用半定量反转录PCR检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)mRNA表达量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养液上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10含量。结果显示,添加亚硒酸钠(0.05μmol/L)不仅显著或极显著增强了DHA(10μg/m L)对LPS(1μg/m L)诱导RAW 264.7细胞中促炎细胞因子TNF-αmRNA表达(P0.05)和IL-1β生成(P0.01)的抑制作用,还极显著增强了DHA(10μg/m L)对LPS(1μg/m L)诱导RAW264.7细胞中抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达的促进作用(P0.01)。由此提示,硒可增强DHA在LPS诱导巨噬细胞炎症反应中的抗炎作用。     

奶牛乳腺上皮细胞的分离及NAC对其氧化损伤的保护作用

为了体外分离奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)、研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对BMEC氧化损伤的保护作用,试验采用组织块贴壁法获得细胞,用酶消化法和差时贴壁法纯化上皮细胞,将BMEC分别经500 ng/mL脂多糖(LPS)、500 ng/mL LPS+100μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)诱导24 h,以无添加为对照,采用比色法测定每组上清液中的丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:用组织块贴壁法成功分离BMEC,添加NAC不仅能极显著降低LPS诱导后BMEC中的MDA含量(P0. 01),还能极显著提高CAT和SOD活性(P0. 01)。说明NAC对BMEC氧化损伤有一定的保护作用。