枸杞体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以甘肃农业大学林学院实验基地内“宁杞 2 号”枸杞为材料,幼果用 0.1 % HgCl2进行消毒,在无菌条件下取出未成熟胚进行诱导,在胚成苗后进行继代和生根培养。培养结果表明:以 MS 为基本培养基,附加 6-BA1.0 mg/L和 IBA0.5 mg/L对体细胞胚胎诱导最有效;在 2,4-D为 1.0 mg/L和 1.5 mg/L时的培养基上胚性愈伤组织诱导率较高,分别为 51.0 %和 56.7 %;黑暗低温(10℃)处理 5d 不但可以促进细胞胚胎的发生,而且可以提高其发生的频率(60.0%)。     

枸杞叶片再生植株体系的建立

以"宁杞2号"为试材,研究了激素浓度、叶片生理状态和光照条件等因素对叶片再生的影响,建立了枸杞叶片外植体的不定芽高频再生体系。研究结果表明:以顶部充分伸展的35d叶龄的无菌苗叶片为外植体,再生效果好。将此类叶片放在含1 0mg L6-BA和1 0mg LIBA的1 2MS分化培养基上,暗培养8d后转到光下培养,28d后可见到不定芽不经过或经过很少的愈伤组织阶段,直接从叶片上分化产生,出现的高峰期在接种后3545d,芽分化率高达90 0%以上。待小芽长至1～2cm后将其从叶片上剪下,转到生根培养基(1 2MS+0 6mg LNAA+0 2mg LIBA)上得到完整植株。该再生体系可作为基因转化的受体系统。